论文摘要
目的建立人视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelium,RPE）蓝光损伤模型,探讨L-型钙通道是否参与蓝光致人RPE细胞光损伤过程,蓝光照射与钙通道中心脏亚型（α1C或Cav1.2）、神经内分泌亚型（α1D或Cavl.3）和视网膜亚型（α1F或Cav1.4）mRNA表达之间的关系及RPE细胞内游离钙离子浓度是否发生变化。方法将第四代人RPE细胞随机分为四个组,用2000±500Lux蓝光强度分别照射细胞3h、6h、9h和12h,24h后终止细胞培养,采用TUNEL法检测细胞凋亡,确定最适宜光照时间。将体外培养的第四代人RPE细胞随机分为四组,无光照组、光照组、光照+硝苯地平组、光照+（-）BayK8644组。用2000±500Lux蓝光照射6h,24h后终止细胞培养。用Real-Time RT-PCR与荧光定量PCR技术分析各组人RPE细胞L-型钙通道中心脏亚型（a1C或Cav1.2）、神经内分泌亚型（a1D或Cav1.3）和视网膜亚型（α1F或Cav1.4）mRNA的表达。将第四代人RPE细胞分为六组：无光照组、光照组、硝苯地平组、光照+硝苯地平组、（-）BayK8644组、光照+（-）BayK8644组。蓝光分别照射RPE细胞6h,终止细胞培养24h,采用激光共聚焦显微镜检测细胞内游离钙离子浓度,激发波长488nm,发射波长505nm,每组随机选取30个细胞,扫描细胞图像,采用分析软件分析细胞内游离钙离子荧光强度。用单因素方差分析各组荧光强度差异。结果24h终止培养组,光照6h,9h及12h的凋亡指数（apoptotic index, AI）,与对照组及3h组比较,有显著的差异性（P<0.01）。荧光定量PCR产物α1C、alD、α1F和内参ATCB的cDNA分子量分别为68bp、157bp、125bp和186bp,产物的凝胶电泳结果显示扩增条带位置与以上分子量相吻合。（1）各组α1C mRNA的表达,光照组、光照+硝苯地平组、光照+（-）BayK8644组α1C mRNA的表达均高于无光照组,差异有统计学意义（P=0.002,0.001,0.000）；光照+硝苯地平组、光照+（-）BayK8644组α1C mRNA的表达均高于光照组,差异有统计学意义（P=0.003,0.000）,光照+（-）BayK8644组α1C mRNA的表达高于光照+硝苯地平组,差异有统计学意义（P=0.004）。（2）各组α1D mRNA的表达,光照组、光照+硝苯地平组、光照+（-）BayK8644组α1D mRNA的表达均高于无光照组,差异均有统计学意义（P=0.023,0.006,0.010）；光照+（-）BayK8644组与光照组和光照+硝苯地平组比较均有统计学意义（P=0.032,0.039）；光照+硝苯地平组与光照组比较无统计学意义（P=0.459）。（3）各组α1F mRNA的表达,光照组、光照+硝苯地平组、光照+（-）BayK8644组与无光照组比较均有统计学意义（P=0.010,0.000,0.002）；光照+硝苯地平组、光照+（-）BayK8644组α1F mRNA的表达均高于光照组（P=0.000,0.005）,光照+（-）BayK8644组与光照+硝苯地平组比较均无统计学意义（P=0.585）。激光共聚焦显微镜结果显示,光照组、光照+硝苯地平组、（一）BayK8644组、光照+（-）BayK8644组RPE胞内钙离子荧光强度高于无光照组,差异有统计学意义（P=0.000,0.000,0.000,0.000）,硝苯地平组RPE胞内游离钙离子荧光强度比无光照组低,差异有统计学意义（P=0.000）,硝苯地平组与光照+硝苯地平组比较,差异有统计学意义（P=0.000）,光照+硝苯地平组与光照组相比较,（-）BayK8644组与光照+（-）BayK8644组比较,差异均无统计学意义（P=0.204,P=0.103）。结论（1）光照强度2000±500Lux,光照6h,24h终止培养为建立蓝光照射致人RPE细胞光损伤模型最适合条件；（2）蓝光照射可引起L-型钙通道中a1C、α1D及α1F亚型mRNA表达不同程度的增高,10-5M硝苯地平不能对抗蓝光照射作用而降低人RPE细胞a1D亚基mRNA表达,而钙通道激动剂（-）Bay K8644起到相反的作用,L-型钙通道可能参与蓝光致RPE细胞损伤过程；（3）蓝光照射人RPE细胞可引起细胞内游离钙离子浓度增加；（4）蓝光照射对RPE细胞上L-型钙通道的开放作用强于10-5M硝苯地平的阻滞作用。
论文目录
相关论文文献
- [1].间断性蓝光照射方式和持续性蓝光照射方式治疗新生儿黄疸的疗效[J]. 临床医药文献电子杂志 2019(82)
- [2].预警机制在新生儿黄疸蓝光照射护理中的应用价值探究[J]. 首都食品与医药 2020(02)
- [3].挑痘+异维A与红蓝光照射+异维A治疗痤疮的疗效比较[J]. 现代医院 2020(02)
- [4].“鸟巢”式护理在双面蓝光照射中使用的探讨[J]. 临床医药文献电子杂志 2020(10)
- [5].短时多次蓝光照射疗法治疗新生儿黄疸的效果观察[J]. 当代医药论丛 2020(04)
- [6].间歇性蓝光照射疗法联合双歧杆菌乳杆菌三联活菌片治疗新生儿黄疸的效果[J]. 当代医药论丛 2020(06)
- [7].锌掺杂碳点联合蓝光照射对金黄色葡萄球菌生长及其生物膜形成的抑制作用[J]. 吉林大学学报(医学版) 2020(03)
- [8].不同蓝光照射方法在新生儿黄疸中的应用分析[J]. 中国现代药物应用 2020(11)
- [9].红蓝光照射疗法联合伐昔洛韦治疗带状疱疹患者的临床效果[J]. 临床医药文献电子杂志 2020(39)
- [10].新生儿黄疸治疗中持续性与间歇性蓝光照射的效果对比分析[J]. 临床医药文献电子杂志 2020(48)
- [11].白蛋白联合蓝光照射对新生儿黄疸的治疗及相关指标观察[J]. 当代医学 2020(30)
- [12].双面蓝光照射方案治疗新生儿病理性黄疸的应用分析[J]. 哈尔滨医科大学学报 2020(01)
- [13].多次间歇蓝光照射与持续蓝光照射治疗新生儿高胆红素血症的疗效及不良反应[J]. 世界最新医学信息文摘 2017(96)
- [14].不同蓝光照射方式治疗新生儿高胆红素血症的疗效与不良反应分析[J]. 当代医学 2018(05)
- [15].用间隙蓝光照射法和持续蓝光照射法治疗新生儿高胆红素血症的效果对比[J]. 当代医药论丛 2018(05)
- [16].用间歇蓝光照射疗法治疗新生儿黄疸的效果研究[J]. 当代医药论丛 2016(22)
- [17].安全性护理在新生儿高胆红素血症蓝光照射的应用观察[J]. 社区医学杂志 2017(11)
- [18].不同蓝光照射联合苯巴比妥对新生儿病理性黄疸疗效对比[J]. 西南国防医药 2017(10)
- [19].短时多次蓝光照射法治疗新生儿黄疸的效果分析[J]. 当代医药论丛 2017(17)
- [20].间歇蓝光照射与持续蓝光照射治疗新生儿黄疸的临床效果比较[J]. 基层医学论坛 2016(14)
- [21].新生儿病理性黄疸治疗中蓝光照射疗法的护理措施[J]. 世界最新医学信息文摘 2016(30)
- [22].两种蓝光照射新生儿黄疸的疗效分析[J]. 北方药学 2014(12)
- [23].红蓝光照射联合异维A酸治疗寻常痤疮疗效观察[J]. 现代中西医结合杂志 2015(06)
- [24].应用红蓝光照射疗法联合中西医结合疗法治疗痤疮的效果分析[J]. 当代医药论丛 2015(08)
- [25].试论短时多次蓝光照射对新生儿黄疸治疗的有效性[J]. 人人健康 2020(02)
- [26].《扶贫日》邮票上的微缩文字[J]. 集邮博览 2017(03)
- [27].蓝光照射与白蛋白静脉滴注联合治疗新生儿黄疸的效果[J]. 健康之路 2017(05)
- [28].两种蓝光照射方式治疗新生儿黄疸的疗效观察[J]. 吉林医学 2013(27)
- [29].间隙和持续蓝光照射在新生儿黄疸治疗中的疗效对比研究[J]. 临床医药文献电子杂志 2020(30)
- [30].两种蓝光照射方式治疗新生儿黄疸患儿的临床效果[J]. 世界最新医学信息文摘 2019(07)