聚羟基脂肪酸酯三维多孔微球支架作为细胞载体在组织工程的应用

论文摘要

本论文选用聚羟基脂肪酸酯(PHAs)制备一种新型的生物高分子微球支架作为细胞载体,并对其进行生物相容性的评估。以碳酸氢铵为气体制孔,采用(W1/O/W2)复乳法制备聚羟基脂肪酸酯多孔微球支架。选用PHA家族中生物相容性良好的PHBHHx,依次优化了有机溶剂,内水相碳酸氢铵的浓度,外水相PVA的浓度,油相PHBHHx的浓度,初乳中油水的比例,初乳的匀浆速度以及温度共七个影响PHA多孔微球支架制备的条件。最终得到平均粒径为415.31μm,表面孔状结构的平均孔径为22.71μm,平均吸水率为31.65%的多孔微球支架。将所制备的多孔微球支架用于培养小鼠成纤维细胞L929和小鼠胚胎细胞NIH/3T3以研究生物相容性。通过激光共聚焦和扫描电子显微镜观察发现:培养24小时后,两种细胞贴附在微球支架表面;培养96小时后,部分细胞通过微球支架表面的孔状结构进入支架内部,并且微球支架表面的细胞数量也明显增加。试验结果表明PHBHHx材料制备的多孔微球支架能有效地促进细胞的增殖,具有良好的生物相容性,是一种新的细胞载体。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 前言
• 1.1 组织工程
• 1.1.1 组织工程概念、发展历史及意义
• 1.1.2 组织工程的基本原理和内容
• 1.1.3 组织工程所面临的挑战
• 1.2 可注射型支架
• 1.2.1 三维支架
• 1.2.2 三维支架的制备
• 1.2.3 可注射性支架
• 1.2.4 可注射性细胞微载体的制备方法
• 1.3 聚羟基脂肪酸酯
• 1.3.1 概述
• 1.3.2 PHA的物理化学性质
• 1.3.3 PHA在组织工程方面的应用
• 1.4 选题的目的及其意义
• 第2章 实验材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 基本实验材料
• 2.1.2 常用溶液
• 2.1.3 常用仪器设备
• 2.2 PHA多孔微球支架的制备和特征检测
• 2.2.1 PHA多孔微球支架的制备
• 2.2.2 PHA多孔微球支架截面的制备
• 2.2.3 PHA多孔微球支架的粒径的测定
• 2.2.4 PHA多孔微球支架的表面孔径的测定
• 2.2.5 PHA多孔微球支架的内部结构孔径的测定
• 2.2.6 PHA 多孔微球支架吸水率的测定
• 2.3 PHA多孔微球支架作为细胞支架的研究
• 2.3.1 细胞培养
• 2.3.2 PHA多孔微球支架的灭菌和细胞接种前预处理
• 2.3.3 细胞接种
• 2.3.4 激光共聚焦观察PHA多孔微球支架上的细胞
• 2.3.5 扫描电镜观察PHA多孔微球支架上的细胞
• 第三章 微球支架的制备
• 3.1 四种PHA材料制备的微球支架形态的比较
• 3.2 有机溶剂对PHA微球支架形态的影响
• 3.3 内水相碳酸氢铵浓度对PHA微球支架形态和吸水率的影响
• 3.4 外水相PVA浓度对PHA微球支架形态和吸水率的影响
• 3.5 油相PHA浓度对PHA微球支架形态和吸水率的影响
• 3.6 （W1/O）比例对PHA微球支架形态和吸水率的影响
• 3.7 初乳的匀浆速度对PHA微球支架形态和吸水率的影响
• 3.8 温度对PHA微球支架形态和吸水率的影响
• 3.9 讨论
• 第四章 多孔微球支架作为细胞载体
• 4.1 L929 和NIH/3T3 成纤维细胞的观察
• 4.2 PHBHHx微球支架上细胞生长状态的激光共聚焦观察
• 4.3 PHBHHx微球支架上细胞生长状态的扫描电镜观察
• 4.4 讨论
• 第五章 结语
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历及在学期间发表论文与研究成果