药对甘草—黄连、荆芥—桂枝和生姜—桂枝化学成分研究

药对甘草—黄连、荆芥—桂枝和生姜—桂枝化学成分研究

论文摘要

中药所含化学成分众多且大多数组分含量较低,常规的分析仪器与检测手段通常很难满足中药的全面定性定量检测要求。随着二维联用仪器如气相色谱-质谱(GC-MS)、高效液相色谱-二极管阵列(HPLC-DAD)等的出现及相关化学计量学多元分辨技术如直观推导式演进特征投影(Heuristic evolving latent projections,HELP)等的飞速发展,将色谱的分离能力与光谱的定性鉴别能力相结合,使全面定性定量鉴定中药复杂体系成为可能。本论文以中药配伍的基本单元—药对为研究目标,利用联用色谱仪器,结合能有效利用色谱和光谱/质谱信息的化学计量学方法,实现药对化学成分的定性定量分析。本论文选取了三个药对进行研究,即相畏相杀的药对黄连-甘草,相须相使的解表药对荆芥-桂枝和生姜-桂枝。本论文的研究内容主要为以下两部分:第一部分,包括第二章和第三章。利用HPLC-DAD检测,并借助指纹图谱评价系统对黄连和甘草配伍前后,主要活性成分小檗碱和甘草酸的含量进行对比分析,并通过对比各组分的色谱保留时间和纯紫外光谱,对药对及各单味药非挥发性成分进行对比分析。第二章研究配伍前后水煎液中化学成分的变化。结果表明,黄连与甘草配伍后指标化合物小檗碱和甘草酸含量有明显降低,另外,黄连的组分在药对中基本能找到,甘草的组分只有一半左右能在药对中找到,但含量较高的几个组分在药对中都能找到,这些组分分别占了黄连及甘草单味药总相对含量的一半多。第三章对水煎液中产生的沉淀在人工胃液和人工肠液的溶解部分进行分析。结果表明,沉淀物在人工胃液及人工肠液都可以被部分溶解,但在人工肠液中比在人工胃液中更易溶解,在胃肠液中溶解的主要成分都是小檗碱。第二部分,包括第四章。利用GC-MS联用仪器,对解表中药桂枝分别与荆芥和生姜配伍前后的挥发性成分进行了定性定量分析,并采用直观推导式演进特征投影法进行分辨以获取每个组分的纯色谱和纯光谱,从而提高了组分定性和定量的准确性,以及采用交互移动窗口因子分析法(Alternative Moving Window Factor Analysis,AMWFA)对药对和单味药挥发油成分的共有组分进行分析。结果表明,药对荆芥-桂枝中鉴定的48个化学成分,12种仅来自荆芥,16种仅来自桂枝,有12种可同时在荆芥和桂枝中找到,药对中检测到6种新成分,从药对组成的含量来看,该药对为两位药加和的结果;药对生姜-桂枝中鉴定的59个化学成分,25种仅来自荆芥,21种仅来自桂枝,有10种可同时在荆芥和桂枝中找到,药对中检测到3种新成分,从该药对组成的含量来看,在药对中占据主导地位的是桂枝。本论文结果为中药配伍规律及临床药理的进一步研究提供了实验基础。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 绪论
  • 1.1 药对
  • 1.1.1 概述
  • 1.1.2 药对的组成规律
  • 1.1.3 药对配伍对化学成分的影响
  • 1.1.4 药对配伍规律研究的重要性
  • 1.2 现代分析技术在中药研究中的应用
  • 1.3 化学计量学多元分辨技术在中药研究中的应用
  • 1.4 中药药对的研究进展及本文研究的内容
  • 第二章 HPLC-DAD技术分析黄连-甘草水煎液成分
  • 2.1 理论
  • 2.1.1 黄连
  • 2.1.2 小檗碱(盐酸小檗碱)
  • 2.1.3 甘草
  • 2.1.4 甘草酸(甘草酸单胺盐)
  • 2.1.5 甘草-黄连配伍
  • 2.2 实验
  • 2.2.1 样品来源
  • 2.2.2 仪器与试剂
  • 2.2.3 对照品溶液的制备
  • 2.2.4 供试品溶液的制备
  • 2.2.5 色谱条件
  • 2.2.6 提取方法及提取溶剂的选择
  • 2.2.7 检测波长的选择
  • 2.2.8 色谱条件的优化
  • 2.3 液相色谱试验的方法学验证
  • 2.3.1 盐酸小檗碱标准曲线
  • 2.3.2 甘草酸单胺盐标准曲线
  • 2.3.3 精密度实验
  • 2.3.4 稳定性试验
  • 2.3.5 重现性实验
  • 2.3.6 加样回收实验
  • 2.3.7 空白实验
  • 2.4 样品测定
  • 2.5 结果与讨论
  • 2.5.1 小檗碱与甘草酸配伍前后定量对比分析
  • 2.5.2 药对与单味药非挥发性成分定性对比分析
  • 2.5.3 药对与单味药非挥发性成分定量对比分析
  • 2.6 小结
  • 第三章 HPLC-DAD技术分析黄连-甘草水煎液沉淀成分
  • 3.1 理论
  • 3.2 实验
  • 3.2.1 样品来源
  • 3.2.2 仪器与试剂
  • 3.2.3 人工胃液及人工肠液的制备
  • 3.2.4 供试品溶液的制备
  • 3.2.5 色谱条件
  • 3.2.6 样品测定
  • 3.3 结果与讨论
  • 3.3.1 沉淀在人工胃液与人工肠液中的溶解性对比分析
  • 3.3.2 沉淀在人工胃液与人工肠液中的组分定性对比分析
  • 3.3.3 沉淀在人工胃液与人工肠液中的组分定量对比分析
  • 3.4 小结
  • 第四章 GC-MS与化学计量学方法研究荆芥-桂枝、生姜-桂枝挥发性成分
  • 4.1 理论
  • 4.1.1 解表中药
  • 4.1.2 荆芥
  • 4.1.3 桂枝
  • 4.1.4 荆芥-桂枝配伍
  • 4.1.5 生姜
  • 4.1.6 生姜-桂枝配伍
  • 4.1.7 直观推倒式演进特征投影法(HELP)概论
  • 4.1.8 交互移动窗口因子分析(AMWFA)法概论
  • 4.2 实验
  • 4.2.1 药材来源
  • 4.2.2 仪器与试剂
  • 4.2.3 挥发油提取
  • 4.2.4 测定条件
  • 4.2.5 数据分析
  • 4.3 定性分析
  • 4.3.1 各样品的挥发油总离子流图
  • 4.3.2 直观推导式演进特征投影(HELP)法解析重叠峰
  • 4.3.3 交互移动窗口因子分析(AMWFA)法分析共有组分
  • 4.4 定量分析
  • 4.5 结果与讨论
  • 4.5.1 定性定量结果
  • 4.5.2 荆芥-桂枝药对与其组成单味药挥发油成分对比分析
  • 4.5.3 生姜-桂枝药对与其组成单味药挥发油成分对比分析
  • 4.6 小结
  • 第五章 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读学位期间主要的研究成果
  • 相关论文文献

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