论文摘要
目的通过建立大鼠高同型半胱氨酸血症（Hyperhomocysteinemia,Hhe）模型,观察胎鼠心脏畸形情况,探讨同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）、间隙连接蛋白43（Connexin43,Cx43）mRNA表达及叶酸（Folic Acid,FA）与先天性心脏病（Congenital heart defect,CHD）的关系,从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。方法40只S-D孕鼠随机分为四组:低剂量Hcy建模组（1%Hcy,A组）、高剂量Hcy建模组（2%Hcy,B组）、FA干预组（C组）及生理盐水对照组（D组）,每组各10只。大鼠妊娠第7天始腹腔注射不同剂量的Hcy:A组1%Hcy100mg/（Kg.d）、B组2%Hcy200mg/（Kg.d）、C组2%Hcy200mg/（Kg.d）、D组生理盐水同体积注射,C组自确定妊娠起FA按4mg/（Kg.d）给药。妊娠第20天剖宫取胎,体视显微镜观察胎鼠心脏畸形情况,高效液相色谱-电化学法检测孕鼠血浆Hcy浓度（妊娠前和妊娠20天）。选取各组部分胎鼠心肌组织（A、B、C三组CHD胎鼠心脏及非CHD胎鼠心脏分别各取11例、15例,D组非CHD胎鼠心脏15例）提取RNA,应用realtime PCR检测Cx43mRNA在胎鼠心脏的表达情况。结果1.A、B两组妊娠前（11.94±0.39μmol/L,11.81±0.88μmol/L）与妊娠第20天（20.90±1.08μmol/L,30.47±1.11μmol/L）孕鼠血浆Hcy浓度比较,p＜0.01,妊娠第20天血浆Hcy浓度高于妊娠前的,大鼠Hhe模型建立成功;妊娠20天四组孕鼠血浆Hcy浓度比较,B组（11.81±0.88μmol/L）＞A组（20.90±1.08μmol/L）＞D组（10.98±0.77μmol/L）,B组（30.47±1.11μmol/L）＞C组（21.92±1.23μmol/L）＞D组（10.98±0.77μmol/L）,p值均＜0.01。2.四组心脏畸形率分别为:9.57%、14.13%、9.73%及0.75%,A与B及B与C比较,p＞0.05;A、B、C分别与D比较,p值均＜0.01,外源性Hcy可引起胎鼠心脏畸形。3.Cx43mRNA在四组胎鼠心脏表达的比较:组内及组间比较在CHD胎鼠心脏及非CHD胎鼠心脏的表达,p值均＜0.01,Cx43mRNA在CHD胎鼠心脏中的表达高于非CHD胎鼠。三组CHD胎鼠心脏中的表达比较:B组＞A组,B组＞C组,p值均＜0.01。各组非CHD胎鼠心脏组织的表达,p值均＞0.05。孕鼠血浆Hcy浓度与CHD胎鼠心肌组织Cx43mRNA表达呈正相关,r=0.984,p＜0.01。结论1.Cx43mRNA在CHD胎鼠心脏中的表达高于非CHD胎鼠,Hcy可能通过上调Cx43mRNA的表达引起胎鼠心脏畸形。2.FA可降低孕鼠血浆Hcy水平。