论文摘要
[背景]动脉粥样硬化（AS）是血管壁的慢性炎症,是对血管壁损害的反应和修复过程,以脂质吞噬细胞和大动脉里纤维素样物质的积聚为特征。大多数心血管事件是由斑块破裂、血栓形成引起的,因此采取各种措施抑制炎症反应、稳定粥样斑块是临床预防和治疗各种心脑血管疾病及其并发症的重要目标之一。炎症在动脉粥样硬化发生、发展和演变过程中起着重要作用,单核细胞、巨噬细胞和淋巴细胞均参与了动脉粥样硬化的炎症反应过程,并产生许多细胞因子、黏附分子和炎症介质等,其中主要有白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、和干扰素-γ（IFN-γ）等。IFN-γ能诱导巨噬细胞及平滑肌细胞表达基质金属蛋白酶（MMPs）,尤其MMP-2、MMP-9等,它们能加速纤维帽胶原降解,使斑块不稳定,是破坏斑块稳定性的主要细胞因子。核转录因子（NF-κB）是调节细胞基因转录的关键因子之一,它参与许多基因,特别是机体防御功能及炎症反应有关的即早基因的表达调控。在转录水平上激活巨噬细胞、T淋巴细胞、平滑肌细胞,导致一些介质如各种生物分子、细胞因子、生长因子等的释放。茶多酚（TP）是从茶叶中提取的多酚类物质,是茶叶药效的主要活性成分,大量研究表明茶多酚具有抗氧化、抗脂质过氧化、清除自由基、抗突变和抗肿瘤形成等作用,但关于其抗动脉粥样硬化的研究却很少,抑制动脉粥样硬化病变进展的机制尚不完全清楚。[目的]本课题通过建立兔实验性动脉粥样硬化模型,观察茶多酚对动脉粥样硬化斑块中炎症因子TNF-α、IL-1β、NF-κB及MMP-2, 9等表达的影响,以进一步探讨茶多酚抗动脉粥样硬化的作用及其机制,为临床冠心病及其并发症的治疗提供理论和实验依据。[方法]将雄性新西兰大白兔30只随机分为5组,每组6只:正常对照组（NC组）、高脂模型组（AS组）、茶多酚组（TP组）、阿司匹林组（Asp组）和辛伐他汀组（sim组）。正常对照组予普通颗粒饲料,高脂模型组予高脂造模饲料（普通兔颗粒饲料加1%胆固醇粉,加0.05%胆盐和5%猪油）,茶多酚组高脂饲料加予茶多酚1.2g.kg-1.d-1,阿司匹林组予高脂饲料加阿司匹林12.5mg.kg-1.d-1,辛伐他汀组予高脂饲料加辛伐他汀5mg.kg-1.d-1;所有动物均单笼喂养,饮水不限,每日每只进食约60g/kg。每周测体重,以及时调整进食量,共喂养12周。于实验前（0周）、实验结束时（12周）禁食12h后经兔耳缘静脉抽血,检测血清TC、TG、LDL-C和HDL-C的浓度并计算动脉硬化指数（AI）;HE染色和MASSON染色观察主动脉组织形态学变化;图像分析软件测定主动脉内膜厚度（IT）、中膜厚度（MT）、内膜厚度/中膜厚度（I/M）及粥样斑块面积百分比;免疫组织化学法检测主动脉粥样硬化斑块中NF-κB、TNF-α和IL-1β及MMP-2, 9的蛋白表达, RT-PCR检测主动脉粥样硬化斑块中TNF-α及MMP-2的mRNA表达。应用SPSS13.0软件进行统计学分析,计量资料多组间比较采用单因素方差分析,多组间两两比较采用LSD-t检验。相关性分析采用Pearson相关分析。以P<0.05为有统计学意义。[结果]①实验前各组动物的体重及血清血脂比较均无显著性差异;实验第12周末,各组动物的体重均较实验前显著增加（P<0.05）,四个高胆固醇饲料组动物的TC、TG、LDL-C、HDL-C含量及AI水平均较喂养前明显升高（P<0.05）,且显著高于同时间点的正常对照组（P<0.05）。与AS组相比,TP组兔血清TC、TG、LDL-C含量及AI值显著降低（P<0.05）,血清HDL-C水平升高（P<0.05）。②与NC组相比,余各组的主动脉内膜受损、脂质沉积及炎细胞浸润程度均有不同程度的加重（P<0.05）,与AS组相比,TP组的内膜受损、脂质沉积及炎细胞浸润程度均有不同程度的减轻（P<0.05）,与阿司匹林和辛伐他汀作用相似。③与NC组相比,余各组的主动脉内中膜厚度均有不同程度的增加,斑块面积百分比亦有不同程度的增大,以AS组内中膜厚度最厚,斑块面积百分比最大;与AS组相比,TP组的内膜厚度（IT）、内中膜厚度比（I/M）及斑块面积百分比均明显减少（P<0.05）,阿司匹林组和辛伐他汀组相似。④与NC组相比,AS组NF-κB、TNF-α、IL-1β及MMP-2,9在主动脉粥样硬化斑块中的蛋白表达明显增高（P<0.05）。与AS组相比,TP干预后上述各项指标表达均显著减少（P<0.05）,与阿司匹林和辛伐他汀作用相似。⑤与NC组相比,AS组TNF-α及MMP-2在主动脉粥样硬化斑块中的mRNA表达明显增高（P<0.05）。与AS组相比,茶多酚干预后上述各项指标表达均显著减少（P<0.05）,与阿司匹林和辛伐他汀作用相似。[结论]1.动脉粥样硬化是一个慢性炎症反应过程。2.茶多酚对动脉粥样硬化病变有抑制作用,即可减轻病变程度、稳定斑块。3.茶多酚抗动脉粥样硬化作用机制与抑制局部炎症反应有关,作用可能是通过NF-κB这一细胞间信号传导途径实现的。