论文摘要
目的本试验对家兔急性大脑中动脉缺血模型进行脑室内低温保护，通过检测低温组和常温组家兔大脑中动脉缺血脑组织凋亡细胞和对热休克蛋白70(Heat shock protein 70 HSP70)表达的观察，来探讨脑室内低温对家兔大脑中动脉缺血模型细胞凋亡影响。方法选用4—6个月龄雄性家兔16只，体重在2.8—3.2Kg，随机分为2组：对照组(常温生理盐水)、低温组(22℃低温生理盐水)各8只。应用线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型，进行脑室内穿刺低温液体灌注亚低温干预，根据sawyer兔脑定位图谱，于左侧取失状缝左6mm，冠状缝前1mm处，牙科钻钻开露骨，用双腔静脉微导管穿刺脑室，双腔脑室穿刺导管(内径1mm)穿刺兔侧脑室三角区(由额角向枕角方向穿刺2cm)，固定导管后，导管进口接输液固定导管，以等渗盐水灌注。导管一端为液体入口，另一端为脑室内液体流出口。在室温24℃下，等温组输入等温(37℃)等渗盐水，低温组输入冷却的22℃等渗盐水，缓慢滴注(3—4ml／min滴速持续滴入)，双腔管出口接虹吸管，以相同速度持续引流，持续3小时。停止脑室滴注，灌注结束后缝合切口皮肤。自然复温，低温全过程维持脑质温度在35±0.5℃，右侧同位置牙科钻钻颅骨露出硬脑膜，使用红外线温度计测温。术后动物行为观察：动物麻醉苏醒后，观察其肢体运动情况。此后置于室温饲养，24h后观察兔行为及肢体瘫痪情况，参照ZeaLonga及Bederson检查法，进行5分制评分，评分标准为：0分：无神经损伤体征；1分：病灶对侧前爪不能完全伸展；2分：除Ⅰ级征象外并有瘫痪侧阻力下降；3分：除Ⅰ级Ⅱ级征象外，活动时有向瘫痪侧倾倒；4分：不能自发行走，意识丧失。24小时后采用SABC方法检测各组脑组织HSP70表达，TUNEL方法检测凋亡细胞。结果1、术后24 h时兔神经病学体征评分以及动物行为观察：常温组为(3.1±0.5)分，低温组为(1.5±0.5)分，经t检验两组有显著差异(P＜0.05)。常温组中有6只动物出现右侧肢体完全瘫痪，另外2只可以爬行。低温组中有6只可以爬行，另外2只可以跳跃。2、脑组织细胞调亡和HSP70表达的检测结果：TUNEL染色阳性细胞核中呈现有棕黄色颗粒，HSP70染色细胞浆着色呈棕黄色。低温组的TUNEL染色阳性细胞数和HSP70染色阳性细胞数明显低于和高于常温组，差异有显著意义(P＜0.05)。结论经脑室内低温保护的动物偏瘫程度轻，缺血区脑组织内出现HSP70阳性细胞数较常温组要多，凋亡细胞较常温组要少，具有统计学意义。从本实验可以看出，对家兔急性大脑中动脉缺血模型进行脑室内低温保护干涉，可以减少缺血区域脑组织细胞凋亡，同时可以提高家兔的生存质量。因此，脑室内低温是一种值得继续探讨和关注的新临床治疗方法。