莎能奶山羊初乳理化性质及其免疫球蛋白（IgG）的研究

论文摘要

本文以食品新资源开发、食品功能成分分离、理化特性研究及功能表征为目的，以莎能奶山羊初乳为原料，利用等离子发射光谱、氨基酸自动分析仪、气相色谱、琼脂糖免疫扩散、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、动物试验等分析、分离、功能表征技术对莎能奶山羊初乳中的矿物质、氨基酸、脂肪、蛋白质等营养成分的种类、含量、组成及营养价值进行了分析和评价；对莎能奶山羊初乳中的功能成分—免疫球蛋白（IgG）的含量、提取工艺、分离纯化、稳定性、抑菌特性、生物功能等方面进行了研究。其主要成果表现在：一、对莎能奶山羊初乳的基本营养成分包括蛋白质含量、氨基酸组成、脂肪及20种矿物元素的含量进行了分析测定。结果表明，莎能奶山羊初乳具有丰富的营养价值，分娩3h后所挤初乳中以下各成分（乳糖除外）的含量最高，其中总干物质21.32％，灰分1.57％，蛋白质10.24％，免疫球蛋白72.01mg／mL，脂肪7.73％，但这些指标均随泌乳期延长呈下降趋势；莎能奶山羊初乳蛋白质中免疫球蛋白（IgG）的平均含量为蛋白质含量的27％，17种氨基酸的总含量为5796.6mg／100mL,平均含量为340mg／100mL，7种必需氨基酸的总含量为2358.6mg／100mL，平均含量为336.94mg／100mL，占氨基酸总量的40.69％；莎能奶山羊初乳中饱和脂肪酸的含量较高，占脂肪酸总含量的75.21％，其中低级脂肪酸(C80、C100)含量占饱和脂肪酸含量的19.84％：莎能奶山羊初乳中含有丰富且较均衡的矿物元素，其中Ca、Mg、P、Zn、Fe等元素的含量很高，Cu、Fe、Mn、Mo、Ni、Zn、Se、Sn、Cr、Al、Li、Co等元素也有一定的含量，Cd、As、Pb、Hg等有害有毒元素的含量较低。二、按照FAO／WHO的蛋白标准模式对莎能奶山羊初乳中所含蛋白质的营养价值进行了评价。结果显示其蛋白组分为优质、理想的食用蛋白，其氨基酸指数和FAO／WHO标准模式相当。三、首次对莎能奶山羊初乳的理化性质尤其是热稳定性进行了研究。结果表明，莎能奶山羊初乳的相对密度、折光度、酸度、干物质均高于常乳，而pH低于常乳，但都随泌乳期的延长向常乳水平接近；莎能奶山羊初乳热稳定性较差，随泌乳期延长而增加，较高温度即可发生凝固，与pH值呈正相关，pH值增大，初乳的热凝固时间亦增大。但pH6.5～6.8条件下，蔗糖浓度为45％～60％、

论文目录

第一章文献综述

1.1 初乳的概念

1.2 初乳的营养价值

1.3 初乳的免疫作用

1.4 初乳中的免疫球蛋白

1.4.1 免疫球蛋白的基本结构与性质

1.4.2 免疫球蛋白含量的测定方法

1.4.3 免疫球蛋白的生物功能

1.4.4 初乳中免疫球蛋白水平

1.4.5 初乳中免疫球蛋白的开发现状

1.5 初乳中的乳铁蛋白

1.5.1 乳铁蛋白的基本性质

1.5.2 乳铁蛋白的抑菌作用

1.5.3 乳铁蛋白的免疫调节特性

1.5.4 乳铁蛋白和糖尿病

1.5.5 乳铁蛋白的应用前景

1.6 初乳中的过氧化物酶

1.6.1 过氧化物酶的基本性质

1.6.2 过氧化物酶的抑菌特性

1.6.3 过氧化物酶的应用前景

1.7 初乳中的溶菌酶

1.8 初乳中的免疫细胞和免疫因子

1.9 初乳中的生物活性肽

1.9.1 富含脯氨酸多肽

s1—酪蛋白肽'>1.9.2 α_s1—酪蛋白肽

s2-酪蛋白肽'>1.9.3 α_s2-酪蛋白肽

1.9.4 阿片肽类

1.9.5 免疫刺激肽

1.9.6 酪蛋白磷酸肽

1.9.7 抗血凝肽

1.9.8 抗高血压肽

1.9.9 糖巨肽

1.9.10 其他生物活性肽

1.10 初乳中的生长因子

1.10.1 类胰岛素生长因子

1.10.2 转化生长因子

1.10.3 成纤维生长因子

1.10.4 表皮生长因子

1.10.5 肿瘤坏死因子

1.11 初乳的保存

1.12 本项目立题背景及选题依据

1.13 本项目总体研究思路

第二章莎能奶山羊初乳基本组成成分的研究

1.试验材料与设备

1.1 试验原料

1.2 试验设备

1.3 试验试剂

2.试验内容与方法

2.1 乳干物质的测定

2.2 灰分的测定

2.3 乳糖的测定

2.4 蛋白质的测定

2.5 乳脂肪的测定

2.6 免疫球蛋白的测定

2.6.1 测定原理

2.6.2 琼脂糖单向免疫扩散法的操作步骤

2.7 矿物质的测定

2.8 氨基酸的测定

2.9 脂肪酸的测定

3 结果与讨论

3.1 莎能奶山羊初乳主要营养成分含量

3.2 莎能奶山羊初乳中免疫球蛋白含量

3.3 莎能奶山羊初乳主要矿物质含量

3.4 莎能奶山羊初乳氨基酸含量

3.5 莎能奶山羊初乳脂肪酸含量

4 小结

第三章莎能奶山羊初乳理化性质的研究

1 试验材料与设备

1.1 试验原料

1.2 试验试剂

1.3 主要仪器与设备

2 试验内容与方法

2.1 莎能奶山羊初乳一般理化性质研究

2.1.1 密度测定

2.1.2 酸度测定

2.1.3 pH值测定

2.1.4 折光度测定

2.2 莎能奶山羊初乳热稳定性研究

2.2.1 煮沸试验

2.2.2 酒精试验

2.2.3 羊初乳热稳定性和泌乳期的关系

2.2.4 羊初乳热稳定性和pH值的关系

2.2.5 蔗糖对羊初乳热稳定性的影响

2.2.6 尿素对羊初乳热稳定性的影响

2.2.7 乙二胺四乙酸二钠对初乳热稳定性的影响

2.2.8 柠檬酸盐对羊初乳热稳定性的影响

2.2.9 磷酸盐对羊初乳热稳定性的影响

2.2.10 钙离子对羊初乳热稳定性的影响

3 结果与讨论

3.1 莎能奶山羊初乳一般理化性质分析

3.1.1 莎能奶山羊初乳的密度

3.1.2 莎能奶山羊初乳的酸度

3.1.3 莎能奶山羊初乳的折光度

3.2 莎能奶山羊初乳热稳定性研究

3.2.1 莎能奶山羊初乳的煮沸试验和酒精试验分析

3.2.2 莎能奶山羊初乳热稳定性和泌乳期的关系

3.2.3 莎能奶山羊初乳热稳定性和pH值的关系

3.2.4 蔗糖对莎能奶山羊初乳热稳定性的影响

3.2.5 尿素对莎能奶山羊初乳热稳定性的影响

3.2.6 乙二胺四乙酸二钠对初乳热稳定性的影响

3.2.7 柠檬酸盐对莎能奶山羊初乳热稳定性的影响

3.2.8 磷酸盐对莎能奶山羊初乳热稳定性的影响

3.2.9 钙离子对莎能奶山羊初乳热稳定性的影响

4 小结

第四章莎能奶山羊初乳免疫球蛋白（IgG）的提取、分离和纯化

1 试验材料与设备

1.1 试验原料

1.2 试验试剂

1.3 试验仪器与设备

2 实验内容与方法

2.1 莎能奶山羊初乳免疫球蛋白（IgG）初步分离

2.2 莎能奶山羊初乳免疫球蛋白（IgG）的制备色谱分离与纯化

2.2.1 分离原理

2.2.2 色谱柱参数

2.2.3 操作步骤

2.3 莎能奶山羊初乳免疫球蛋白（IgG）的纯度鉴定

3 结果与讨论

3.1 莎能奶山羊初乳中免疫球蛋白（IgG）初步分离

3.2 DEAESepharose FF离子交换色谱分析

3.3 免疫球蛋白（IgG）纯度的鉴定

3.4 各步分离物中总蛋白及IgG含量的分析

4 小结

第五章莎能奶山羊初乳免疫球蛋白（IgG）稳定性研究

1 试验材料与设备

1.1 试验原料

1.2 试验试剂

1.3 试验仪器

2 试验内容与方法

2.1 兔抗羊IgG血清与标准羊IgG稀释度的确定

2.1.1 琼脂糖双向免疫扩散法的测定原理

2.1.2 琼脂糖双向免疫扩散法的操作步骤

2.1.3 琼脂糖免疫双扩散法的误差分析

2.2 莎能奶山羊初乳乳清的制备及乳清中IgG含量的测定

2.3 莎能奶山羊初乳IgG变性率的计算

2.4 加热对莎能奶山羊初乳IgG活性的影响

2.5 酸、碱对莎能奶山羊初乳IgG稳定性的影响

2.6 胃蛋白酶对莎能奶山羊初乳IgG活性的影响

2.7 胰蛋白酶对莎能奶山羊初乳IgG活性的影响

2.8 糖对莎能奶山羊初乳IgG活性的保护作用

3 结果与讨论

3.1 兔抗羊IgG抗血清与标准羊IgG稀释度的确定

3.2 初乳乳清中免疫球蛋白含量的测定

3.3 加热对莎能奶山羊初乳免疫球蛋白稳定性的影响

3.4 莎能奶山羊初乳IgG热变性过程中的D值和Z值

3.5 酸、碱对莎能奶山羊初乳IgG的影响

3.6 胃蛋白酶对莎能奶山羊初乳IgG活性的影响

3.7 胰蛋白酶对莎能奶山羊初乳IgG活性的影响

3.8 糖对莎能奶山羊初乳IgG活性的保护作用

3.8.1 蔗糖对莎能奶山羊初乳IgG变性率的影响

3.8.2 葡萄糖对莎能奶山羊初乳IgG变性率的影响

3.8.3 果糖对莎能奶山羊初乳IgG变性率的影响

3.8.4 乳糖对莎能奶山羊初乳IgG变性率的影响

3.8.5 麦芽糖对莎能奶山羊初乳IgG变性率的影响

4 小结

第六章莎能耐山羊初乳中免疫球蛋白（IgG）抑菌特性的研究

1 试验材料与设备

1.1 试验原料

1.2 试验菌种

1.3 培养基

1.4 试验仪器与设备

2 试验内容与方法

2.1 莎能奶山羊初乳免疫球蛋白（IgG）溶液的制备

2.2 菌种活化

2.3 菌悬液的制备

2.4 抑菌试验

3 结果与分析

3.1 莎能奶山羊初乳IgG对致病性大肠杆菌的抑菌试验

3.2 对莎能奶山羊初乳IgG绿脓杆菌的抑菌试验

3.3 莎能奶山羊初乳IgG对金黄色葡萄球菌的抑菌试验

3.4 莎能奶山羊初乳IgG对枯草芽孢杆菌的抑菌试验

3.5 莎能奶山羊初乳免疫球蛋白对四种菌种抑菌率的比较

4 讨论

5 小结

第七章莎能奶山羊初乳免疫球蛋白（IgG）生物功能评价

1 试验材料与设备

1.1 试验原料

1.2 试验试剂

1.3 试验仪器与设备

2 试验内容与方法

2.1 动物分组及饲喂

2.2 测试血清的制备

2.3 小鼠体重、脾及心的重量的测定

2.4 超氧化物歧化酶（SOD）活性测定

2.5 过氧化氢酶（CAT）活性测定

2.6 丙二醛（MDA）含量的测定

2.7 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性的测定

3 结果与分析

3.1 莎能奶山羊初乳IgG对动物体重及脏器／体重比值的影响

3.2 莎能奶山羊初乳IgG对小鼠血清SOD活性的影响

3.3 莎能奶山羊初乳IgG对小鼠心脏组织SOD活性的影响

3.4 莎能奶山羊初乳IgG对小鼠脑组织SOD活性的影响

3.5 莎能奶山羊初乳IgG对小鼠血清MDA含量的影响

3.6 莎能奶山羊初乳IgG对小鼠心脏组织MDA含量的影响

3.7 莎能奶山羊初乳IgG对小鼠脑组织MDA含量的影响

3.8 莎能奶山羊初乳IgG对小鼠血清CAT活性的影响

3.9 莎能奶山羊初乳IgG对小鼠心脏组织CAT活性的影响

3.10 莎能奶山羊初乳IgG对小鼠脑组织CAT活性的影响

3.11 莎能奶山羊初乳IgG对小鼠血清GSH-PX活性的影响

3.12 莎能奶山羊初乳IgG对小鼠心脏组织GSH-PX活性的影响

3.13 莎能奶山羊初乳IgG对小鼠脑组织GSH-PX活性的影响

4 讨论

5 小结

结论

参考文献

致谢

职攻读学位期间获得的科研及教学成果

术语及缩略词表（Glossary）

附录

附录1 脂肪酸色谱图

附录2 免疫球蛋白（IgG） DEAESepharose FF离子交换层析图

附录3 查新报告

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