枣水溶性多糖的研究

论文摘要

枣（Ziziphus jujuba Mill.）为鼠李科枣属植物。枣成熟果实是传统中药和滋补保健佳品,具有镇静、安神、补血、健脑、抗癌、增强免疫力等功效。作为药食通用的优质果品,对其系统研究和开发利用还处于初级阶段。枣含有丰富的糖、三萜及其苷类,尚含黄酮、酚酸、维生素等成分。对枣中化学成分的研究尤其是对枣中主要成分多糖的研究还远不及同类的传统中药。为了明确枣中糖类的有效成分,探讨其作用机制,以利于今后枣的合理开发和利用,本文对金丝小枣（Ziziphus jujuba Mill.cv.jinsixiaozao）水溶性多糖进行了系统的研究,并对其进行了体外免疫活性和抗肿瘤活性筛选。此外,还对不同枣品种,枣的不同器官和不同发育期枣果实的水溶性多糖的组成和含量进行了分析。 金丝小枣果实通过水提醇沉,再以Sevage法和反复醇洗除去蛋白质和色素,得到粗多糖。经DEAE-纤维素柱色谱及Sepharose CL-6B和Sephadex G-25柱色谱纯化得到了12个纯多糖,运用酸水解、甲基化、部分酸水解、HPLC、GC,IR光谱、1DNMR和2D NMR技术等,研究分析了粗多糖和纯多糖的化学性质,分离纯化得到的12个均一多糖中1个为中性多糖,11个为酸性多糖。 通过体外脾细胞增殖试验对金丝小枣水溶性多糖进行了研究。结果表明,粗多糖中的大分子量粗多糖具有更好的免疫活性。经DEAE柱色谱分离,从水和低浓度盐洗脱的多糖级分以及从这些级分中分离纯化的多糖具有较高的体外免疫活性。通过体外肿瘤细胞抑制试验对从金丝小枣中纯化的12个多糖进行了研究,结果表明中性多糖以及通过水和低浓度盐洗脱级分中分离纯化的大分子量多糖具有较好的抗肿瘤活性。 运用水提醇沉的方法提取了金丝小枣、冬枣、圆铃枣、圆铃小枣、怀柔大脆和月光6个枣品种,冬枣的花、果实和叶片3种器官以及金丝小枣不同发育期果实中的水溶性多糖,并通过苯酚-硫酸法测定了多糖的含量。结果显示,6个品种中金丝小枣具有更高的多糖粗提得率和多糖含量;各个器官中花器官具有更高的多糖粗提得率和多糖含量;果实发育的前期,多糖含量较低,在果实发育的大部分时期多糖含量处于缓慢增长状态,果实近成熟期多糖含量急速增加至最高。 本研究首次系统对金丝小枣果实中的水溶性多糖的性质和活性进行了研究,并对不同枣品种,枣的不同器官以及不同发育期枣果实中的水溶性多糖进行了研究。此研究丰富了枣化学成分研究的内容,明确了枣果实中免疫活性成分和抗肿瘤活性成分,为枣果实以及枣各器官的开发利用提供了科学依据。

论文目录

• 1 引言
• 1.1 研究意义
• 1.2 多糖研究进展
• 1.2.1 多糖的来源
• 1.2.2 多糖的分类
• 1.2.3 多糖的提取、分离和纯化
• 1.2.4 多糖的纯度鉴定
• 1.2.5 多糖的性质和结构
• 1.2.6 多糖活性
• 1.2.7 多糖活性与结构的关系
• 1.2.8 多糖的理化性质与活性
• 1.3 枣多糖研究进展
• 1.4 研究内容
• 1.4.1 金丝小枣水溶性多糖研究
• 1.4.2 不同枣品种果实，枣的不同器官以及不同发育时期枣果实中水溶性多糖研究
• 2 枣水溶性多糖成分的研究
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 试验材料与仪器
• 2.1.2 试验方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 金丝小枣多糖的提取和分离
• 2.2.2 金丝小枣多糖的纯化
• 2.2.3 金丝小枣粗多糖的性质
• 2.2.4 金丝小枣的均一多糖的结构研究
• 3 枣品种、器官及果实不同发育阶段水溶性多糖的研究
• 3.1 试验材料与方法
• 3.1.1 试验材料
• 3.1.2 仪器设备
• 3.1.3 药品、试剂
• 3.1.4 水溶性多糖粗提物的获得
• 3.1.5 多糖的糖组成分析
• 3.1.6 苯酚-硫酸法测定多糖的含量
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 不同品种枣水溶性多糖含量研究
• 3.2.2 枣不同器官水溶性多糖研究
• 3.2.3 枣果实不同发育期水溶性多糖研究
• 4 枣多糖的体外免疫活性和抗肿瘤活性研究
• 4.1 材料和方法
• 4.1.1 体外免疫活性筛选
• 4.1.2 体外抗肿瘤活性筛选
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 金丝小枣多糖各级分体外免疫活性筛选
• 4.2.2 金丝小枣均一多糖的体外免疫活性筛选
• 4.2.3 金丝小枣多糖体外抗肿瘤活性筛选
• 4.2.4 果胶类多糖 JuBP-3及其降解产物对小鼠脾细胞增殖及人肿瘤细胞的影响和构效关系
• 5 讨论
• 5.1 金丝小枣多糖的类型
• 5.2 枣多糖的结构
• 5.3 金丝小枣果胶多糖的类型
• 5.4 金丝小枣多糖的活性
• 5.5 金丝小枣多糖构效关系
• 5.6 不同枣品种、器官水溶性多糖性质
• 5.7 展望
• 6结论
• 参考文献
• 附图