甘蓝型油菜小孢子离体EMS诱变技术研究

论文摘要

甲基磺酸乙酯（Ethl methane sulfonste,EMS）是一种能够诱导染色体结构变异的烷化剂,已被广泛应用于诱变育种和种质创新。本实验采用不同EMS浓度（0.02%、0.04%、0.08%（v/v））和处理时间（10min和20min）对7679-1、7679-2、7680、7681和2145在内的5个品系的甘蓝型油菜小孢子进行诱变处理,对诱变后小孢子的胚胎发生能力、植株再生能力、再生植株形态和种子品质变异等进行了研究。主要研究结果如下:1.不同基因型小孢子胚胎发生能力均存在明显差异。品系7679胚胎发生能力达到100%,2050-2等材料胚胎发生能力低,产胚率0—1.7个/蕾。同一品系不同株系之间胚胎发生能力无显著差异,如品系2050的4个株系的单株胚胎发生能力在0—4.0%之间。2.不同EMS浓度和处理时间对小孢子产胚率的影响。在EMS浓度相同时,材料7679-2、7680小孢子产胚数随诱变时间延长而减少;在处理时间相同时,材料7679-2、7680小孢子产胚数随诱变剂浓度增加而减少,且随着诱变剂浓度增大产胚数下降速度加快。3.确定不同基因型材料的EMS诱变半致死剂量。7679-1处理10min时的半致死剂量为0.04%;7679-2处理10-20 min时的半致死剂量为0.08%;7680处理20min时的半致死剂量0.04%。4.获得了不同表型的突变体。经济性状突变:矮化、短角果、分枝数增多等突变体;花器官突变:粉色花瓣、白色花瓣、雄蕊多于6枚、花瓣数增加、柱头外露等突变体;种子品质突变:获得了含油量43.81%的植株（供体植株含油量38.12-40.93%）,油酸含量68.64%的DH植株（供体植株油酸含量62.93-65.82%）。。5.EMS诱变对小孢子染色体加倍的影响。7679-2未诱变处理的小孢子经秋水仙碱处理后再生植株加倍率54.0%,EMS诱变后经秋水仙碱处理再生植株加倍率在50.0-92.4%,大部分高于未诱变处理;7680未诱变处理的小孢子经秋水仙碱处理的加倍率96.7%,EMS诱变后经秋水仙碱处理再生植株加倍率在85.7-98.0%,EMS诱变对再生植株染色体加倍效果有影响。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.油菜育种工作进展
• 2.诱变育种技术研究进展
• 3.油菜诱变技术研究进展
• 3.1 油菜诱变方式研究
• 3.2 单倍体诱变技术研究
• 3.2.1 单倍体在离体诱变和筛选中的应用
• 3.2.2 EMS诱变研究
• 3.2.3 单倍体诱变技术在油菜育种中的应用
• 4.实验目的和意义
• 第二章 甘蓝型油菜小孢子离体培养及EMS诱变的胚胎发生研究
• 1.前言
• 2.材料及方法
• 2.1 供试材料
• 2.2 小孢子分离、培养及EMS诱变处理方法
• 2.2.1 培养基成分
• 2.2.2 EMS诱变设置
• 2.2.3 小孢子离体诱变及培养技术
• 3.结果与分析
• 3.1 小孢子胚胎发生及出胚率影响因素
• 3.2 EMS对小孢子胚胎发生及植株再生的影响
• 3.2.1 EMS对小孢子出胚率的影响
• 3.2.2 胚状体转移时期的对再生成苗的影响
• 4.讨论
• 第三章 EMS处理对再生植株加倍率的影响
• 1.前言
• 2.材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 秋水仙碱的处理方法
• 2.2.2 再生苗的移栽、管理
• 2.2.3 染色体加倍的鉴定方法
• 3.结果与分析
• 表3.1 不同EMS处理的7679-2再生植株加倍率比较
• 4.讨沦
• 第四章 突变体筛选
• 1.前言
• 2.材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 再生植株形态变异统计方法
• 2.3 品质分析方法
• 3.结果与分析
• 3.1 再生植株形态变异
• 3.2 再生植株种子品质变异
• 4.讨论
• 参考文献
• 致谢