阻断促红细胞生成素对视网膜新生血管形成的影响

论文摘要

目的:建立C57BL/6小鼠氧诱导视网膜新生血管病变模型(OxygenInduced Retinopathy,OIR),观察眼内促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)含量的变化,并初步探讨EPO特异性阻断对视网膜新生血管(Retinal Neovascularization,RNV)形成的影响。方法:1.建立小鼠OIR模型,观察和计数各组小鼠视网膜新生血管。2.新生C57BL/6小鼠共60只,随机分为实验组(n=50)和对照组(n=10)。(1)实验组小鼠于出生后第7日(P7)与母鼠共置于密闭的氧箱,氧分压为75%±5%,共培养5天后(P12)回到正常氧环境,氧分压为20%±1%,建立OIR模型。对照组小鼠不进入氧箱,与母鼠一同饲养于正常氧环境。(2)所有小鼠出生后于P12—P16日隔日行右眼玻璃体内注射。实验组存活40只,随机分为4组,每组10只,分别注射含有25ng(25ng组),50ng(50ng组),250ng(250ng组)可溶性EPO受体的PBS液0.5μl以及等容积不含EPO受体的PBS液(PBS组),对照组10只小鼠注射不含EPO受体PBS液0.5μl。(3)于P17日处死各组小鼠,摘取右眼眼球制作组织切片,HE染色后行病理组织学检查,计数突破内界膜RNV内皮细胞核数。采用放射免疫法测定PBS组和对照组小鼠左眼视网膜组织EPO含量。结果:(1)视网膜组织切片显示:氧诱导后的P17日小鼠突破内界膜RNV内皮细胞核计数为80.0±6.2个,而常氧环境下的小鼠仅为1.0±0.9个,二者差异有统计学意义(P＜0.001)。(2)EPO放射免疫法测定结果显示:PBS组视网膜EPO含量为80.82±20.70 IU/L,对照组为14.42±6.80 IU/L,二者差异有统计学意义(P＜0.001)。(3)视网膜组织EPO表达与RNV增生程度呈明显正相关(rs=0.58,P＜0.01)。(4)各模型组小鼠RNV内皮细胞核数均明显多于对照组(1.3±0.5个),而在OIR模型各组中,PBS组RNV内皮细胞核计数(82.0±5.5个)多于各浓度EPO受体组(P＜0.001),25ng组的RNV内皮细胞核计数(62.2±4.5个)和50ng组RNV内皮细胞核计数(43.3±3.2个)均多于250ng组(22.2±2.1个)(P＜0.001),并且25ng组RNV内皮细胞核计数多于50ng组(P＜0.001)。结论:1.采用氧诱导小鼠视网膜病变能成功建立视网膜新生血管病变的模型。2.视网膜新生血管形成与眼球局部EPO上调有关。3.特异性阻断EPO后可以抑制视网膜新生血管,或许能成为新的治疗靶点。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词
• 第一章 氧诱导小鼠视网膜新生血管病变模型的建立
• 1 前言
• 2 材料和方法
• 3 统计学分析
• 4 结果
• 5 讨论
• 6 结论
• 第二章 OIR小鼠视网膜EPO表达及其阻断对新生血管的影响
• 1 前言
• 2 材料和方法
• 3 统计学分析
• 4 结果
• 5 讨论
• 6 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读学位期间的主要研究成果