论文摘要
前言 端粒酶(Telomerase)是一种核糖核蛋白酶,它以自身RNA成分为模板催化合成TTAGGG重复序列,添加到真核细胞染色体末端,延长和维持端粒长度,使细胞寿命延长。人端粒酶的主要成分有人端粒酶RNA(hTR)、人端粒酶相关蛋白1(hTP1)、人端粒酶逆转录酶(hTERT)。一般认为端粒酶三个组分中hTERT的逆转录活性是端粒酶活性的决定因素。大多数永生化细胞和恶性肿瘤细胞表达端粒酶活性,其活性有助于肿瘤的临床诊断、疗效考核和预后判断。近年研究表明,对端粒酶活性调控存在着多种不同的途径。 碱性氨基酸广泛存在于生物体内,包括精氨酸(arginine,Arg)、赖氨酸(lysine,Lys)和组氨酸(histidine,His)。氨基酸是组成蛋白质的基本单位,参与机体内多种代谢过程。我们在预实验中发现多种氨基酸,尤其是L-精氨酸,可改变端粒酶活性,影响细胞生长,目前尚无文献进行此类研究的报道。端粒酶的活性受到各种因素的调节,本研究旨在观察精氨酸、赖氨酸、组氨酸等碱性氨基酸对端粒酶活性的影响,为氨基酸与恶性肿瘤发生的关系提供科学依据。 实验材料与方法 1.实验材料 1.1 细胞:人宫颈癌细胞株(Hela)由中国医科大学实验中心三部提供。 1.2 主要试剂:L-精氨酸、赖氨酸、组氨酸、四甲基偶氮唑(MTT)、CHARPS、AEBSF均购于美国Sigma公司;PCR试剂盒购于日本Takara公司;其它常规试剂均为国产分析纯。
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