5-氨基乙酰丙酸对中华稻蝗的毒性作用及相关酶活性的影响研究

5-氨基乙酰丙酸对中华稻蝗的毒性作用及相关酶活性的影响研究

论文摘要

中华稻蝗(Oxya chinensis)属于直翅目(Orthoptera)、斑腿蝗科(Acridoidea)、稻蝗属(Oxya Serville),主要分布在非洲、澳大利亚、亚洲,在我国大多数地区均有分布。其食性比较专一,对禾本科植物为害严重,是水稻产区的重要害虫之一。近年来,由于对传统有机磷农药抗药性的提高和农业生态环境条件破坏的影响,中华稻蝗的发生较为频繁,给农业生产带来了严重为害。目前在中华稻蝗的防治中,主要仍是采用化学杀虫剂防治的手段,但是长期大量使用化学农药,引发了对人、畜健康和土壤水体等生态环境的严重污染,而且中华稻蝗已对常用杀虫剂产生了一定程度的抗药性。因此,研究和开发新型环境友好型杀虫剂进行农业害虫的合理防治具有重要的理论和实践意义。本文研究了光敏杀虫剂5-氨基乙酰丙酸(ALA)对中华稻蝗的急性毒性作用并对其生化机制进行了初步探讨。本文以中华稻蝗为材料,采自太原市晋源区或取卵室内孵化。用5-氨基乙酰丙酸以不同施药方式处理各龄期的若虫,测定药物的急性毒性作用及对虫体内酶活性的影响,从而探讨药物的毒杀效果和其生化作用机制。用不同浓度ALA以注射法(CK,250mM,450 mM,750 mM,1000 mM)处理中华稻蝗,在施药48h后(先经14h暗光饲养再给予3h光照,然后于室内饲养至48h)试虫出现明显死亡,同时测定ALA处理组中华稻蝗的乙酰胆碱酯酶(AChE)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性并比较分析。生化研究结果表明,随着5-氨基乙酰丙酸浓度的升高,处理组雌、雄虫体内AChE活性分别较对照组有显著下降(P<0.05);处理组GPx活性也较对照组有显著下降(P<0.05);同时,处理组雌、雄虫体内GSTs活性分别较对照组有显著升高(P<0.05)。由以上结果分析得出,ALA对雌、雄中华稻蝗均有明显的毒性效应且雌、雄中华稻蝗对ALA的敏感性相似;ALA可引起AChE和GPx光失活并能激活GSTs。基于以上研究结果,确定ALA对中华稻蝗的确有显著的毒杀作用并对虫体内部分酶活性有影响,继而本文又开展了进一步研究,以寻找合理的处理浓度、处理方式以及ALA的毒性作用与中华稻蝗龄期的关系。用不同浓度ALA以药膜法(CK,0.00597 mM,0.0597 mM,0.597 mM,5.97 mM)处理不同龄期(一龄,二龄,三龄,四龄)中华稻蝗,处理后先经17h-20h暗光饲养后再给予2h光照,光照过程中各龄期试虫均表现出离草、扒壁、骚动等明显的药物毒性反应,之后陆续开始出现倒地死亡。同时分体段(头、胸、腹)测定虫体内谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和酯酶的活性。毒杀作用结果表明,以药膜法施药可以使ALA在比注射法降低102-103的浓度下同样达到很高的致死率。生化测定结果显示,随ALA浓度的升高,一龄到四龄各个龄期处理组的GSTs活性均较对照组呈显著升高(P<0.05),且GSTs活性升高趋势显示,龄期越大变化越显著,其中四龄虫处理组的头、胸、腹三个体段GSTs活性都表现出显著增加,一龄虫只有腹部有显著升高(P<0.05)。酯酶活性(三种底物α-NA、α-NB、β-NA)在一龄到四龄虫体内都没有表现出显著的变化趋势。由上述结果分析得出,在GSTs和酯酶这两类代谢解毒酶系中,GSTs可被ALA诱导激活,在加速对ALA的代谢以及缓解由ALA毒性作用所引发的氧化损伤中起一定作用;而酯酶几乎没有参与到与ALA相关的生化反应中。本文通过研究ALA对中华稻蝗的毒杀作用及生化影响,表明卟啉杀虫剂ALA在低浓度下对中华稻蝗各个龄期都有十分显著的毒杀作用,其毒杀效果与施药剂量、施药方式和光照密切相关,证实ALA在中华稻蝗治理中确是一种高效、有开发潜力的新型杀虫剂。本文从生化水平初步探讨了ALA对中华稻蝗体内相关酶活性的影响,但由于ALA对昆虫毒理机制比较复杂,有待进一步对ALA主要影响的代谢酶系以及光氧化损伤的组织分布开展进一步的系统研究。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 引言
  • 1 中华稻蝗的形态特征、行为习性、发生为害及防治
  • 1.1 中华稻蝗的分布、形态特征和生活习性
  • 1.2 中华稻蝗的为害及防治
  • 2 杀虫剂的发展历史及新型环保杀虫剂的研究展望
  • 2.1 杀虫剂的历史及发展
  • 2.1.1 历史
  • 2.1.2 有机合成农药时代
  • 2.1.2.1 有机氯杀虫剂
  • 2.1.2.2 有机磷杀虫剂
  • 2.1.2.3 氨基甲酸酯类杀虫剂
  • 2.1.2.4 拟除虫菊酯类杀虫剂
  • 2.2 杀虫剂对环境的污染及开发绿色杀虫剂的迫切性
  • 2.2.1 杀虫剂对环境的污染及影响
  • 2.2.2 绿色无公害杀虫剂开发的必要性
  • 3 光敏杀虫剂的研究历史及进展
  • 3.1 光敏杀虫剂的研究历史
  • 3.2 光敏杀虫剂的研究现状
  • 3.3 光敏杀虫剂的作用机制
  • 3.4 光敏杀虫剂的优势
  • 4 卟啉类杀虫剂
  • 4.1 卟啉杀虫剂简述
  • 4.2 5-氨基乙酰丙酸简述
  • 4.2.1 ALA在农业上的用途
  • 4.2.2 ALA在医学领域的用途
  • 4.2.3 生产ALA的方法
  • 4.3 原卟啉IX简述
  • 4.4 ALA的作用方式
  • 5 本文研究内容及目的
  • 第一章 5-氨基乙酰丙酸对中华稻蝗急性毒性的测定
  • 1 材料与方法
  • 1.1 实验材料
  • 1.1.1 供试虫体
  • 1.1.2 化学试剂
  • 1.2 实验方法
  • 1.2.1 注射法施药
  • 1.2.2 药膜法施药
  • 2 实验结果
  • 2.1 ALA注射法处理组试虫死亡率
  • 2.2 ALA药膜法处理组试虫死亡率
  • 2.3 ALA处理组试虫药物反应
  • 3 分析与讨论
  • 第二章 5-氨基乙酰丙酸对中华稻蝗部分酶活性的影响
  • 1 材料与方法
  • 1.1 实验材料
  • 1.1.1 供试虫体
  • 1.1.2 化学试剂
  • 1.2 实验方法
  • 1.2.1 乙酰胆碱酯酶活性的测定
  • 1.2.1.1 乙酰胆碱酯酶酶液的制备
  • 1.2.1.2 乙酰胆碱酯酶活性的测定
  • 1.2.1.3 乙酰胆碱酯酶活性的计算
  • 1.2.2 谷胱甘肽过氧化物酶活性的测定
  • 1.2.2.1 谷胱甘肽过氧化物酶酶液的制备
  • 1.2.2.2 谷胱甘肽过氧化物酶活性的测定
  • 1.2.2.3 谷胱甘肽过氧化物酶活性的计算
  • 1.2.3 谷胱甘肽S-转移酶活性的测定
  • 1.2.3.1 谷胱甘肽S-转移酶酶液的制备
  • 1.2.3.2 谷胱甘肽S-转移酶活性的测定
  • 1.2.3.3 谷胱甘肽S-转移酶活性的计算
  • 1.2.4 蛋白浓度的测定
  • 2 实验结果
  • 2.1 ALA对乙酰胆碱酯酶活性的影响
  • 2.2 ALA对谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响
  • 2.3 ALA对谷胱甘肽S-转移酶活性的影响
  • 3 分析与讨论
  • 第三章 5-氨基乙酰丙酸对不同龄期中华稻蝗解毒酶活性的影响
  • 1 材料与方法
  • 1.1 实验材料
  • 1.1.1 供试虫体
  • 1.1.2 化学试剂
  • 1.2 实验方法
  • 1.2.1 谷胱甘肽S-转移酶活性的测定
  • 1.2.1.1 谷胱甘肽S-转移酶酶液的制备
  • 1.2.1.2 谷胱甘肽S-转移酶活性的测定和计算
  • 1.2.2 酯酶活性的测定
  • 1.2.2.1 酯酶酶液的制备
  • 1.2.2.2 酯酶活性的测定和计算
  • 2 实验结果
  • 2.1 ALA对谷胱甘肽S-转移酶活性的影响
  • 2.1.1 不同体段谷胱甘肽S-转移酶活性的变化
  • 2.1.2 不同龄期谷胱甘肽S-转移酶活性的变化
  • 2.2 ALA对酯酶活性的影响
  • 3 分析与讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 硕士期间发表学术论文情况
  • 致谢
  • 个人简历
  • 相关论文文献

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