论文摘要
目的在施行肝移植手术的过程中,肝脏不可避免地要经历缺血再灌注过程。肝脏对缺血耐受力较低,肝脏缺血再灌注后,由于脂质过氧化反应增强、氧自由基的大量形成等损伤线粒体而最终导致肝细胞不同程度的损伤和代谢紊乱。S-腺苷蛋氨酸（SAM）是存在于人体所有组织和体液中的一种生理活性分子,它作为甲基供体和生理性巯基化合物的前体,参与体内重要的生化反应,对于肝细胞再生、分化以及调节肝细胞对于各种损伤的敏感程度都是非常重要的。然而,国内文献多报道SAM 在防止胆汁淤积方面的作用,而对于它在肝细胞缺血再灌注损伤的保护性方面研究尚少。因此,本实验拟利用大鼠肝脏缺血再灌注模型,以肝细胞的微观结构线粒体作为研究对象,对比观察3 组动物同一时间点的临床生化改变、线粒体酶学变化、能量代谢的变化以及超微结构的改变等方面的变化规律,从而探索SAM 预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其部分机制,为指导今后的实验研究及其临床应用提供科学依据。方法健康雄性清洁级SD 大鼠54 只,随机分为3 个组,每组18 只,即为对照组、缺血再灌注组（I/R 组）和腺苷蛋氨酸预处理组（SAM 组）。每组按缺血后再灌注不同时点分别再分为0、1、6 小时组。在上述三个时间点抽取下腔静脉血并切取肝组织制备线粒体,检测血清ALT、AST 和线粒体GSH、GLDH、SOD、MDA、ATP、ADP、AMP 的含量或活力以及用电镜观察线粒体超微结构的变化。实验结果按同一时间点I/R 组与对照组比较,SAM 组与I/R 组比较。结果I/R 组血清中的ALT、AST 和线粒体GLDH、MDA 均显著高于对照组,线粒体GSH、SOD、ATP 等水平显著低于对照组;而SAM 组血清中的ALT、AST 和线粒体GLDH、MDA 比照I/R 组均明显地下降了,线粒体GSH、SOD、ATP 等水平比照I/R 组均明显地升高了,这种差异有显著的统计学意义。电镜观察,对照组肝细胞线粒体结构改变不明显,大多无肿胀,线粒体膜完整。I/R 组可见线粒体数量减少,肿胀明显,嵴模糊不清,基质密度低,线粒体膜部分或完全崩解。部分肝细胞核固缩,在肝细胞之间还可见到凋亡小体。SAM 组与相同时间点I/R 组对比,肝细胞超微结构改变较轻,大部分线粒体轻度肿胀,呈圆形,仅有少数线粒体膜不完整,未见到肝细胞核固缩和溶解现象。
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