论文摘要
目的FGFR2是参与骨骼发育过程的重要生长因子,其功能增强性突变可引起多种类型的骨骼遗传疾病-囟门早闭。有研究证实FGFR2参与了骨折愈合过程,但具体的分子机制和作用结果还不清楚。本研究在阐明FGFR2在骨折愈合过程中时空表达模式的基础上,着重探讨FGFR2功能改变对骨折愈合结果以及相关分子表达的影响。 方法 采用同窝出生的8-9周大小的FGFR2功能降低（基因型为FGFR2-Neo-250MT/WT:简称MT）和功能正常小鼠（野生型;简称WT）,建立胫骨不稳定骨折愈合模型,并对两组小鼠的骨痂进行X线摄片,HE染色,Brdu掺入检测,FGFR2、ColⅡ、Col Ⅹ、Ihh、OC的原位杂交检测,Tunel法对原位凋亡检测,在整体、组织、分子水平进行对比研究。 结果 X线摄片结果提示:MT和WT小鼠在21天时都基本愈合,骨折断端间有硬骨痂连接,即在整体水平上未发现FGFR2功能减少对骨折愈合结果造成明显影响。 HE染色结果提示:两组小鼠在骨折后5天开始出现软骨痂,第7、10天有大量软骨痂出现,第14天软骨痂开始大量被编织骨替代,第21天时WT小鼠软骨痂基本上全部被替代为编织骨,而MT小鼠还残留少量软骨痂未被替代。这些结果表明在组织学水平上可见MT小鼠愈合速度比WT小鼠略有延迟。 Brdu掺入检测细胞增生和FGFR2、Col Ⅱ、Col Ⅹ、Ihh、OC的原位杂交检测结果提示:骨折后第3天,FGFR2表达在骨折断端的骨膜下细胞中,这些细胞同时表达成骨细胞的标记基因OC,WT小鼠的表达较MT小鼠高,并且增生更明显,提示FGFR2对成骨细胞的增生、分化有促进作用。 骨折后第5天,FGFR2在增生的软骨细胞中没有表达,这些软骨细胞Col Ⅱ表达呈强阳性,Brdu检测发现软骨细胞增生非常活跃,WT和MT小鼠之间无明显差别。但是,FGFR2在骨膜下的成骨细胞中明显表达,WT小鼠表达更明显,并且同OC表达强度变化趋势一致,WT小鼠成骨细胞增生较MT小鼠明显。 骨折后第7天,FGFR2与Ihh均表达于肥大前软骨细胞内,并且表达的部位和强度上变化趋势非常相似,WT小鼠比MT小鼠表达更明显;Col Ⅹ表达部位与FGFR2
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标签：骨折愈合论文; 遗传修饰小鼠模型论文;