诱导子对西洋参发状根的影响

论文摘要

本文以西洋参为材料,在西洋参发状根的诱导、发状根培养条件的优化以及诱导子对西洋参发状根的影响等方面进行了研究。主要研究结果如下:研究了不同外植体、预培养时间、共培养时间、菌种及菌液浓度、AS的添加对西洋参发状根诱导的影响。通过实验得出:用发根农杆菌R1601诱导1-2周苗龄的西洋参的叶片、茎段以及带叶幼茎,以带叶幼茎的发状根诱导率最高,预培养48h,感染后的外植体在共培养48h会得到更好的结果。活化菌过程中添加100μmol/LAS可提高毛状根的诱导率。菌悬液光密度控制OD600=0.6,感染时间20min为最优条件。在培养条件的优化方面,分别用MS、改良White、SJ-1和B5,4种液体培养基培养西洋参发状根。液体SJ-1最有利于发状根的生长,月增长倍数可达31.3倍,是液体MS培养条件下的1.7倍。总皂苷积累量以改良White效果最好（8.10%）。综合发状根的生长和总皂苷的积累,MS培养基最有利。3%的蔗糖最有利于西洋参发状根的生长和总皂苷的积累。适宜西洋参发状根生长及总皂苷合成的pH值是5.8。本文研究了水杨酸、茉莉酸甲酯两种诱导子的最佳添加浓度、作用时间和两种诱导子的协同作用。本研究结果表明:水杨酸的最佳添加浓度为0.6mg/L,作用时间为144h。茉莉酸甲酯的最佳添加浓度为10umol/L,作用时间为192h-240h,证明茉莉酸甲酯可以诱导西洋参发状根次生代谢物中人参皂苷的积累。两种诱导子协同作用的最佳配比为水杨酸0.4 mg/L,茉莉酸甲酯10umol/L。本研究的实验结果为今后西洋参发状根再生植株、诱导子作用下皂苷合成机制的研究奠定理论基础。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 西洋参组织和细胞培养研究进展
• 1.1.1 西洋参愈伤组织的诱导及培养
• 1.1.2 影响西洋参愈伤组织诱导及皂苷合成的因素
• 1.1.3 不定芽再生
• 1.1.4 西洋参胚状体的诱导及其试管苗的分化
• 1.1.5 西洋参胚状体诱导率的影响因素
• 1.1.6 西洋参细胞发酵培养
• 1.2 发根农杆菌Ri质粒介导药用植物遗传转化的研究进展
• 1.2.1 发根农杆菌
• 1.2.2 Ri质粒的特性及致病机理
• 1.2.3 发状根的诱导
• 1.2.4 发状根培养物的特性及鉴定
• 1.2.5 药用植物毛状根次生代谢产物研究进展
• 1.2.6 不同理化因子对药用植物发状根中次生代谢产物含量的影响
• l.3 诱导子在调节植物次生代谢方面的应用
• 1.3.1 诱导子的定义和分类
• 1.3.2 诱导子的作用机制
• 1.3.3 诱导子的作用方式
• 1.3.4 诱导子的作用效果
• 1.3.5 诱导子在药用植物及其次生代谢产物生物合成研究中的应用
• 1.4 研究的目的与意义
• 第二章 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验方法
• 第三章 结果与分析
• 3.1 西洋参发状根的产生
• 3.2 西洋参发状根培养条件的优化
• 3.2.1 不同培养基对西洋参发状根生长及总皂苷合成的影响
• 3.2.2 不同碳源对西洋参发状根生长量及总皂苷含量的影响
• 3.2.3 培养基pH值对西洋参发状根生长及总皂苷含量的影响
• 3.3 诱导子的添加
• 3.3.1 水杨酸的添加
• 3.3.2 茉莉酸甲酯的添加
• 3.3.3 二种诱导子协同作用的研究
• 第四章 讨论与结论
• 4.1 讨论
• 4.2 结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 个人简历