论文摘要
背景:随着现代工业发展,环境污染对人体和动物的危害已成为国际性研究热点。前期研究提示,某些广泛存在于生活环境中的外来化合物(主要是人工合成化合物)可通过各种途径富集于人和动物体内,干扰内源性激素的合成、分泌、释放、运输、结合、效应及清除等各个环节,显出模拟或拮抗内源性激素的作用,从而导致生殖功能下降、生殖畸形和恶性肿瘤等发病率的增加。该类化合物被称为环境内分泌干扰因子(Environmentalendocrine disruptors, EEDs)。在众多的外来化合物中,邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(Di(2-ethylhexyl)phthalate, DEHP),作为一种广泛应用于塑料及化工产业的工业添加剂,近年来已被认为是一种重要的 EEDs。隐睾(Cryptorchidism)在足月男婴中的发生率高达 4%,可导致男性不育,其睾丸恶变率也较正常睾丸高出 20-46 倍,但其病因及发病机制至今尚不明确。结合欧美及我国工业发达地区,隐睾等男性生殖畸形发生呈现明显上升趋势,我们推测 EEDs 可能与隐睾发病率的上升有一定的相关性。为此,拟通过动物实验证实环境内分泌干扰因子 DEHP与隐睾发病的关系及相关机制,对针对性治理相关的环境污染、预防和减少男性生殖畸形、促进人类健康具有重要意义。目的:在前期实验的基础上探究 DEHP 诱发隐睾,导致男性生殖功能障碍的发病机制及关键环节。方法:健康 KM 孕鼠随机分成五组:正常对照组、玉米油对照组(玉米油 2ul/kg.d)、雌激素组(Diethylstilbestrol 100ug/kg.d)、抗雄激重庆医科大学硕士研究生学位论文 3素组(Flutamide 100mg/kg.d)、DEHP 实验组(DEHP 500mg/kg.d)。各组分别于孕鼠妊娠第 12 天至妊娠第 19 天(雄性仔鼠睾丸下降的关键时期)持续经口给予相应处理。GD19 处死孕鼠,剖宫产取出胎鼠,并置于冰中直至解剖。记录每组胎数、仔鼠雌雄比例、胎鼠体重等情况,同时在解剖显微镜下观察雄胎鼠睾丸位置、睾丸引带发育状况、颅侧悬韧带残留情况、测量肾脏下极与睾丸、膀胱颈的相对距离,并获取睾丸和睾丸引带。光镜下观察各组睾丸、睾丸引带发育情况并检测引带内雄激素受体(AR)、雌激素受体(ER)、肌动蛋白(Actin)、增殖细胞核抗原(PCNA)等的表达水平。体外实验研究选择睾丸引带引带体外培养,并分别加入 DEHP、DES、Flu.等干预因素后,观察睾丸引带在体外的发育情况。结果:﹙1﹚DEHPGD12-GD19 孕期给药,其胎鼠体重、性别无明显改变;(2﹚DEHP 组、Flu.组和 DES 组 GD19 胎鼠睾丸不同程度下降不全;(3﹚DEHP 组、Flu.组睾丸引带发育情况良好,而 DES 组睾丸引带发育不良;同时 Flu .组睾丸颅侧悬韧带残留;(5﹚HE 染色,光镜下观察见 DEHP 组、Flu.组、DES 组其睾丸生精小管、支持细胞存在明显的发育障碍,在 DEHP 组和 Flu.组睾丸间质细胞明显增生;(6)在体睾丸引带实验中,DEHP 组、Flu.组 AR 表达,DES 组睾丸引带Actin、PCNA 呈低水平表达;(7)离体睾丸引带培养实验中, Flu.组睾丸引带 AR 表达降低。结论:1. DEHP 是一种明确的环境内分泌干扰因子,能诱发小鼠隐睾; 2. DEHP 影响睾丸下降的机制可能是一种睾酮合成障碍的抗雄激素效应,抗雄激素效应导致睾丸引带退化不全,造成睾丸从腹股沟降入阴囊(阴囊内下降阶段)发生异常。3. DEHP 影响睾丸下降的同时,也造成睾丸支持细胞、间质细胞和生
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标签:环境内分泌干扰因子论文; 邻苯二甲酸二异基己酯论文; 抗雄激素效应论文; 隐睾论文;