重组人糖皮质激素受体原核表达载体的构建和表达

重组人糖皮质激素受体原核表达载体的构建和表达

论文摘要

目的:构建hGRα重组原核表达质粒并进行诱导表达,为下一步研制hGRα ELISA检测试剂盒和进一步研究GR与中医学阴阳虚证的关系服务。 方法:以含有hGRα cDNA的重组克隆质粒pRShGRα为模板,通过PCR扩增得到hGRα的两种基因片段,将这两种基因片段分别克隆到pGEM-T载体上,进而亚克隆到pGEX-4T-3表达载体上。将这两种重组表达质粒进行酶切、测序鉴定后,分别转化大肠杆菌DH5α和BL21(DE3),并在一定的条件下进行重组蛋白的诱导表达,诱导表达产物行SDS-PAGE和Western blotting分析。 结果:酶切和测序结果证明hGRα的两种基因片段均成功地重组入pGEX-4T-3载体。诱导表达产物的SDS-PAGE和Western blotting分析均提示有hGRα目的蛋白特异表达。 结论:本实验成功构建了hGRα的两种重组原核表达质粒,并成功诱导了它们的原核表达,为下一阶段的研究奠定了基础。

论文目录

  • 缩略词
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 实验材料
  • 实验方法
  • 实验结果
  • 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 附录一 文献综述
  • 附录二 个人简历
  • 附录三 学习期间发表论文
  • 相关论文文献

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