气体信号分子硫化氢在阿霉素致心肌细胞损伤模型中的作用及机制研究

论文摘要

背景抗肿瘤药物的心脏毒性越来越受到医学界的关注,同时临床上无有效治疗手段来减弱心脏毒性。硫化氢是新型气体信号分子,研究发现具有明显的心脏保护作用。心脏细胞线粒体参与抗肿瘤药物的心脏毒性及硫化氢的心脏保护作用过程。目的本研究从线粒体的角度,观察硫化氢是否能够减轻阿霉素的心肌细胞毒性。分别从细胞形态、细胞活性,线粒体膜表面电位以及与线粒体功能关系密切的信号通路等方面,来探讨硫化氢对线粒体保护机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）将不同浓度阿霉素和硫化氢分别作用体外培养的H9C2心肌细胞,检测硫化氢和阿霉素对心肌细胞H9C2活性的影响;H9C2细胞经适宜浓度的H2S和阿霉素处理后,采用Rh123荧光染色法、JC-1染色法和流式细胞仪检测H9C2细胞线粒体表面电位情况; Western Blotting测定Akt总蛋白表达情况。结果1.阿霉素能够:①明显引起心肌细胞损伤,表现为细胞质空泡化;②可剂量依赖性抑制心肌细胞活性;③可引起心肌细胞线粒体膜表面电位下降。2.硫化氢能够:①改善阿霉素所致的心肌细胞损伤及细胞活性下降;②明显逆转阿霉素所致的心肌细胞线粒体电位下降;③提高Akt蛋白的表达。结论在阿霉素诱导的心肌细胞损伤模型中,首次发现硫化氢能够显著提高心肌细胞活性、线粒体膜表面电位、Akt蛋白表达水平,从而发挥线粒体保护作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 缩略语及符号表
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 细胞来源
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 主要仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 细胞培养
• 2.2.2 细胞活性检测
• 2.2.3 线粒体膜表面电位测定
• 2.2.4 蛋白印迹法检测 Akt、p-akt 蛋白表达
• 2.2.5 统计学分析
• 第三章 结果
• 2S 对细胞形态的影响'>3.1 H₂S 对细胞形态的影响
• 3.2 对细胞活性的影响
• 3.3 对线粒体膜表面电位的影响
• 3.4 对信号通路 PI3K-Akt 的作用
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 附录1 试剂的配制
• 附录2 发表及收录论文情况
• 附录3 综述
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历