论文摘要
第一部分:医用纳米级Fe3O4磁流体的制备及急性毒理学研究目的制备医用纳米级Fe304磁流体,观察其急性毒性,为进一步研究长期毒性、以及载附药物的实验作参考。方法采用化学共沉淀法制备Fe304磁流体,观察其理化性质。按不同剂量分别以口服法、静脉注射法及腹腔注射法对小白鼠进行给药,观察小白鼠的急性毒性反应和主要脏器的病理学改变。结果Fe304磁流体呈黑褐色混悬液,粒径范围8.3 14nm-89.465nm,平均粒径为19.920nm。小白鼠的口服半数致死剂量（LDso）>2104.8mg/kg,最大无作用剂量（EDo）为320.10mg/kg;静脉注射LD50>438.50mg/kg,EDo为160.05mg/kg;腹腔注射LD5o>1 578.6mg/kg,EDo为320.10mg/kg。主要脏器未见明显病理改变。结论用化学共沉淀法制备的医用纳米级Fe304磁流体,其急性毒性很低,可以考虑作为药物载体的基材。第二部分:葡聚糖磁性纳米微粒的制备及理化性质的研究目的制备具有磁响应性强、粒径小且分布均一的葡聚糖磁性纳米微粒,为消化道恶性肿瘤的磁控靶向治疗提供磁性载体。方法利用超声波的粉碎空化作用,采用化学共沉淀法一步合成葡聚糖磁性纳米微粒。通过扫描电镜和原子力显微镜观察微粒的形态和大小,激光光散射粒度分析仪检测微粒的粒径及Zeta电位,磁强计检测微粒的磁响应性。结果该方法制备的葡聚糖磁性微粒多呈球形或椭圆形,有效粒径为93.1±2.2nm,半峰宽为26.7±1.3nm,Zeta电位为正。在外加场强为104Oe、温度为18℃的条件下微粒的磁响应强度为26.0±1.1emu/g,撤除磁场时剩磁为零,提示微粒具有超顺磁性。结论用该法制备的葡聚糖磁性微粒,具有有效粒径小、粒径分布窄以及磁响应性高的优点,可考虑作为化疗药物或核酸的磁性载体。第三部分:磁性基因复合物的合成及特性研究目的了解葡聚糖磁性纳米微粒与核酸类物质的结合情况,以及转染肿瘤细胞的能力。方法以不同剂量的葡聚糖磁性纳米微粒与pGenesil-1质粒载体充分混合作用,按二者质量比分组,并设置单纯质粒（不加磁液）作为对照组。经溴化乙锭染色后,通过琼脂糖凝胶电泳观察二者的结合情况,并用BANDSCAN软件分析结合率;以不同基因载体（包括Lipofactamine2000、Sofast梭华及葡聚糖磁性纳米微粒）载附相等量的pGenesil-1质粒（含绿色-荧光蛋白表达框）体外转染大肠癌细胞Lovo细胞,分别给予外加磁场和不加磁场作用后,于不同时间点在倒置荧光显微镜下观察细胞的绿色荧光蛋白的表达,比较转染效率。结果电泳结果显示,随着葡聚糖磁性纳米微粒的含量逐渐增加,与其结合的pGenesil-1逐渐增多,没能结合而显影的DNA逐渐减少。BANDSCAN软件分析显示,当二者的质量比从1增加到5时,二者结合率有一个快速升高的过程,而继续增加磁性微粒的含量,结合率升高的过程趋缓;磁性转染后Lovo细胞中绿色荧光蛋白的检测结果显示,外加磁场作用能显著提高葡聚糖磁性纳米微粒的早期转染效率。结论本实验制备的葡聚糖磁性纳米微粒能够较好的与质粒DNA相结合,起到基因载体的作用;在外加磁场的作用下,其早期转染效率得到显著提高。第四部分:磁控靶向RNA干扰抑制大肠癌c-myc基因的表达目的观察磁性纳米微粒介导的RNA干扰技术基因转染大肠癌Lovo细胞后,c-myc基因转录及表达的变化,以及对大肠癌细胞的影响。方法构建含有c-myc基因潜在特异性干扰序列的质粒DNA（pGenesil-1-X1、pGenesil-1-X2）,以及含对照引物的pGenesil-1-HK。以自行制备的葡聚糖磁性纳米微粒为载体载附该质粒DNA,设裸质粒pGenesil-1、单纯葡聚糖磁性纳米微粒、不加药组作为对照组。在外加磁场的作用下,体外转染大肠癌Lovo细胞。转染后24小时,通过rt-PCR及western-blot方法分别检测大肠癌细胞内c-myc基因的mRNA转录水平及c-myc蛋白的表达,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,透射电镜观察细胞改变情况。结果磁性转染pGenesil-1-X2的Lovo细胞,其c-myc基因的mRNA转录水平降低82%,c-myc蛋白的表达降低85%,24小时的凋亡率为23.7%。结论磁控靶向RNA干扰技术在体外能够发挥干扰作用,显著抑制了c-myc基因mRNA的转录以及相关蛋白的表达,并能使大肠癌细胞产生凋亡。
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- [1].载药磁性纳米微粒靶向治疗恶性肿瘤的研究与临床应用[J]. 中国医药科学 2011(19)
- [2].顺磁性纳米微粒的磁靶向微血管栓塞研究[J]. 中国微侵袭神经外科杂志 2014(06)
- [3].γ-Fe_2O_3/Ni_2O_3复合磁性纳米微粒及磁性液体的磁化特性[J]. 西南大学学报(自然科学版) 2012(03)
- [4].单畴磁性纳米微粒体系的磁矩分布[J]. 西南师范大学学报(自然科学版) 2009(02)
- [5].磁性纳米微粒在分子影像中的应用进展[J]. 医学综述 2017(21)
- [6].功能化Fe_3O_4磁性纳米微粒在生物医学领域的应用[J]. 中国组织工程研究 2019(10)
- [7].Fe_3O_4磁性纳米微粒的制备及药物缓释性能的研究[J]. 广州化工 2014(04)
- [8].Fe_3O_4磁性纳米微粒细胞相容性的实验研究[J]. 华夏医学 2016(03)
- [9].化学诱导相变法制备γ-Fe_2O_3磁性纳米微粒的尺寸研究[J]. 西南大学学报(自然科学版) 2016(01)
- [10].耦联CD133/ABCG2抗体的荧光磁性纳米微粒的制备与靶向性实验[J]. 中国老年学杂志 2015(11)
- [11].用共沉淀法制备Fe-Ni氧化物磁性纳米微粒[J]. 西南大学学报(自然科学版) 2010(05)
- [12].Genistein-磁性纳米微粒对人肝癌细胞中FAK表达的影响[J]. 医学研究杂志 2009(08)
- [13].α_vβ_3靶向顺磁性纳米微粒MR分子成像观察Vx2肿瘤新生血管进展[J]. 国际医学放射学杂志 2013(05)
- [14].免疫磁性纳米颗粒热疗治疗艾滋病初探[J]. 中国现代医学杂志 2009(19)
- [15].纳米磁性流体的制备及性能分析[J]. 化学工程师 2008(01)
- [16].Fe_3O_4/PMIDA/Tris@CdSe/CdS制备磁性荧光双功能材料及其表征[J]. 化工新型材料 2016(08)
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- [19].Ni-Fe氧化物复合磁性纳米微粒及其磁性液体的磁化性质[J]. 科技导报 2016(18)
- [20].水-甘油基γ-Fe_2O_3/Ni_2O_3复合微粒磁性液体的磁化性质[J]. 西南大学学报(自然科学版) 2014(05)
- [21].一种离子型磁性液体的制备与性质[J]. 西南大学学报(自然科学版) 2013(03)
- [22].阿魏酸钠磁性纳米微粒对脓毒症大鼠肾损伤的保护作用[J]. 中国应用生理学杂志 2013(05)
- [23].十八胺修饰镍微球的制备与表征[J]. 化学研究 2012(06)
- [24].Genistein-磁性纳米微粒对胃癌细胞株SGC-7901生长及凋亡的影响[J]. 世界华人消化杂志 2008(09)
- [25].磁流体靶向热疗对小鼠胰腺癌的作用[J]. 科技导报 2014(30)
- [26].NHE1反义基因磁性纳米微粒对胃癌细胞NHE1蛋白表达及裸鼠成瘤力的影响[J]. 现代肿瘤医学 2011(12)
- [27].四氧化三铁磁性纳米微粒表面的氨基化修饰[J]. 化学研究 2013(02)
- [28].超顺磁性纳米粒在靶向显像和药物释放中的应用[J]. 放射学实践 2011(12)
- [29].外磁场协同卟啉-葡聚糖磁性纳米微粒的光动力学对人膀胱癌细胞的杀伤作用[J]. 北京大学学报(医学版) 2012(04)
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