论文摘要
目的本研究首先探讨STAg 分别联合不同剂量IFN-γ、蜂胶鼻内免疫对小鼠的保护作用及IFN-γ、蜂胶作为佐剂鼻内免疫抗弓形虫感染的最佳剂量。再比较IFN-γ、蜂胶两种佐剂最佳剂量以及两种佐剂混合鼻内免疫辅助STAg增强机体抗弓形虫攻击的能力,并探索两种佐剂联合应用的免疫效果。方法确定IFN-γ、蜂胶最佳剂量的实验方法:分别将70 只、60 只56 周龄BALB/c小鼠随机分为5个组,用20μg STAg分别联合不同剂量IFN-(γ250U,500U,1000U,2000U)、蜂胶(5μg,10μg,20μg, 40μg)鼻内免疫小鼠2 次,间隔14 天,末次免疫后第10 天,用RH 株弓形虫速殖子4×104 个/只灌胃攻击,逐日观察小鼠健康存活情况。攻击后第29 天处死全部小鼠,分离计数脑、肝组织速殖子;计数肠系膜淋巴结(MLN)和脾T 淋巴细胞;ELISA 法检测小鼠粪便、肺冲洗液弓形虫特异性IgA 和血清IgG 抗体水平。比较IFN-γ、蜂胶佐剂作用的实验方法:将56 周龄雌性BALB/c 小鼠60 只随机分为4 个组,每组15 只,分别用20μg STAg、20μg STAg+40μg蜂胶、20μg STAg+1000U IFN-γ以及20μg STAg+40μg 蜂胶+1000U IFN-γ鼻内免疫小鼠2 次,间隔14 天,末次免疫后第10 天,用RH 株弓形虫速殖子4×104 个/只灌胃攻击,逐日记录小鼠体重,观察小鼠存活情况。攻击后第43 天处死全部小鼠,分离计数脑、肝组织速殖子;计数IEL、PP 结和脾T 淋巴细胞,免疫细胞化学(ICC)法检测其T 细胞亚群水平;ELISA 法检测小鼠粪便、鼻咽冲洗液、肺冲洗液、阴道冲洗液和血清中弓形虫特异性IgA 和血清IgG 抗体水平。结果随佐剂IFN-γ剂量的增加,小鼠存活率有升高趋势,1000U IFN-γ剂量组小鼠存活率最高达93%;脑、肝速殖子数呈下降的趋势, 其中STAg
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