幽门螺杆菌诱导胃黏膜细胞氧化性DNA损伤的研究

论文摘要

目的:氧化性DNA 损伤的产生和累积在各种胃黏膜病变如胃癌的发生发展过程中具有重要意义。幽门螺杆菌（Hp）的感染状态可能导致胃黏膜细胞内外源性氧化性DNA 损伤的显著增加,目前相关研究多局限于采用免疫组化法针对各类Hp 相关胃黏膜病变的病理资料进行研究,难以直接反映幽门螺杆菌对胃黏膜上皮细胞内氧化性DNA 损伤的作用。本研究采用Hp 培养滤液直接作用于人正常胃黏膜上皮细胞系GES-1,利用免疫细胞化学法检测被处理后的胃黏膜上皮细胞GES-1 内的氧化性DNA 损伤情况。旨在探讨Hp 诱导的氧化性DNA 损伤在Hp 相关疾病中的作用。方法: 液体培养Hp 菌株NCTC11637 和G50,直至600nm 处光密度值达到0.7 时,离心收集Hp 培养滤液,-80℃保存。空泡毒素试验用于检测Hp培养滤液中的空泡毒素（VacA）的存在情况。四唑盐（MTT）比色试验用于检测Hp 培养滤液对GES-1 细胞增殖的影响。将不同浓度的Hp 培养滤液和Hp 空白培养基作用于正常胃黏膜上皮细胞系GES-1,并分别在不同时间取出细胞爬片, 4%多聚甲醛固定,免疫细胞化学法用于检测GES-1 细胞内氧化性DNA 损伤的敏感指标8-羟基脱氧鸟苷的表达情况。结果: 1. 空泡毒素试验显示4、6、8、10mg/ml 的NCTC11637 培养滤液分别与Hela 细胞作用48h 后,显微镜下观察可见超过50%的Hela 细胞胞浆中出现了空泡样变,而各种浓度的G50 培养滤液作用于Hela 细胞后则未

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