精元康胶囊对化疗致骨髓抑制小鼠造血细胞增殖功能的影响

论文摘要

目的：应用腹腔注射环磷酰胺（CTX）造成小鼠骨髓抑制模型，通过观察用药前后骨髓抑制小鼠的有核细胞数的变化，骨髓细胞造血因子粒细胞集落刺激因子（G-CSF）、促血小板生成素（TPO）、促红细胞生成素（EPO）的表达水平及骨髓抑制小鼠集落粒单系造血祖细胞（CFU-GM）、巨核系造血祖细胞（CFU-Meg）、红系造血祖细胞（CFU-E/BFU-E）集落产率的变化，探讨精元康胶囊对骨髓抑制小鼠造血细胞增殖功能影响的作用机制，为精元康胶囊的临床运用提供可靠的科学依据。方法：选用清洁级健康雄性昆明种（KM）小鼠，鼠龄6-8W，体重18－22g，根据体重将小鼠随机分为正常组、模型组、贞芪扶正胶囊组、利可君片组、精元康胶囊高剂量组、精元康胶囊中剂量组、精元康胶囊低剂量组。前3日每日上午注射环磷酰胺100mg/kg（正常组注射等量生理盐水），下午灌胃不同药物：正常组和模型组0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）20ml/kg灌胃、利可君组32mg/20ml/kg灌胃、贞芪扶正胶囊组3g/20ml/kg灌胃、精元康高剂量组4g/20ml/kg灌胃、精元康中剂量组3g/20ml/kg灌胃、精元康低剂量组2g/20ml/kg灌胃。3d后，仅在下午灌胃不同药物。造模后第8天，断颈处死小鼠，取小鼠股骨用生理盐水冲出骨髓细胞，制备单细胞悬液。取部分单细胞悬液，用血细胞计数器镜下计数骨髓有核细胞数（BMC）。取小鼠BMC悬液的上清液，用酶标免疫试剂盒测定小鼠骨髓细胞中G-CSF、TPO、EPO的含量；并用体内植入扩散盒法培养三系造血祖细胞，在倒置显微镜下计数其集落数。结果：①精元康胶囊高剂量组升高骨髓有核细胞数的效果最为明显，精元康胶囊中剂量组升高骨髓有核细胞数的效果也比较明显，表明一定剂量的精元康胶囊能在一定程度上促进骨髓造血功能的恢复。酶联免疫实验结果显示，精元康胶囊对骨髓抑制小鼠G-CSF、TPO、EPO调控的影响呈现出剂量依赖性，尤其精元康胶囊高剂量能明显改善骨髓抑制小鼠的造血功能，使其向正常水平恢复。②体内造血祖细胞培养结果显示，精元康胶囊各剂量组均能提升骨髓抑制小鼠三系祖细胞（CFU-GM、CFU-Meg、CFU-E/BFU-E）的集落产率。其中精元康胶囊高剂量组效果更加明显。表明一定浓度的精元康胶囊对骨髓抑制有一定的改善作用。此作用可能与体液因子有关，也可能是通过刺激机体产生能影响三系造血祖细胞增殖与分化的某些生物活性物质而发挥作用。结论：精元康胶囊可明显改善CTX所造成的小鼠骨髓抑制，显著增加骨髓有核细胞数，并可调节化疗所致骨髓造血因子G-CSF、 TPO、 EPO含量的反馈性增高，使其下调，趋于正常水平；精元康胶囊可以通过机体内的体液因子或某些生物活性质来促进造血干细胞增殖，增加三系造血祖细胞的集落产率。实验结果初步证实，促进造血干细胞的增殖和分化，可能是精元康胶囊改善化疗所致骨髓抑制、恢复造血功能的机制之一。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 实验一 精元康胶囊对骨髓抑制小鼠骨髓有核细胞数及骨髓细胞造血因子（G-CSF、TPO、 EPO）的影响
• 材料与方法
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验药物
• 1.3 实验试剂
• 1.4 实验仪器及设备
• 2 实验方法
• 2.1 动物分组
• 2.2 动物模型建立及用药情况
• 2.3 药物制备
• 2.4 实验步骤
• 2.4.1 精元康胶囊对小鼠骨髓有核细胞数的影响
• 2.4.2 精元康胶囊对小鼠骨髓细胞造血因子的影响
• 2.4.3 结果计算与判断
• 3 统计分析方法
• 结果
• 1 精元康胶囊对小鼠骨髓有核细胞数的影响
• 2 精元康胶囊对小鼠骨髓细胞造血因子的影响
• 实验二 精元康胶囊对骨髓抑制小鼠三系造血祖细胞集落产率的影响
• 材料与方法
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验药物
• 1.3 实验试剂
• 1.4 实验仪器及设备
• 2 实验方法
• 2.1 动物分组及动物模型
• 2.2 药物制备
• 2.3 实验步骤
• 2.3.1 用体内琼脂培养法培养三系集落
• 2.3.2 检测方法
• 3 统计分析方法
• 结果
• 1 精元康胶囊对小鼠造血祖细胞集落产率的影响
• 理论探讨
• 1 现代医学对化疗致骨髓抑制的认识
• 1.1 化疗导致骨髓抑制的机制
• 1.2 对造血因子的认识
• 1.3 对造血祖细胞及增殖的认识
• 1.4 治疗进展
• 2 动物模型的复制
• 3 中医学对化疗致骨髓抑制的认识
• 3.1 对病名的认识
• 3.2 对证候及病因病机的认识
• 3.3 治法及临床治疗研究
• 3.4 实验研究
• 4 精元康胶囊对小鼠骨髓有核细胞数的影响
• 5 问题与不足
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 附录 1 造血祖细胞集落图片
• 附录 2 文献综述
• 参考文献