论文摘要
目的:细胞因子对牙周组织细胞增殖具有重要的促进作用,对其特性也具有很大影响。本实验旨在探讨血小板衍生生长因子（platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB）与碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）对人牙周膜细胞（periodontal ligament cells, PDLC）增殖与碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）活性的影响,从而探讨这两种因子对人牙周组织再生性修复的作用。方法:从第3代开始体外培养人牙周膜细胞,取4-8代细胞分为空白对照组与实验组,实验组细胞用不同浓度的PDGF-BB（0.1,1,10,100ng/ml）,bFGF（1,10,50,100ng/ml）与PDL作用。检测增殖:第3天后,用MTT法检测细胞增殖情况,找到两种因子的最大与最小显效浓度。然后分别用最大与最小显效浓度单独或联合作用于PDL细胞,于作用1、3、6、9天后用MTT法检测细胞增殖情况。检测酶活性:除单独作用外,也进行两种因子增殖作用的最大与最小显效浓度联合干预。PDGF-BB与bFGF单独或联合对细胞作用第3天后,人工裂解一半细胞,已裂解的一半细胞为裂解液组,未裂解的一半细胞为培养液组,用碱性磷酸酶试剂盒检测ALP活性（用吸光度值表示）。结果:细胞增殖:第3天PDGF-BB最大显效浓度为10ng/ml,最小显效浓度为1ng/ml;bFGF最大显效浓度为50ng/ml,最小显效浓度为1ng/ml。PDGF-BB最大最小显效浓度单独作用以及与bFGF联合作用的峰值均位于第9天,bFGF单独作用峰值位于第6天。酶活性:第3天PDGF-BB作用的细胞裂解液吸光度峰值位于0.1ng/ml,细胞培养液吸光度峰值位于1ng/ml。第3天bFGF作用的细胞裂解液吸光度峰值位于1ng/ml,细胞培养液吸光度峰值位于10ng/ml。PDGF-BB（10ng/ml）+bFGF（50ng/ml）或PDGF-BB（1ng/ml）+ bFGF（1ng/ml）的吸光度值也比对照组显著增高,但比PDGF-BB或bFGF对人PDL细胞的单独作用没有统计学意义。结论:PDGF-BB与bFGF对人牙周膜细胞增殖都有明显的促进作用,而且二者联合具有协同作用,在1,3,6,9天内呈浓度时间依赖关系;两种因子对细胞酶活性也都有显著的促进作用,但是最大显效浓度反而在剂量上较小,而且二者联合对酶活性也没有明显协同作用。这两种因子对细胞增殖与碱性磷酸酶活性两方面作用结果不同,这可能与它们的本身结构与作用方式以及PDLC上相应受体有关。
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