郑蒙蒙:固定化胰蛋白酶整体小柱的制备及其用于微量蛋白质的快速酶解论文

郑蒙蒙:固定化胰蛋白酶整体小柱的制备及其用于微量蛋白质的快速酶解论文

本文主要研究内容

作者郑蒙蒙,韩颖,康经武(2019)在《固定化胰蛋白酶整体小柱的制备及其用于微量蛋白质的快速酶解》一文中研究指出:发展了一种光引发聚合法制备固定化胰蛋白酶整体小柱的方法,以用于微量蛋白质的快速酶解。整体小柱由功能单体4-戊烯酸琥珀酰亚胺酯、甲基丙烯酸羟乙酯,交联剂季戊四醇三丙烯酸酯和三元致孔剂二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、十二醇在20μL的移液器吸头尖端原位聚合而成。形成整体柱后,胰蛋白酶分子通过氨基与琥珀酰亚胺酯反应实现固定化。系统研究了聚合溶液中活性酯含量与柱床体积对胰蛋白酶固载量的影响,评价了固定化酶整体小柱对标准蛋白细胞色素C和牛血清白蛋白的酶解效率,以及整体小柱的稳定性和重复性。结果表明,在离心辅助下,酶解过程可在10 min内完成,批次间具有良好的重复性。最后将固定化酶整体小柱应用于1×10~5个人急性早幼粒白血病(NB4)细胞与人急性T细胞白血病(Jurkat T)细胞的快速酶解,经纳升级液相色谱与高分辨质谱联用分析后鉴定得到2 489个和2 572个蛋白质。相比于溶液状态下的酶解,分别提高了2.2%和6.1%的蛋白鉴定数量,展现了其在蛋白组学研究中的应用潜力。

Abstract

fa zhan le yi chong guang yin fa ju ge fa zhi bei gu ding hua yi dan bai mei zheng ti xiao zhu de fang fa ,yi yong yu wei liang dan bai zhi de kuai su mei jie 。zheng ti xiao zhu you gong neng chan ti 4-wu xi suan hu po xian ya an zhi 、jia ji bing xi suan qiang yi zhi ,jiao lian ji ji wu si chun san bing xi suan zhi he san yuan zhi kong ji er jia ji ya feng 、N,N-er jia ji jia xian an 、shi er chun zai 20μLde yi ye qi xi tou jian duan yuan wei ju ge er cheng 。xing cheng zheng ti zhu hou ,yi dan bai mei fen zi tong guo an ji yu hu po xian ya an zhi fan ying shi xian gu ding hua 。ji tong yan jiu le ju ge rong ye zhong huo xing zhi han liang yu zhu chuang ti ji dui yi dan bai mei gu zai liang de ying xiang ,ping jia le gu ding hua mei zheng ti xiao zhu dui biao zhun dan bai xi bao se su Che niu xie qing bai dan bai de mei jie xiao lv ,yi ji zheng ti xiao zhu de wen ding xing he chong fu xing 。jie guo biao ming ,zai li xin fu zhu xia ,mei jie guo cheng ke zai 10 minnei wan cheng ,pi ci jian ju you liang hao de chong fu xing 。zui hou jiang gu ding hua mei zheng ti xiao zhu ying yong yu 1×10~5ge ren ji xing zao you li bai xie bing (NB4)xi bao yu ren ji xing Txi bao bai xie bing (Jurkat T)xi bao de kuai su mei jie ,jing na sheng ji ye xiang se pu yu gao fen bian zhi pu lian yong fen xi hou jian ding de dao 2 489ge he 2 572ge dan bai zhi 。xiang bi yu rong ye zhuang tai xia de mei jie ,fen bie di gao le 2.2%he 6.1%de dan bai jian ding shu liang ,zhan xian le ji zai dan bai zu xue yan jiu zhong de ying yong qian li 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自色谱的郑蒙蒙,韩颖,康经武,发表于刊物色谱2019年12期论文,是一篇关于液相色谱串联质谱论文,制备论文,整体柱论文,蛋白质组学论文,固定化酶论文,胰蛋白酶论文,色谱2019年12期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自色谱2019年12期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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