孙志毅李瑞红梁斌侯春仙王洪涛(山西省晋中市第一人民医院输血科山西晋中030600)
【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)48-0408-01
【摘要】目的通过对患者输血前不规则抗体的筛查,探讨输血前不规则抗体筛查的重要性,确保临床输血安全有效的进行。方法用达亚美微柱凝胶技术,利用Diamed-ID低离子/抗人球蛋白卡和抗体筛查细胞及聚凝胺法对3279名患者进行输血前不规则抗体的筛查。结果3279名患者输血前标本不规则抗体筛查阳性11例,其中阳性率为:0.34%。微柱凝胶法检出率为100%。聚凝胶法检出率为85%,两种方法的敏感度差异具有统计学意义(P<0.05)其中血液科、肿瘤科、妇产科不规则抗体阳性检出率占总阳性率80%。结论用微柱凝胶技术检出率敏感度高,更有利于保证临床输血安全。其抗体产生的主要因素,多为反复多次输血和妊娠,故对有输血史和妊娠史的患者惊醒输血前不规则抗体筛查,具有更重要意义。
不规则抗体是指ABO血型系统外的其他血型抗体也称为不完全抗体,多为IgG类抗体。是引起溶血反应的主要原因[1]。输血前不规则抗体筛查有助于血液的选择,防止因输血含有某抗体相应抗原的血液而引起的溶血性输血反应。
为确保临床输血的安全、有效,我院引进瑞士达亚美微柱凝胶技术,按卫生部《临床输血技术规范》规定,从2010年10月起,对我院3279名患者进行输血前不规则抗体筛查利用微柱凝胶技术和聚凝胺法进行筛查,并同时采用谱细胞进行鉴定,现将分析结果报告如下:
1资料与方法
1.1资料
2010年10月1日—2011年10月1日期间在本院手术备血和治疗用血的患者3279例。其中男性年龄(82~67岁),女性(88~31岁)。
1.2标本采集:术前备血及申请输血治疗的患者标本,用EDTAK2抗凝血4ml,及供血血袋连接标本。
1.3仪器与试剂:DiaMed微柱凝胶抗人球蛋白卡、血库专用37℃孵育箱、血库专用离心机、正反定型、RHD定型卡、ABO/D血型复检卡以上均由瑞士达亚美公司提供,上海血液生物医药制品有限公司筛选红细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号细胞、谱细胞,珠海贝索生物技术公司凝聚胺试剂盒。
1.4检测方法
1.4.1微柱凝胶法
①取微柱凝胶卡按使用说明并标记:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。
②分别于凝胶孔相对应加入50ul0.8%筛查红细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。
③分离被检测血浆,确保无纤维蛋白凝块存在,加入相对应孔各25ul。
④置37℃专用孵育箱15min。
⑤专用卡式离心机10min。
⑥结果观察:红细胞相互凝集,留滞于凝胶柱上方或中间,为阳性。反之,筛查红细胞通过凝胶沉降下柱底部为阴性[2]。
1.4.2聚凝胺法
聚凝胺实验主侧:受血者血清2滴加入供血者3%~5%红细胞1滴;次侧:供血者血清2滴家加受血者3%~5%红细胞1滴。2管各加低聚液0.65ml和聚凝胺液2滴,混匀后3000r/min离心1min,弃上清液,加解聚液2滴,轻摇观察结果,凝集在1min内散开为阳性,1min内不散开为阴性。
筛选为阳性的标本用1~10号谱细胞进行微柱凝胶抗体特异性检测方法同上。
2结果
2.1不规则抗体筛查结果
经检验,3279例申请输血者中检出不规则抗体阳性11例,阳性率为0.34%。其中男3例(27.27%),女8例(72.73%),多次输出或有输血妊娠史9例,无输血或妊娠既往史2例。
2.2不规则抗体鉴定结果
手工微柱凝胶法与改良凝聚胺法相比,两者鉴定结果一致,不规则抗体阳性患者抗体特异性分布见表1。
不规则抗体阳性患者抗体特异性分布(n)
3讨论
人类血型不规则抗体是指除ABO血型系统的抗体(抗A、抗B和抗AB)以外的所有抗体。而临床有意义的不规则的抗体能引起新生儿溶血病、溶血性输血反应或者使输入的红细胞存活期减少、在37℃反应的同种抗体。具有临床意义的不规则抗体阳性患者一旦输入具有相应抗原红细胞,抗原抗体发生免疫结合,在补体的参与下使输入的红细胞发生溶血,引起溶血性输血反应,严重是危机患者生命。抗体筛选是输血前检查的重要项目之一,由于检出率低,往往被医生所忽视,所以不规则抗体作为输血前检测项目非常重要。
本研究中,不规则抗体筛查阳性率为0.34%,说明不规则抗体在人群中的检测率比较低,与国内学者曹荣袆等报道相符。被检出的11例不规则抗体抗体阳性患者中有9例输血史或妊娠史,提示反复输血或多次妊娠可以使患者受到免疫刺激而产生不规则抗体。因此,输血前对有输血史、妊娠史的患者进行不规则抗体筛查非常必要,有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体并可在配血前鉴定此抗体,已获得充足的时间来选择缺乏相应抗原的相配合的供着,确保输血安全。不规则抗体鉴定结果提示大部分不规则抗体属于Rh血型系统。Rh血型系统是红细胞血型系统中最复杂的一个系统,Rh血型系统相应抗原抗体在体内发生反应长可导致溶血反应。因此,对不规则抗体筛查阳性的受血者,进一部做不规则抗体鉴定后选择性输血具有重要的临床意义。
参考文献
[1]翁琼珠,林礼兴.输血前不规则抗体筛检在临床输血中的意义[J],临床和实验医学杂志,2009年11月8日,104~105.
[2]李流娇,刘凌.微柱溶胶技术在不规则抗体检测中的应用[J].国际医疗卫生导报,2005.11(8).81-82.