绞股蓝中皂苷含量的研究

论文摘要

绞股蓝Gynostemma pentaphyllum（Thunb.）Makino为葫芦科Cucurbitaceae绞股蓝属Gynostemma多年生草质藤本植物,全草入药,绞股蓝皂苷为其主要有效成分。本实验在考察绞股蓝叶表皮微形态特征的基础上,研究不同产地绞股蓝中绞股蓝总皂苷和特征性成分绞股蓝皂苷A的含量,考察器官、品系和生长时期对皂苷含量的影响,以探讨叶形态与次生代谢物含量及环境的关系。1.绞股蓝叶片上、下表皮各为一层细胞,上表皮细胞为无规则型,具角质层,有毛状体,偶见腺毛,偶见气孔分布于主脉附近；下表皮具腺毛和气孔,偶有毛状体见于叶脉上；气孔器散生,气孔器长宽比为1.46～3.08,气孔指数为19～32,气孔密度为96～429个/mm2。2.建立了绞股蓝皂苷A的HPLP-ELSD检测法,并与HPLC-UV法进行对比,详细考察了供试品溶液制备、流动相选择、洗脱条件、雾化温度、氮气气压等影响因素,该方法简便、可靠。采用正交试验分别优化绞股蓝总皂苷和绞股蓝皂苷A的超声波提取条件,提取溶剂和溶剂用量对总皂苷提取效果影响显著；提取溶剂浓度对绞股蓝皂苷A提取效果影响显著。3.考察了绞股蓝不同部位、品系和生长时期对总皂苷和绞股蓝皂苷A含量的影响。绞股蓝的根及根茎中所含皂苷类物质的种类最多,总皂苷和绞股蓝皂苷A的含量均为叶片>根及根茎>茎>果实>种子。品系对绞股蓝皂苷的含量影响显著,不同生长时期绞股蓝总皂苷和绞股蓝皂苷A的含量不同,但总皂苷和绞股蓝皂苷A的积累变化趋势相同,均为花果期较高。4.收集了中国8个省51份绞股蓝材料,对其皂苷含量进行分析。不同产地绞股蓝总皂苷和绞股蓝皂苷A含量缺少相关性,揭示不同地区绞股蓝总皂苷类单体的种类和含量可能存在差异。绞股蓝总皂苷含量以湖北和陕西较高,各地差异显著。陕西平利栽培品种PL.1和PL.2在所考察样本中总皂苷含量最高,应推广该品系及种植经验。口味为淡味的绞股蓝比苦味、甜味和苦甜味的绞股蓝的总皂苷含量少。绞股蓝叶片复叶小叶数目与总皂苷含量没有相关性。5.绞股蓝在自然和栽培状态下,叶形态、生长状况、皂苷含量等方面均存在较大差异,体现了绞股蓝丰富的遗传多样性,也是其生长繁衍的重要基础。我们尝试探讨了绞股蓝叶表微形态与皂苷含量及环境因子的关系,还应综合考察光、温、水、气、营养等多种环境因子,有待深入研究其机制。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 引言
• 1.1 绞股蓝的研究概况与进展
• 1.1.1 绞股蓝资源概况及药用历史
• 1.1.2 绞股蓝化学成分的研究进展
• 1.1.3 绞股蓝药理作用与临床应用
• 1.1.4 绞股蓝综合开发现状
• 1.2 中药有效成分分析方法概述
• 1.2.1 中药有效成分的提取方法
• 1.2.2 光谱解析技术和常规色谱法
• 1.2.3 高效液相色谱法
• 1.2.4 质谱技术
• 1.3 蒸发光检测器在中药质量分析中的应用
• 1.3.1 ELSD的基本原理
• 1.3.2 ELSD在中药分析中的应用
• 1.4 本论文研究的内容、目的及意义
• 第2章 绞股蓝叶片表皮微形态特征的研究
• 2.1 仪器与材料
• 2.1.1 仪器
• 2.1.2 实验材料
• 2.2 实验方法
• 2.3 实验结果与分析
• 2.3.1 绞股蓝叶表皮结构
• 2.3.2 不同产地绞股蓝叶的上表皮微形态特征
• 2.3.3 不同产地绞股蓝的叶下表皮微形态特征
• 2.4 讨论
• 第3章 绞股蓝皂苷A的提取与HPLC-ELSD检测方法研究
• 3.1 仪器、试剂与材料
• 3.2 绞股蓝皂苷A的提取与检测方法研究
• 3.2.1 对照品溶液的制备
• 3.2.2 绞股蓝皂苷A提取条件的优化
• 3.2.3 色谱检测条件考察
• 3.2.4 线性关系考察
• 3.2.5 精密度考察
• 3.2.6 重现性考察
• 3.2.7 稳定性考察
• 3.2.8 加样回收率试验
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 绞股蓝皂苷A检测条件确定
• 3.3.2 线性关系考察
• 3.3.3 绞股蓝皂苷A的提取条件优化
• 3.3.4 样品制备及测定
• 3.4 讨论
• 第4章 绞股蓝中总皂苷的提取方法研究
• 4.1 仪器、试剂与材料
• 4.2 绞股蓝中总皂苷的提取方法优化
• 4.2.1 对照品溶液的制备
• 4.2.2 供试品溶液的制备
• 4.2.3 检测方法
• 4.2.4 线性关系考察
• 4.2.5 精密度考察
• 4.2.6 重现性考察
• 4.2.7 稳定性考察
• 4.2.8 加样回收率试验
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 线性关系考察
• 4.3.2 绞股蓝中总皂苷提取条件的优化
• 4.3.3 样品制备及测定
• 4.4 讨论
• 第5章 安康产绞股蓝皂苷含量的研究
• 5.1 材料
• 5.2 皂苷类物质提取及测定
• 5.2.1 材料预处理
• 5.2.2 绞股蓝中总皂苷的提取及含量测定
• 5.2.3 绞股蓝中绞股蓝皂苷A的提取及含量测定
• 5.3 结果与分析
• 5.3.1 绞股蓝不同部位总皂苷及绞股蓝皂苷A含量的比较
• 5.3.2 绞股蓝不同采收月份总皂苷及绞股蓝皂苷A含量的比较
• 5.4 讨论
• 第6章 八个省份绞股蓝中皂苷含量的研究
• 6.1 绞股蓝材料的收集
• 6.1.1 收集调查方法
• 6.1.2 绞股蓝材料
• 6.2 有效成分提取与测定
• 6.3 结果与讨论
• 6.3.1 不同省份栽培绞股蓝的皂苷含量研究
• 6.3.2 不同省份野生绞股蓝的皂苷含量研究
• 6.3.3 绞股蓝中总皂苷与绞股蓝皂苷A的含量研究
• 6.3.4 野生绞股蓝的皂苷含量与环境因子的关系
• 6.3.5 绞股蓝皂苷含量与口味的关系
• 6.3.6 绞股蓝皂苷与叶片小叶数和叶表皮微形态特征的关系
• 6.4 讨论
• 第7章 结论
• 参考文献
• 图版说明
• 图版
• 致谢
• 攻读学位期间的研究成果