论文摘要
拟获得乙肝病毒表面抗原preS2/S在Pichia Pastoris酵母中的稳定分泌表达。首先利用毕赤酵母偏爱密码子对adr亚型preS2/S基因进行修饰。然后分别将preS2/S基因与修饰后的preS2/S基因重组到酵母分泌型表达载体（pPICZαB）上,形成重组质粒,电转GS115酵母细胞,分别得到208个重组子,经过PCR筛选、摇瓶发酵筛选及酶联免疫法（ELISA）检测,获得了整合的阳性克隆,得到稳定表达的菌株。野生型preS2/S重组子的S抗原ELISA检测结果中阳性率为80.6%,修饰型preS2/S重组子的S抗原ELISA检测结果中阳性率为96.8%。将鉴定的阳性克隆菌株modpreS2/S 23发酵诱导表达后,发酵上清液经SDS-PAGE电泳,有特异蛋白条带,表达产物单体分子量为32,000Da左右,且在第四天表达量较高。纯化发酵上清液,可获得预期大小的乙肝病毒表面抗原中蛋白（middle protein, MP）,经ELISA检测S抗原呈强阳性,preS2抗原呈弱阳性。以上结果表明,preS2/S基因在毕赤酵母表达系统中获得了稳定分泌表达。
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- [3].枯草芽孢杆菌分泌载体构建及其对脂肪酶A的分泌表达[J]. 安徽农业科学 2011(30)
- [4].乳酸菌蛋白质分泌表达研究进展[J]. 中国微生态学杂志 2008(01)
- [5].pSecTag2A-HBV-L真核分泌表达载体的构建及表达[J]. 医学信息(上旬刊) 2010(09)
- [6].大豆锰超氧化物歧化酶基因在乳酸乳球菌中的分泌表达[J]. 食品科学 2015(01)
- [7].组成型分泌表达蛋白酶的重组粪肠球菌的构建及应用[J]. 食品与发酵工业 2020(03)
- [8].减毒鼠伤寒沙门菌三型分泌表达系统的构建及其特性[J]. 生物工程学报 2016(12)
- [9].介导两种半纤维素酶分泌表达的信号肽比较[J]. 中国生物工程杂志 2017(08)
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- [12].传染性法氏囊病毒免疫原基因在毕赤酵母中的高效分泌表达[J]. 中国动物检疫 2013(09)
- [13].黄曲霉尿酸氧化酶在毕赤酵母中的分泌表达及纯化[J]. 食品与发酵科技 2012(04)
- [14].大肠杆菌蛋白质分泌机理及其重组蛋白分泌表达新进展[J]. 食品与生物技术学报 2012(06)
- [15].人肝细胞生长因子在毕赤酵母中的分泌表达及其活性[J]. 中国生物制品学杂志 2011(08)
- [16].耐碱性木聚糖酶在短小芽孢杆菌中高效分泌表达的研究[J]. 中国食品学报 2008(05)
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- [20].人可溶性TRAIL原核分泌表达载体的构建[J]. 山西大学学报(自然科学版) 2011(S2)
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- [22].人血清白蛋白-C肽融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达[J]. 生物技术通报 2008(03)
- [23].重组人白介素18在毕赤酵母中的高效分泌表达[J]. 细胞与分子免疫学杂志 2008(11)
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