导读:本文包含了酒精脱氢酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白,细胞,缺氧,损害,保护作用
酒精脱氢酶论文文献综述
王朝东,吴晓牧,胡国柱,柳喆,徐红薇[1]（2006）在《Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白在缺氧性细胞中的表达及其对细胞缺氧性损害的保护作用》一文中研究指出目的研究Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白(ABAD)在缺氧性细胞中的表达及其对细胞缺氧性损害的保护作用,以探讨急性缺氧性疾病的治疗新方法。方法①观测缺氧状态下细胞Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白表达水平的变化:体外培养的COS-1细胞置于缺氧箱诱导缺氧1~16 h(氧浓度控制1%~2%),收集细胞,裂解,离心得到蛋白提取液,同时用TRIzol方法提取总RNA;Northern blot法检测正常和缺氧状态下细胞ABAD mRNA的表达水平;15μg总RNA于10%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳分离并转移至尼龙膜,采用QuikHyb快速杂交系统与α-32P标记的全长ABAD cDNA探针杂交,杂交膜于-80℃放射自显影18 h;Western blot检测正常和缺氧状态下细胞ABAD蛋白的表达水平:20μg蛋白样品于SDS-NuPAGE胶电泳分离,电转移使样品印迹至尼龙膜上,后者依次与鼠抗人ABAD单克隆抗体(一抗)和兔抗鼠抗体(二抗)孵育,用化学发光法显示印迹条带;②观测上调ABAD表达对细胞缺氧性损害的影响:采用逆转录PCR(RT-PCR)方法,扩增ABAD全长编码序列,PCR产物直接克隆至pcDNA3表达质粒中,构建ABAD-pcDNA3表达质粒;将1μg pcDNA3-ABAD表达质粒DNA用Lipofectmine2000转染剂转染至COS-1细胞株,培养36 h。正常对照组则以1μg pcDNA3空载体转染;转染后细胞按上述方法进行缺氧处理,收集细胞,裂解,采用DNA片段化检测试剂盒定量检测ABAD正常表达和高表达条件下缺氧诱导的细胞死亡事件。结果与正常表达组相比,ABAD mRNA及蛋白水平均于缺氧后1 h开始下降,4~8 h后显着降低,至16 h表达几乎完全消失;提高ABAD的表达可明显降低缺氧所致的DNA片段化水平(P<0.05)。结论ABAD是缺氧高度敏感性蛋白,同时又是一个对缺氧性损害有明显保护作用的蛋白。因此,它可望成为急性缺血缺氧性疾病临床监测的一个新指标,并具有潜在治疗应用价值。(本文来源于《江西医学院学报》期刊2006年06期）
王朝东,吴晓牧,胡国柱,张昆南,徐红薇[2]（2006）在《Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白在急性缺氧性细胞损害中的表达调节机制研究》一文中研究指出目的探讨Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白(ABAD)的基因表达调控机制及其对缺氧反应的分子生物学机理。方法根据Genebank中包含ABAD基因全长序列的DNA序列设计引物,PCR扩增ABAD基因上游启动子区全长2055bp之片段,并将其亚克隆至荧光酶报告载体LuciferasepGL3中的NheI/SmaI位点,构建ABAD启动子-pGL3表达质粒(P-2055)及5′-端截短的ABAD启动子-pGL3表达载体(P-1453,P-128)。用脂质体Lipofectmine2000将1μg待转染的空pGL3表达载体DNA(阴性对照)及ABAD全长和5′截短启动子-pGL3表达质粒DNA(P-2055,P-1453,P-128)转染至对数生长的COS-1细胞中。细胞转染后48h,收集细胞,裂解,提取蛋白,以Dual-luciferasere-porter系统为底物并采用荧光测定仪测定荧光酶活性。采用相对活性方法比较全长和截短的ABAD启动子活性,以确定核心启动子序列。采用缺氧箱分别诱导细胞缺氧后,测定ABAD核心启动子序列的活性改变。结果ABAD全长启动子-pGL3表达质粒(P-2055)的荧光酶活性较pGL3空表达载体高300倍以上(P<0.001)。该全长启动子截短至-128bp(P-128)时,活性仍为全长序列的105%,而将该128bp序列去除后,其活性几乎全部消失。ABAD核心启动子序列(P-128)经缺氧处理1、4、8、16h后,其活性分别降为正常氧状态的(64.5±1.7)%、(51.4±1.6)%、(17.8±1.1)%、(8.3±0.3)%,各缺氧时间点相对活性与正常氧状态相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论ABAD上游128bp为该基因的核心启动子序列,决定了ABAD的表达活性。该启动子对缺氧高度敏感,其对缺氧的反应是ABAD缺氧性改变的主要分子机理。(本文来源于《实用临床医学》期刊2006年12期）
蔡逸云[3]（1998）在《酒精脱氢酶3基因型与口腔癌和咽喉癌的风险》一文中研究指出饮酒是一种口腔癌和咽喉癌的强风险因子。酒精脱氢酶3型(ADH_3)代谢乙醇形成乙醛,后者是一种致癌剂。作者评估快代谢ADH_3~1等位基因(ADH_3~(1-))的纯合个体是否比慢代谢ADH_3~2等位基因(ADH_3~(1-2)和ADH_3~(2-2))的个体,在饮酒时有发生口腔癌更大的风险。 方法 用口腔上皮细胞样本的分子遗传学分析确定,137例有组织学确诊口腔癌和146例对照组(即没有口腔癌病史的个体)的ADH_3~(1-1)基因型,用多因子logistic回归分析估测风险。 结果 与有ADH_3~(1-1)基因型不饮酒者比较,至少每(本文来源于《国外医学.口腔医学分册》期刊1998年06期）
蔡逸云[4]（1998）在《3基因型酒精脱氢酶与口腔癌和咽喉癌的风险》一文中研究指出作者评估快代谢ADH_3~1等位基因(ADH_3~(1-1))的纯合个体是否比慢代谢ADH_3~2等位基因(ADH_3~(1-2)和ADH_3~(2-2))的个体是否在饮酒时有发生口腔癌更大的风险。 用口部上皮细胞样本的分子遗传学分析,确定137例有组织学确诊口腔癌和146例对照组(即没(本文来源于《国外医学(分子生物学分册)》期刊1998年02期）
屈卫东,吴玮,吴德生,王晋清,张雪[5]（1998）在《酒精脱氢酶基因2的扩增参数探讨》一文中研究指出酒精脱氢酶（ＡＤＨ）在人类酒精氧化代谢过程中发挥着重要作用。机体摄入的醇类超过８０％是依靠该酶作用。ＡＤＨ２具有很高的活性，被认为是最关键的酶。编码该酶的ＡＤＨ２基因与ＡＤＨ１和ＡＤＨ３基因在基因序列上有９４％是一致的。因而在扩增过程中存在相互干扰，进而影响基因多型的确定。为区别它们，我们在其３′端设计了３个不翻译的碱基使其有别于ＡＤＨ３基因。同时对该基因的扩增参数（复性温度、复性时间、引物浓度）进行优化，改善了运行条件，排除干扰，为利用限制性片段长度多态型进行基因多态型研究提供了较好的实验基础。(本文来源于《现代预防医学》期刊1998年01期）
[6]（1995）在《工业酵母酒精脱氢酶的活性染色改进方法》一文中研究指出工业酵母酒精脱氢酶的活性染色改进方法田边凡之助，新山拓男，等６人Ｊ．Ｂｒｅｗ．ＳｏｃＪａｐａｎ．１９９４，８９（１０）．８２２～８８０对改善酵母菌酒精脱氢酶（ＡＤＨ）的话性染色方法，相对流动性（Ｒｍ）的测定及ＡＤＨ同工酶的染色活性进行了研究。以无细胞...(本文来源于《酿酒科技》期刊1995年06期）
酒精脱氢酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白(ABAD)的基因表达调控机制及其对缺氧反应的分子生物学机理。方法根据Genebank中包含ABAD基因全长序列的DNA序列设计引物,PCR扩增ABAD基因上游启动子区全长2055bp之片段,并将其亚克隆至荧光酶报告载体LuciferasepGL3中的NheI/SmaI位点,构建ABAD启动子-pGL3表达质粒(P-2055)及5′-端截短的ABAD启动子-pGL3表达载体(P-1453,P-128)。用脂质体Lipofectmine2000将1μg待转染的空pGL3表达载体DNA(阴性对照)及ABAD全长和5′截短启动子-pGL3表达质粒DNA(P-2055,P-1453,P-128)转染至对数生长的COS-1细胞中。细胞转染后48h,收集细胞,裂解,提取蛋白,以Dual-luciferasere-porter系统为底物并采用荧光测定仪测定荧光酶活性。采用相对活性方法比较全长和截短的ABAD启动子活性,以确定核心启动子序列。采用缺氧箱分别诱导细胞缺氧后,测定ABAD核心启动子序列的活性改变。结果ABAD全长启动子-pGL3表达质粒(P-2055)的荧光酶活性较pGL3空表达载体高300倍以上(P<0.001)。该全长启动子截短至-128bp(P-128)时,活性仍为全长序列的105%,而将该128bp序列去除后,其活性几乎全部消失。ABAD核心启动子序列(P-128)经缺氧处理1、4、8、16h后,其活性分别降为正常氧状态的(64.5±1.7)%、(51.4±1.6)%、(17.8±1.1)%、(8.3±0.3)%,各缺氧时间点相对活性与正常氧状态相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论ABAD上游128bp为该基因的核心启动子序列,决定了ABAD的表达活性。该启动子对缺氧高度敏感,其对缺氧的反应是ABAD缺氧性改变的主要分子机理。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酒精脱氢酶论文参考文献
[1].王朝东,吴晓牧,胡国柱,柳喆,徐红薇.Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白在缺氧性细胞中的表达及其对细胞缺氧性损害的保护作用[J].江西医学院学报.2006
[2].王朝东,吴晓牧,胡国柱,张昆南,徐红薇.Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白在急性缺氧性细胞损害中的表达调节机制研究[J].实用临床医学.2006
[3].蔡逸云.酒精脱氢酶3基因型与口腔癌和咽喉癌的风险[J].国外医学.口腔医学分册.1998
[4].蔡逸云.3基因型酒精脱氢酶与口腔癌和咽喉癌的风险[J].国外医学(分子生物学分册).1998
[5].屈卫东,吴玮,吴德生,王晋清,张雪.酒精脱氢酶基因2的扩增参数探讨[J].现代预防医学.1998
[6]..工业酵母酒精脱氢酶的活性染色改进方法[J].酿酒科技.1995
标签：Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白; 细胞; 缺氧; 损害; 保护作用;