论文摘要
卵巢恶性肿瘤（ovarian cancer）是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一,其发病率占女性恶性肿瘤的2.4%-5.6%,近年来呈上升趋势。上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer, EOC）起源于卵巢表面生发上皮,其主要生物学特征为浸润及转移,确切发病机制尚不清楚。卵巢肿瘤患者约70%在诊断时已为晚期,死亡率居女性生殖系统恶性肿瘤首位,其原因主要是临床上缺乏能够在早期检测卵巢癌的具有特异性及敏感性高的分子生物学标记物,因此,从基因水平对卵巢癌进行深入的研究,探讨其基因水平的发病机制,将对其早期诊断、尽早治疗和早期采取预防措施起到重要的作用。癌症的发生、发展通常与细胞的增殖过度及凋亡不足有关。乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂（mammary serpin, Maspin）属于丝氨酸蛋白酶抑制剂（serpin）超家族,在人体内参与了多种生理学效应,主要表现为：增加细胞黏附能力,抑制肿瘤细胞的运动和迁移；抵抗血管新生；促进细胞凋亡,从而抑制肿瘤转移,在肿瘤发生进展中起到一定的作用。细胞周期调控的失常与肿瘤的形成密切相关。p27是一种多功能细胞周期素依赖激酶抑制因子（cyclin dependent kinase inhibitor, CDKI）,主要通过阻止细胞周期G0/G1期至S期的转换,从而抑制细胞周期进程,进而阻止细胞的增殖和肿瘤的形成。碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, b-FGF）是成纤维细胞生长因子（Fibroblast Growth Factors, FGFs）家族中的一员,b-FGF广泛分布于中胚层和神经外胚层来源的多种组织和器官,也存在于肿瘤组织中,它具有促进细胞增殖、分化、迁移等多种生物学效应,并参与血管重塑、骨骼形成、神经发育、肿瘤代谢等生理和病理过程。目的本研究采用RT-PCR （reverse transcription polymerase chain reaction）法检测Maspin mRNA、p27 mRNA与b-FGF mRNA在正常及良性、恶性卵巢组织中的表达情况并分析三者相关性。阐明三者的表达与上皮性卵巢癌的生物学行为之间的相关性。在基因转录水平探讨细胞生长因子与抑癌基因在卵巢癌的发生发展中的作用。材料与方法1材料收集郑州大学第一、第三附属医院2007年10月～2009年5月行手术切除的卵巢组织共79例。其中恶性上皮性卵巢肿瘤31例（浆液性16例,黏液性13例,子宫内膜样癌1例,透明细胞癌1例）,良性上皮性卵巢肿瘤28例（浆液性12例,黏液性16例）,正常卵巢组织20例,以上标本的诊断均经病理组织学检查确诊。所有病例术前均未接受放疗、化疗及免疫治疗。2方法采用RT-PCR法检测Maspin mRNA、p27 mRNA与b-FGF mRNA在正常及良性、恶性卵巢组织中的表达情况。3结果判定PCR产物经凝胶成像及分析系统扫描后,以β-actin为参照,求出其相对值。4统计学分析应用SPSS16.0统计学软件进行数据处理,连续型变量用（x±s）表示,采用独立样本t检验和单因素方差分析；正态分布资料的相关性检验采用Pearson积差相关分析,非正态分布资料的相关性检验采用Spearman秩相关分析,检验水准α=0.05。结果1 Maspin mRNA的表达Maspin mRNA在恶性卵巢肿瘤中的相对灰度值低于良性卵巢肿瘤和正常卵巢。在恶性卵巢组织中,临床分期Ⅲ、Ⅳ期的相对灰度值低于Ⅰ、Ⅱ期；有淋巴结转移组中的表达低于无淋巴结转移组。2 p27 mRNA的表达p27 mRNA在恶性卵巢肿瘤中的相对灰度值低于良性卵巢肿瘤和正常卵巢,差异有统计学意义。在恶性卵巢组织中,临床分期Ⅲ、Ⅳ期的相对灰度值低于Ⅰ、Ⅱ期；有淋巴结转移组中的表达低于无淋巴结转移组。3 b-FGF mRNA的表达b-FGF mRNA在恶性卵巢肿瘤中的相对灰度值高于正常卵巢。b-FGF mRNA在恶性卵巢组织中,临床分期Ⅲ、Ⅳ期的相对灰度值高于Ⅰ、Ⅱ期；有淋巴结转移组中的表达高于无淋巴结转移组（P<0.05）,高分化组与中、低分化组比较差异有统计学意义。4相关性分析三种mRNA在恶性卵巢组织中表达的相关性分析显示,Maspin mRNA和p27mRNA的表达呈正相关（r=0.688,P<0.001）；Maspin mRNA和b-FGF mRNA的表达水平呈负相关（r=-0.418,P=0.019）；p27 mRNA和b-FGF mRNA的表达成负相关（r=-0.434,P=0.015）。结论1 Maspin mRNA和p27 mRNA在卵巢肿瘤中低表达,b-FGF mRNA在卵巢肿瘤中高表达,表明其可能参与卵巢肿瘤的发生发展。2 Maspin mRNA和p27 mRNA在卵巢癌有淋巴转移组及临床分期Ⅲ、Ⅳ期中低表达,其表达随临床分期升高而降低,表明Maspin mRNA和P27 mRNA表达水平的低下或缺失可能参与卵巢癌的发生发展。b-FGF mRNA在卵巢癌低分化组、有淋巴转移组及临床分期Ⅲ、Ⅳ期中高表达,其表达随临床分期升高而升高,表明其可能与卵巢癌的恶性程度相关。3卵巢肿瘤中,Maspin mRNA、p27 mRNA和b-FGF mRNA具有高度相关性,表明三者可能存在某种联系,共同促进卵巢肿瘤的发生发展。