论文摘要
目的:探讨凋亡抑制蛋白Survivin在喉癌组织中的表达及其与凋亡、临床病理参数的关系;顺铂（DDP）诱导喉癌Hep2细胞凋亡及Survivin在DDP诱导喉癌细胞凋亡中的作用;观察Survivin反义寡核苷酸（ASODN）对喉癌细胞凋亡、化疗敏感性的影响。方法:应用RT-PCR检测SurvivinmRNA表达;免疫组织化学方法、流式细胞仪检测Survivin蛋白、Capspase-3蛋白表达;TUNEL法、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪检测凋亡指数、丫啶橙染色观察细胞形态,透射电子显微镜观察细胞超微结构变化。结果:Survivin在正常喉黏膜中不表达,57.5%喉癌组织表达Survivin蛋白和mRNA。Survivin表达与喉癌临床分期、病理分级、颈淋巴结病理转移有关,Survivin表达阳性组的AI明显低于阴性组的AI（P<0.05）。DDP作用Hep2细胞后丫啶橙染色出现典型凋亡改变;随着DDP浓度升高、时间延长,凋亡率、抑制率逐渐增高（P<0.01）;DNA凝胶电泳呈现明显的梯状带。SurvivinASODN转染Hep2细胞后细胞的超微结构呈典型凋亡改变,细胞凋亡由转染前的0.70%增加到17.98%,Survivin蛋白和mRNA的表达分别为对照组的30.67%、34.33%,Capspase-3蛋白表达无明显变化,ASODN联合化疗药DDP诱导的凋亡明显高于单纯应用DDP组。结论:Survivin在喉癌中高表达可能通过抑制细胞凋亡而在喉癌的发生发展中发挥一定作用;Survivin基因的抑制可能在DDP诱导喉癌细胞凋亡中起重要作用,Survivin ASODN能降低Survivin基因表达,诱导喉癌细胞凋亡,增加喉癌细胞对化疗药物的敏感性。