糖皮质激素对大鼠骨量、骨微结构和大麻素受体1表达的影响研究

论文摘要

目的:建立糖皮质激素性骨质疏松症（GIOP）大鼠模型,研究糖皮质激素（GC）对大鼠骨量和骨微结构的影响及其对骨组织中大麻素受体1（CB1R）表达水平的调控作用,探讨GIOP的发病机制。方法:52只3.5月龄雌性SD大鼠随机分为基线组、GC造模组（GCT组）和对照组。GCT组每日一次皮下注射甲泼尼龙3.5mg·kg-1·d-1,对照组以同样方式给等量生理盐水。基线组10只于实验开始时即处死,实验开始后第1周处死GCT组和对照组各10只,第9周处死GCT组和对照组各11只。应用QDR-4500A扇形束双能X射线吸收法（DXA）测量大鼠全身、离体股骨及其感兴趣区（FROI）的骨密度（BMD）;分离右胫骨和第6腰椎行显微CT扫描,通过超高分辨率三维重建后,获取骨小梁三维结构图像,最后进行松质骨定量分析;分离左胫骨和第5腰椎,脱钙后制成石蜡切片,采用免疫组化SP法观察骨组织CBIR蛋白的表达情况。结果:①GCT组在GC投药1周和9周时,全身整体BMD和离体股骨整体及感兴趣区BMD均较同一时间点的对照组下降（1周时,FROI-1例外）,其中,9周时,全身、股骨整体和FROI-5的BMD在两组间有显著性差异（P＜0.05）。大鼠造模9周后与对照组比较,骨丢失率从大到小依次为:FROI-2（-11.43%）、FROI-5（-9.83%）、FROI-7（-9.21%）、FROI-1（-8.71%）、股骨整体（-8.33%）、FROI-3（-8.12%）、FROI-4（-6.10%）、全身（-5.77%）、FROI-6（-5.18%）。对照组随增龄出现全身、股骨整体及感兴趣区BMD的增加,但GCT组BMD变化不大。②GCT组胫骨干骺端松质骨的体积骨密度（vBMD）、组织骨密度（tBMD）、骨体积分数（BVF）、骨小梁数量（Tb.N）、各向异性度（DA）和骨小梁连接密度（Conn.D）都较对照组下降,9周时,改变更显著（P＜0.05）,而骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁间隔（Tb.Sp）和结构模型指数（SMI）较对照组升高;GCT组随造模时间的延长,BVF、Conn.D、Tb.N和DA进一步下降,Tb.Th和Tb.Sp显著增加（P＜0.05）。③无论是在胫骨,还是在腰椎,CB1R阳性表达区域位于成骨细胞、破骨细胞和骨髓的基质细胞;9周时,GCT组成骨细胞与破骨细胞CB1R蛋白阳性表达率较对照组增加（P＜0.01）。④胫骨近端和第5腰椎成骨细胞和破骨细胞CB1R表达率与胫骨和第6腰椎松质骨部分微结构参数密切相关（P＜0.05～0.01）。结论:①3.5mg·kg-1·d-1甲泼尼龙持续皮下注射9周可成功制备GIOP大鼠模型。②GC持续投药可使大鼠骨量进行性下降、松质骨进行性矿化障碍和骨微结构进行性破坏,松质骨含量丰富的感兴趣区的骨量丢失最明显,同时,残余骨小梁有代偿性肥厚趋势。③GC上调成骨细胞、破骨细胞上的CB1R表达水平,可能是GIOP发病的分子机制之一。④CB1R对骨代谢的调节可能存在中枢调节以外的途径。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词一览表
• 第一章 前言
• 第二章 材料和方法
• 2.1 实验对象
• 2.2 实验方法
• 2.3 统计方法
• 第三章 结果
• 3.1 糖皮质激素对大鼠骨密度的影响
• 3.2 糖皮质激素对大鼠胫骨近端干骺端松质骨密度和微结构参数的影响
• 3.3 糖皮质激素对大鼠胫骨和腰椎中大麻素受体1蛋白表达水平的调控作用
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 第六章 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 在读期间发表论文情况