乙酰胆碱酯酶抑制剂和金属离子对大鼠海马细胞膜离子通道的作用研究

论文摘要

老年痴呆症（AD）是一种渐次性的中枢神经系统退化性疾病,其症状主要表现为记忆力下降,思维障碍以及行为异常等。随着社会的发展,人口老龄化速度的加快,AD已成为威胁人类晚年健康的一大隐患,对其治疗迫在眉睫。研究表明90%的AD病患者在其神经冲动传输过程中缺乏乙酰胆碱（ACh）,所以减轻病症的方法之一是使用乙酰胆碱酯酶（AChE）抑制剂来抑制AChE活性,减少ACh的降解,从而增加突触间ACh的含量,增强中枢胆碱能系统的功能,而一些AChE抑制剂还能够影响中枢神经元钾通道,来协同其AChE抑制剂的作用。所以,本文在已经研究了新合成的3-联苯氨基-6（4-氯苯基）哒嗪（BCP）、3-联苯氨基-5-甲基-6-苯基哒嗪（BMP）、3-联苯氨基-6-苯基哒嗪（BPP）对电鳗AChE体外作用的基础上,用全细胞膜片钳技术研究了它们对急性分离的大鼠海马细胞外向钾通道电流（主要包括IA和IK）的作用,主要研究结果如下: （1）BCP浓度和电压依赖性地抑制IA和IK电流,而BMP和BPP只浓度依赖地抑制这两种电流。对IA的抑制作用顺序为:BPP>BCP>>BMP;对IK的抑制作用顺序为:BPP>>BMP>BCP,这就表明,当哒嗪环上5位或6位没有甲基或氯原子取代时要比有这些取代基时对大鼠海马锥形细胞的外向钾电流的抑制作用强,即哒嗪环以及哒嗪环上的5位或6位有取代基时,可能影响了大鼠海马锥形细胞钾通道蛋白的活性或作用位点,从而降低了化合物对大鼠海马锥形细胞钾电流的抑制作用,但是这些取代基对不同类型的大鼠海马锥形细胞外向钾电流的作用机制可能不同。（2）同时,通过三种化合物对IK和IA抑制作用的动力学分析,我们发现BCP使IK和IA的半数激活电压向去极化方向移动,同时也使IA的半数失活电压向去极化方向移动,即BCP推迟这些动力学过程;BMP使IA和IK的半数激活电压和失活电压都向超极化方向移动,即BMP使这些动力学过程提前;而BPP只使IA的半数失活电压向超极化方向移动,也就是BPP只使IA的失活过程提前,而对IA和IK的激活过程没有影响。（3）BCP使IK和IA的激活时间常数和失活时间常数增大,其中对IA激活时间常数的增大率达到54.7%;而BMP减小了IA的激活时间常数和失活时间常数,没有影响IK的激活时间常数;BPP增大了IA和IK的激活时间常数,减小了IA的失活时间常数。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 研究背景
• 1.1 老年痴呆症（AD）
• 1.2 乙酰胆碱酯酶（ACHE）抑制剂和铜、锌、镧在AD中的作用
• 1.3 离子通道
• 1.4 膜片钳技术介绍
• 1.5 论文选题依据和意义
• 参考文献
• 第二章 单个大鼠海马锥形细胞的分离及鉴定
• 2.1 单个大鼠海马锥形细胞的分离
• 2.2 大鼠海马锥形细胞膜通道电流的鉴定
• 参考文献
• 第三章 AChE抑制剂对大鼠海马锥形细胞外向钾电流的作用研究
• 3.1 3-联苯氨基-6（4-氯苯基）哒嗪对大鼠海马锥形细胞外向钾电流的影响
• 3.1.1 3-联苯氨基-6（4-氯苯基）哒嗪的合成及其对电鳗AChE体外活性研究
• 3.1.2 膜片钳实验部分
• 3.1.3 实验结果
• 3.2 3-联苯氨基-5-甲基-6-苯基哒嗪对大鼠海马锥形细胞外向钾电流的影响
• 3.2.1 3-联苯氨基-5-甲基-6-苯基哒嗪的合成及其对电鳗AChE体外活性研究
• 3.2.2 膜片钳实验部分
• 3.2.3 实验结果
• 3.3 3-联苯氨基-6-苯基哒嗪对大鼠海马锥形细胞外向钾电流的影响
• 3.3.1 3-联苯氨基-6苯基哒嗪的合成及其对电鳗AChE体外活性研究
• 3.3.2 膜片钳实验部分
• 3.3.3 实验结果
• 3.4 结论与讨论
• 参考文献
• 第四章 锌、铜、镧对大鼠海马锥形细胞钾、钠电流的作用研究
• 4.1 锌对大鼠海马锥形细胞钾、钠电流的影响
• 4.1.1 膜片钳实验部分
• 4.1.2 实验结果
• 4.2 铜对大鼠海马锥形细胞钟、钠电流的影响
• 4.2.1 膜片钳实验部分
• 4.2.2 实验结果
• 4.3 镧对大鼠海马锥形细胞钾、钠电流的影响
• 4.3.1 膜片钳实验部分
• 4.3.2 实验结果
• 4.4 结论与讨论
• 参考文献
• 第五章 结论与展望
• 5.1 结论
• 5.2 展望
• 参考文献
• 攻读博士学位期间发表的学术论文
• 致谢
• 承诺书
• 附录