山楂叶总黄酮及原花青素的综合提取精制工艺

论文摘要

山楂为蔷薇科山楂属植物山里红或山楂的干燥成熟果实。主要功能为消食健胃、行气散瘀。近年来,用山楂叶治疗心血管方面疾病的研究较多。其化学成分主要有三萜和黄酮两大类,尤其以黄酮类研究较多。本文从山楂叶总黄酮及原花青素两个方面进行了提取及精制工艺的系统研究。对山楂叶总黄酮的水提取工艺进行了摸索。通过实验确定最佳提取条件为：料液比1：20、浸提时间为2h、浸提次数为2次。使用ZTCⅡ型天然吸附澄清剂,使得NaNO2-Al（NO3）3比色法测定总黄酮含量准确度提高,误差减小,可消除鞣质及多糖等对黄酮测定的干扰,用该法定量测定黄酮含量得到较好的结果并避免了树脂堵塞。使用大孔吸附树脂对山楂叶总黄酮的提取进行精制,并对树脂进行了筛选,方法简便易行,结果较理想。对吸附-解吸效果较好的D-101树脂的吸附-解吸条件进行了研究,确定了最佳的精制工艺条件分别为：上柱液pH值4.54-6.02；上柱速度3BV／h；上样量4BV-5BV；样液浓度1.25g／L；洗脱剂为60%乙醇；洗脱剂流速2BV／h；洗脱剂用量1BV。在此条件下,精制出的黄酮纯度达到89.1%,满足山楂叶黄酮作为药品原料药纯度需大于80%的要求。实验优化了山楂叶原花青素浸提条件,确定了乙醇-水做浸提溶剂时的最佳工艺条件为：浸提浓度70%,浸提时间60min,浸提温度为50℃,料液比为1：6,浸提次数为1次。通过正交实验方差分析确定温度对山楂叶原花青素提取有显著影响。在此条件下,得率为3.85%。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 前言
• 1.1 山楂概述
• 1.2 山楂的化学成分
• 1.3 黄酮类化合物
• 1.4 原花青素概述
• 1.5 山楂中的微量元素及氨基酸
• 1.6 山楂叶提取物的生理活性研究概况
• 1.6.1 对心血管系统的作用
• 1.6.2 对血小板聚集的影响
• 1.6.3 对自由基的清除作用
• 1.6.4 抗癌作用
• 1.6.5 利尿作用
• 1.7 植物有效成分的提取分离技术综述
• 1.7.1 中药有效成分的现代提取技术研究进展
• 1.7.2 中药有效成分的分离技术研究进展
• 1.8 天然吸附澄清剂概述
• 1.9 中药精制分离耦合技术概述
• 1.9.1 膜耦合技术
• 1.9.2 超临界流体耦合技术
• 1.9.3 结晶耦合技术
• 1.9.4 耦合技术的研究前景
• 1.10 本论文的立题依据及研究内容
• 1.10.1 立题依据
• 1.10.2 研究内容
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 原料
• 2.1.2 试剂
• 2.1.3 主要仪器
• 2.1.4 主要试剂的配制
• 2.1.5 主要装置图
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 山楂叶提取液及提取物中总黄酮的测定方法
• 2.2.2 山楂叶提取液中固形物含量的测定
• 2.2.3 山楂叶中总黄酮含量的测定
• 2.2.4 山楂叶提取液的澄清实验
• 2.2.5 大孔吸附树脂吸附实验
• 2.2.6 山楂叶原花青素的提取分离实验
• 3 结果与讨论
• 3.1 山楂叶总黄酮直接水提法实验结果
• 3.1.1 预处理因素对总黄酮产量的影响
• 3.1.2 料液比对总黄酮产量的影响
• 3.1.3 浸提时间因素对总黄酮产量的影响
• 3.1.4 浸提次数因素对总黄酮产量的影响
• 3.1.5 直接水提法因素水平表
• 3.1.6 正交实验结果
• 3.1.7 正交实验结果分析
• 3.1.8 澄清剂实验
• 3.1.9 重现性实验
• 3.2 大孔吸附树脂分离纯化山楂叶总黄酮实验
• 3.2.1 静态吸附实验
• 3.2.2 动态吸附实验
• 3.2.3 大孔吸附树脂纯化山楂叶总黄酮实验结果
• 3.2.4 大孔吸附树脂吸附稳定性实验
• 3.2.5 山楂叶总黄酮提取纯化工艺流程
• 3.3 原花青素的提取工艺优化及初步分离实验
• 3.3.1 标准曲线的制备
• 3.3.2 原花青素提取工艺的优化
• 3.3.3 正交实验法确定乙醇提取最佳工艺
• 3.3.4 盐析法去除蛋白质
• 3.3.5 溶剂沉淀
• 3.3.6 山楂叶原花青素提取及初步精制工艺重现性实验
• 3.3.7 山楂叶原花青素提取工艺流程
• 3.3.8 原花青素产物的红外光谱分析
• 4 结论
• 5 展望
• 6 参考文献
• 7 研究生期间发表的论文
• 8 致谢