荆芥挥发油体外干预5-L0活性的实验研究及相关方法学评价

论文摘要

荆芥,来源于唇形科植物裂叶荆芥Schizonepeta tenuifolia Briq.的地上干燥部分,是常用解表中药,具有解表散风、透疹之功效。荆芥挥发油含量高,是其主要有效成分之一。前期研究结果表明:荆芥挥发油（STO）抗炎作用确实,且作用机制与影响花生四烯酸的代谢有关。本课题基于前期研究结果,针对5-LO是花生四烯酸代谢过程中的关键酶,将5-LO作为切入点,深入探讨STO抗炎机理。目的:观察STO体外对5-LO活性的影响,进一步探讨其抗炎机制。同时,摸索建立中药有效部位体外干预5-LO活性的筛选方法,并作适当评价。方法:首先采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀急性炎症模型对STO抗炎作用进行再次验证;其次建立提取大鼠胸腔白细胞5-LO代谢产物LTB4和5-HETE及分离测定方法;最后运用反相高效液相色谱（RP-HPLC）紫外检测分离测定LTB4和5-HETE生物合成水平,观察STO及部分具有抗炎作用的解表药挥发油体外对5-LO活性的影响。结果:1.STO具有良好的抗炎作用:STO连续给药和急性给药两种方式对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀均具有明显抑制作用（P＜0.05或＜0.01）。2.提取并分离测定5-LO代谢产物LTB4和5-HETE的方法建立:以角叉菜胶所致急性胸膜炎模型大鼠的胸腔白细胞为基本反应体系,加入外源性AA与不同浓度的STO,在钙离子载体A23187诱导下,提取完整白细胞的LTB4和5-HE7E,运用RP-HPLC紫外检测分离测定LTB4和5-HETE。3.STO干预5-LO活性的抗炎机制:STO（二甲基亚砜溶解）和含STO的血清（浆）,体外能明显降低大鼠胸腔白细胞中的LTB4和5-HETE水平,表现出良好的抑制5-LO活性的作用,且STO的作用呈现剂量依赖性关系;STO中的主要成分薄荷酮（Menthone）、胡薄荷酮（Pulegone）单独使用或二者（M+P）合用,对LTB4和5-HETE的抑制作用均不及等效量的STO,但M+P的抑制作用优于Menthone、Pulegone的单独使用;以AA所致的足肿胀炎症模型大鼠为供体的含STO血清（浆）对LTB4和5-HETE的抑制作用优于以正常大鼠为供体的含药血清（浆）。4.方法应用:同等浓度的桂枝、辛夷、香薷、羌活挥发油体外对LTB4和5-HETE生成的抑制作用较薄荷、菊花挥发油强,初步提示辛温解表药挥发油对5-LO活性抑制作用优于辛凉解表药挥发油。结论:STO抗炎作用确切,其抗炎机制与抑制5-LO活性相关,呈剂量依赖性关系。研究结果补充、完善了荆芥挥发油的抗炎机理,有利于指导其临床合理用药。同时,实验中所建立的体外干预5-LO活性的RP-HPLC测定方法,有利于抗炎、抗过敏中药提取物的体外机制筛选。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 英文缩写词对照表
• 前言
• 课题实验流程
• 正文
• 第一部分 荆芥挥发油的制备、GC-MS成分分析、急性毒性及抗炎作用的实验研究
• 1.实验材料
• 2.实验研究
• 2.1 荆芥挥发油的制备
• 2.2 荆芥挥发油的GC-MS成分分析
• 2.3 荆芥挥发油的急性毒性实验
• 2.4 荆芥挥发油的抗炎作用
• 3.讨论
• 第二部分 挥发油体外干预大鼠胸腔白细胞5-L0活性的方法学研究
• 1.实验材料
• 2.实验研究
• 2.1 色谱条件的考察
• 2.2 供试品制备方法研究
• 2.3 HPLC测定方法研究
• 3.讨论
• 第三部分 荆芥挥发油及含药血清体外干预大鼠胸腔白细胞5-L0活性的实验研究及方法的应用
• 1.实验材料
• 2.实验研究
• 2.1 荆芥挥发油对体外大鼠胸腔白细胞5-L0活性的影响
• 2.2 荆芥挥发油含药血清对体外大鼠胸腔白细胞5-L0活性的影响
• 2.3 部分解表药挥发油对体外大鼠胸腔白细胞5-L0活性的影响
• 3.讨论
• 小结
• 问题与展望
• 参考文献
• 致谢
• 综述:5-脂氧酶活性的研究进展
• 在校期间公开发表的学术论文、专著及科研成果