论文摘要
研究背景失眠（insomnia）是最常见的睡眠障碍（sleep disorders,SD）,是多种躯体、精神和行为疾病所具有的常见临床表现,长期失眠会给人的正常生活和工作带来严重的不利影响,甚至会造成严重的意外事故。但其发生的确切机制目前仍不明了。觉醒与睡眠周期的调节主要与脑干的网状结构有关,其中有睡眠诱导功能的上行网状抑制系统（ascending reticular inhibitory system, ARIS）和上行网状激动系统（ascending reticular activating system, ARAS）的动态平衡决定着睡眠-觉醒周期的变化。γ-氨基丁酸（gama-aminobutyric acid,GABA）是哺乳动物中枢神经系统中最主要的抑制性神经递质。GABA与GABAA受体的结合使氯离子（chloride ion,Cl-）通道开放的频率增加,大量Cl-流入细胞膜内,引起突触膜超极化,产生抑制性突触后电位（inhibitory postsynaptic potential, IPSP）而发挥神经抑制功能。GABA转运体（gama-aminobutyric acid transporter, GAT）是一种主要位于神经元及胶质膜上的糖蛋白,属于Na+/Cl-转运蛋白家族,其亚型有GAT-1、GAT-2、GAT-3、GAT-4/BGT1和TAUT。GAT在脑组织内分布广泛,能摄取突触间隙及细胞外液的GABA,终止GABA的抑制作用,与生理病理过程关系密切。GAT表达的异常会导致GABA能神经信号传递的变化,进而导致临床上多种神经系统疾病。在神经系统发育、癫痫、精神分裂等诸多生理病理条件下,广泛存在GAT的变化。提示GAT通过影响GABA能神经元,在神经兴奋／抑制的平衡中扮演着重要的角色,而失眠正是一种神经兴奋／抑制功能失衡导致的临床疾病。地西泮（安定）是治疗失眠的经典药物,属苯二氮卓受体激动剂,通过促进GABA与GABAA受体的结合而发挥神经抑制功能。在失眠及其治疗的过程中,GAT-1会发生怎样的同步变化,目前国内外尚未见相关报道。目的本研究拟采用腹腔注射对氯苯丙氨酸（ρ-chlorophenylalanine, PCPA）制作大鼠失眠模型,并同步设立生理盐水对照组和地西泮干预组,检测大鼠脑干组织中GAT-1mRNA和GAT-1蛋白的表达变化,初步探讨其与失眠的关系,以寻找临床治疗失眠的新靶点。方法1.动物分组及处理：采用清洁级健康成年雄性Sprague Dawley大鼠为实验对象,共36只,体重180～220g。随机分为模型组、对照组和干预组三组,每组12只动物。①模型组：每日上午8：30～9：00腹腔注射PCPA300mg/kg制作实验性失眠大鼠模型,连续2天。其中PCPA用略碱性生理盐水（pH：7～8）溶解,按1ml／100g配制成混悬液。第三天以蒸馏水按1ml／100g灌胃,连续5天；②对照组：每日上午8：30～9：00以生理盐水按1ml／100g进行腹腔注射,连续2天,第三天以蒸馏水按1ml／100g灌胃,连续5天；③干预组：同模型组腹腔注射PCPA建立失眠模型之后,第三天用地西泮水溶液灌胃,0.92mg/kg,每日上午8：30～9：00一次,连续5天。其中地西泮片用蒸馏水溶解,按1ml／100g配制成水溶液。2.实验动物行为学观察及体重测量：每天定时观察大鼠行为学表现,每3小时录制大鼠活动视频半小时,纵横双向比较大鼠行为学的改变。分别于入组时、第一次腹腔注射PCPA前、第一次灌胃前及处死大鼠取材前当天上午8：00～8：20测量所有大鼠体重并记录。3.将各组受试动物于开始灌胃治疗后第6天快速断头处死,取大鼠脑干组织,超低温保存。4. RT-PCR法和WB法检测大鼠脑干GAT-1的表达。结果1.大鼠行为学表现：对照组大鼠无明显变化。模型组和干预组大鼠于第一次腹腔注射PCPA混悬液28～30h后,出现昼伏夜出的节律消失等失眠表现,模型成功率94.4%。干预组大鼠地西泮灌胃后失眠症状较模型组均逐渐恢复。2.体重变化：入组时、第一次腹腔注射PCPA前三组大鼠体重相当；第一次灌胃前模型组和干预组体重相当,但较对照组均减轻（q=5.403,p<0.01；q=5.508,p<0.01）；处死大鼠取材前模型组与干预组较对照组均减轻（q=12.214,p<0.01；q=8.045,p<0.01）,干预组较模型组增加（q=4.166,p<0.05）。3.与对照组相比,模型组和干预组GAT-1mRNA的表达均降低（q=26.522,p<0.01；q=44.468,p<0.01）,干预组较模型组表达更低（q=17.924,p<0.01）。4.与对照组相比,模型组和干预组GAT-1蛋白的表达均降低（q=11.174,p<0.01；q=16.571,p<0.01）,干预组较模型组表达更低（q=5.397,p<0.01）。结论1.脑干GAT-1表达下调可能与失眠后机体的保护性机制有关。2.地西泮下调GAT-1可能是其发挥催眠作用的机制之一。
论文目录
相关论文文献
- [1].利肺片对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的影响[J]. 中成药 2020(02)
- [2].慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的建立与评价[J]. 中国实验动物学报 2020(02)
- [3].国内外大鼠和小鼠微生物、寄生虫检测标准的比较[J]. 实验动物与比较医学 2020(02)
- [4].武夷岩茶对酒精性肝损伤大鼠的护肝作用[J]. 武夷学院学报 2020(03)
- [5].参芎葡萄糖注射液对大鼠肺动脉高压的治疗作用及其机制[J]. 中国生物制品学杂志 2020(06)
- [6].口服蛋氨酸饲料致大鼠心室重塑的研究[J]. 天津医科大学学报 2020(03)
- [7].腹部推拿对结肠慢传输型便秘大鼠的治疗效果[J]. 新疆医科大学学报 2020(04)
- [8].基于UHPLC-Q-Exactive MS分析鉴定隐丹参酮在大鼠体内的代谢产物[J]. 质谱学报 2020(04)
- [9].针刺对慢性温和刺激大鼠粪便代谢的影响[J]. 针灸临床杂志 2020(07)
- [10].两种不同方法制造简易大鼠挤压伤模型的研究[J]. 宁夏医科大学学报 2020(08)
- [11].酸枣仁水提物对焦虑大鼠症状的改善及其对肠道菌群的影响[J]. 现代食品科技 2019(11)
- [12].早期肠内营养对重症肺炎大鼠免疫功能的影响分析[J]. 中国医学前沿杂志(电子版) 2017(01)
- [13].右美托咪定后处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 临床医学工程 2017(02)
- [14].滨蒿内酯对大鼠实验性变应性鼻炎的疗效及机制[J]. 贵州医科大学学报 2017(01)
- [15].黄连解毒汤对营养性肥胖大鼠的毒性研究[J]. 光明中医 2017(10)
- [16].三七总皂甙对骨折大鼠血管内皮生长因子基因扩增及蛋白表达水平影响的研究[J]. 临床医药文献电子杂志 2017(51)
- [17].小花棘豆中毒对大鼠下丘脑—垂体—卵巢轴α-甘露糖苷酶的影响[J]. 福建农林大学学报(自然科学版) 2016(01)
- [18].法舒地尔对百草枯致大鼠肺纤维化的干预作用[J]. 浙江实用医学 2016(01)
- [19].富血小板血浆对创伤性颅脑损伤大鼠神经功能的保护作用[J]. 吉林大学学报(医学版) 2016(05)
- [20].白虎汤对全身炎症反应综合征大鼠炎症因子的影响[J]. 四川中医 2015(01)
- [21].长期饮用淡化海水对大鼠血脂影响[J]. 中国公共卫生 2015(07)
- [22].辛伐他汀预处理对大鼠神经源性肺水肿的作用及其机制[J]. 中国动脉硬化杂志 2015(10)
- [23].猫捉大鼠[J]. 中小学音乐教育 2020(07)
- [24].西维来司钠对大鼠脑出血保护作用机制的实验研究[J]. 现代养生 2017(10)
- [25].药对藿香-陈皮配伍前后对功能性消化不良大鼠的初步药效学研究[J]. 健康之路 2017(07)
- [26].VND3207药物对中子辐照大鼠脏器指数的影响[J]. 中国原子能科学研究院年报 2016(00)
- [27].韭菜洋葱有助睡眠[J]. 益寿宝典 2017(14)
- [28].毒瘾也“世袭”?雄性大鼠毒瘾遗传给后代[J]. 创新时代 2017(08)
- [29].脉冲射频治疗对带状疱疹后神经痛模型大鼠脊髓背角自噬的影响[J]. 临床麻醉学杂志 2019(12)
- [30].麝香保心丸对高尿酸血症大鼠内皮功能的影响[J]. 中西医结合心脑血管病杂志 2019(23)