酸性磷酸酶在子宫颈上皮内瘤变及子宫颈癌组织中的表达及意义

论文摘要

研究背景目前，子宫颈癌是女性第二常见的恶性肿瘤。全世界每年有约50万的新发子宫颈癌病例，且每年有大于25万患者死于子宫颈癌。其中80%以上发生在发展中国家，这些国家子宫颈癌的发生率可达80/100000人。子宫颈癌的病因至今尚未完全明了，目前认为子宫颈癌的发生与早婚、早育、多产及性生活混乱等多方面因素有关。高危型人乳头瘤病毒（Human papillomaviruses, HPV）持续感染和子宫颈癌的发生有明确相关性，几乎所有子宫颈癌患者都可以检测到高危型HPV DNA。子宫颈癌的发生过程一般需经历子宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelialneoplasia, CIN）的过程，一般认为子宫颈病变从CIN到子宫颈癌的过程需5-10年，如果能及早的发现癌前病变或子宫颈癌，就能大大提高子宫颈癌患者的治愈率。目前临床上对子宫颈癌的筛查主要是通过细胞学和病毒学检测，但仍有一部分患者被遗漏，所以寻找到一个子宫颈病变过程中的新的生物学标记物成为如何更加准确的提高子宫颈病变的诊断率的一个重要目标。酸性磷酸酶（Acid phosphatase, ACP）是一种在酸性环境下能水解磷酸酯类的水解酶，分为5种亚型，其中和人体相关的有ACP1、ACP2、ACP3和ACP5。ACP3最早被看作前列腺癌的特异性肿瘤标记物，在前列腺癌的诊断和监测预后方面有重要意义；ACP5主要存在于破骨细胞内，它的高表达一般提示恶性肿瘤发生了骨转移，然而近年来的研究表明，ACP不仅仅存在于人前列腺组织，也有研究提出了骨肿瘤、乳腺癌等其他肿瘤中ACP的高表达。尚有文献报道，异常的子宫颈鳞状上皮细胞溶酶体内ACP活性增高，但ACP在子宫颈鳞状细胞癌中的表达情况目前报道很少且表达亚型尚不明确。因此，本课题期望通过在不同水平检测ACP在子宫颈病变中的表达情况，了解ACP异常表达或激活在子宫颈癌诊断中的意义，提出一种能提高子宫颈癌早期诊断率的新的辅助诊断指标。目的通过在不同水平检测ACP在正常子宫颈上皮、子宫颈上皮内瘤变及子宫颈癌组织中的表达情况，提出一项能提高子宫颈癌早期诊断率的新的辅助诊断指标。方法1)RT-PCR明确ACP四种亚型在正常子宫颈上皮、子宫颈上皮内瘤变及子宫颈癌组织中的表达情况，筛选出和子宫颈癌相关的ACP亚型2)采用Western blot法检测ACP1在正常子宫颈上皮和子宫颈病变上皮组织中的表达情况3)免疫组织化学SP法检测ACP1蛋白正常子宫颈上皮和子宫颈上皮内瘤变及子宫颈癌组织中的表达差异4)不同水平检测子宫颈鳞状细胞癌Siha及C33A细胞株中ACP1的表达差异5)免疫组织化学法检测正常子宫颈腺体和子宫颈腺癌组织中ACP1的表达差异6)在核酸和蛋白质水平上检测子宫颈鳞状细胞癌Siha细胞株和子宫颈腺癌Hela细胞株中ACP1的表达结果（1）RT-PCR结果提示ACP1在正常子宫颈上皮、子宫颈上皮内瘤变及子宫颈癌组织中呈规律表达，且和正常子宫颈上皮相比，病变子宫颈组织中ACP1表达升高，ACP2和ACP5在子宫颈组织中表达无规律，ACP3在子宫颈组织中不表达（2）Western blot结果提示ACP1在正常子宫颈上皮及子宫颈病变上皮均有表达，但正常子宫颈上皮中表达甚少，随着子宫颈病变级别的增加ACP1的表达逐渐增加，差异有统计学意义，p<0.05（3）免疫组化结果提示ACP1定位于子宫颈上皮细胞细胞浆内，且随子宫颈病变程度增加，表达量明显升高，差异有统计学意义，p<0.05（4）RT-PCR和Western blot结果提示ACP1mRNA和ACP1蛋白在Siha、C33A细胞株中表达量无明显差异，p>0.05（5）免疫组化结果提示ACP1定位于子宫颈腺癌腺管柱状上皮细胞浆中，和正常子宫颈腺体相比，表达升高且差异有统计学意义， p<0.05（6）RT-PCR和Western blot结果提示ACP1在子宫颈鳞状细胞癌Siha细胞株和子宫颈腺癌Hela细胞株组织中的表达在核酸和蛋白水平上均无差异，p>0.05结论ACP1在子宫颈病变组织中表达升高，且随着子宫颈病变程度升高，ACP1表达亦逐渐增强，ACP1在子宫颈病变组织中表达量的升高和HPV感染与否以及子宫颈癌的病理类型无明显相关，ACP1可以作为子宫颈癌及癌前病变的一项新的辅助诊断指标。

论文目录

• 英文缩略表
• 中文摘要
• Abstract
• 1) 前言
• 2) 材料和方法
• 3) 结果
• 4) 讨论
• 5) 结论
• 6) 参考文献
• 5. 附录
• 6. 致谢
• 7. 综述及参考文献