西嗪伪麻缓释片中伪麻黄碱在人血浆中HPLC-MS法测定及其药代动力学研究

论文摘要

目的：建立人血浆中伪麻黄碱（Pseudoephedrine，PSE）浓度的高效液相色谱-质谱联用测定法（HPLC-MS），观察健康受试者单剂量和多剂量口服西嗪伪麻缓释片后伪麻黄碱的血药浓度经时过程，并估算相应的药代动力学参数，为伪麻黄碱临床血药浓度测定、给药方案制定和新药报批提供参考。方法：血浆样品采用甲醇沉淀后，以格列吡嗪为内标物（Internal Standard，IS）进行测定。色谱柱为XTerra（?）MS C18（3．5μm×100mm×2．1mm），流动相为甲醇-5mmol·L-1的醋酸铵水溶液（90：10，V／V），流速为0．2mL·min-1，柱温：25℃，离子检测方式为选择性离子检测（SIM），检测离子极性为正离子，采用气动辅助电喷雾离子化（ESI）方式，检测对象为伪麻黄碱（[M-H2O+H]+，m／z 148．4）和内标格列吡嗪（[M+Na]+，m／z 468．1）。10名健康受试者口服受试制剂后，用HPLC-MS法测定其血浆中伪麻黄碱浓度，所测数据用DAS ver 2．0程序处理，然后进行相关药代动力学研究。结果：1．伪麻黄碱的标准曲线线性范围为5．01ng·mL-1～1002．00ng·mL-1，回归方程为f=0．00332×C+0．00088，r=0．9997，n=5，最低检测限（LLOD）为1．00ng·mL-1；高、中、低三种浓度的日内、日间精密度RSD分别小于7．10％（n=5）和5．20％（n=3）；绝对回收率为89．60％～95．10％；相对回收率为102．20％～105．80％。2．单剂量口服受试制剂（含PSE120mg、240mg）后伪麻黄碱的主要药代动力学参数为：t1／2为（5．51±0．66）、（5．18±0．68）h，Tmax为（4．80±0．92）、（4．70±0．82）h，Cmax为（226．66±21．10）、（455．08±100．16）ng·mL-1，CL为（41．90±18．60）、（46．57±15．00）L·h-1，Vd为（209．30±116．00）、（218．40±103．50）L，AUC（0-tn）为（2929．90±474．90）、（5466．80±1372．60）ng·h·mL-1，MRT（0-tn）为（10．24±0．72）、（9．65±0．84）h。结果显示单剂量口服受试制剂后Tmax与文献报道的缓释片数据基本一致，但比文献报道的普通片的达峰时间要慢，说明受试制剂中的伪麻黄碱有明显的缓释效果，且伪麻黄碱的体内外累积溶出的相关性具有显著意义。另外单剂量口服受试制剂后t1／2与文献基本一致，且伪麻黄碱在正常人体内的过程无明显性别差异。单剂量口服受试制剂（含PSE120 mg、240mg）后的AUC（0-tn）分别为：（2929．90±474．90）ng·h·mL-1，（5466．80±1372．60）ng·h·mL-1，说明伪麻黄碱体内吸收程度有剂量依赖性。3．多剂量口服受试制剂（含PSE120mg，bid）后伪麻黄碱主要药代动力学参数为t1／2=（6．06±0．67）h，Tmax=（3．90±0．99）h，Cmax=（272．03±52．56）ng·mL-1，CL=（58．70±16．80）L·h-1，Vd=（255．30±71．20）L，AUC（0-tn）=（3419．70±750．80）ng·h·mL-1，MRT（0-tn）=（9．45±0．61）h。多次口服受试制剂3d后，伪麻黄碱血药浓度达稳态，估算的伪麻黄碱稳态药代动力学参数为Css．max为（272．03±52．56）ng·mL-1，Css．min为（104．99±37．15）ng·mL-1，Cav为（198．55±38．95）ng·mL-1，DF为（0．86±0．20），AUCss为（2382．61±467．44）ng·h·mL-1。结论：本实验建立的人血浆中伪麻黄碱HPLC-MS测定法，操作简便，灵敏度高，结果准确，样品稳定性良好，适用于伪麻黄碱的临床血药浓度检测及药代动力学研究。运用非房室药代动力学模型拟合血药浓度-时间曲线，其主要药代动力学参数与国内外文献相近，可为临床给药方案制定和新药报批提供参考。

论文目录

• 目录
• 英文缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 前言
• 2 实验材料
• 2.1 药品与试剂
• 2.2 仪器与设备
• 3 方法与结果
• 3.1 HPLC-MS法的建立
• 3.1.1 色谱条件
• 3.1.2 质谱条件
• 3.1.3 溶液的配制
• 3.1.3.1 标准液的配制
• 3.1.3.2 内标液的配制
• 3.1.4 血浆样品的处理
• 3.1.5 方法的专属性
• 3.1.6 标准曲线的绘制
• 3.1.7 最低检测限的确定
• 3.1.8 精密度实验
• 3.1.9 回收率实验（绝对回收率）
• 3.1.10 准确度实验（相对回收率）
• 3.1.11 稳定性实验
• 3.1.12 方法学的质量控制
• 3.2 药代动力学的研究
• 3.2.1 受试者的选择
• 3.2.1.1 选择依据及要求
• 3.2.1.2 中止试验条件
• 3.2.1.3 受试者来源
• 3.2.2 试验方案的制定
• 3.2.2.1 单剂量试验方案
• 3.2.2.2 多剂量试验方案
• 3.2.3 临床观察的内容与结果
• 3.2.4 随行标准曲线、质控样品的制备
• 3.2.5 血药浓度的测定
• 3.2.6 药-时曲线的绘制
• 3.2.7 药代动力学参数的估算
• 3.2.7.1 估算方法
• 3.2.7.2 估算结果
• 3.2.8 性别方差分析
• 3.2.9 体内外相关性的研究
• 4 讨论
• 4.1 研究目的
• 4.2 分析方法学
• 4.2.1 流动相的优化
• 4.2.2 内标物的选择
• 4.2.3 血样处理方法的筛选
• 4.2.4 检测方法的确定
• 4.3 药代动力学
• 4.4 其他
• 5 结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 综述
• 参考文献