LaPO4:Ce,Tb荧光纳米粒子测定生物分子的研究

论文摘要

近年来,以稀土荧光纳米材料作为标记物质的分析检测技术引起了研究人员广泛的兴趣。稀土荧光纳米材料具有毒性低、Stokes位移大、荧光发射强度高、半峰宽窄和荧光寿命长等优异的性能,不仅能够克服有机类发光标记物光漂白的缺点,还解决了量子点的细胞毒性和光闪烁等问题。稀土荧光纳米材料在生物领域显示了很好的应用前景,促进了生物学研究的进步与发展。本实验采用水热法合成了膦酰基羧酸共聚物（POCA）包被的LaPO4:Ce,Tb荧光纳米粒子,并对其进行表征。荧光光谱表明,LaPO4:Ce,Tb粒子最大激发和发射峰位分别位于278和545nm。XRD实验表明,合成的LaPO4:Ce,Tb纳米粒子为六方晶系。电镜成像表明,合成产物形貌为类球形,粒度约为30nm,粒子分散性较好。以LaPO4:Ce,Tb纳米粒子作为能量供体,纳米金作为能量受体,细胞色素C为“桥”,建立了检测细胞色素C的新方法。确定了反应的最佳条件：在pH值为7.0的硼酸-硼砂缓冲溶液,LaPO4:Ce,Tb纳米粒子的浓度为7.6×10-4mol·L-1,纳米金的加入量为300μL,35℃下反应40min。体系的相对荧光强度与细胞色素C的浓度呈良好的线性关系,线性相关系数R为0.9962,线性范围为0.333～21.0μg·mL-1,方法的检出限为0.2μg·mL-1。对细胞色素C注射液中细胞色素C含量进行测定,加标回收率为100～101%,回收率良好。以Cu2+修饰的POCA包被LaPO4:Ce,Tb纳米粒子为荧光探针,基于Cu2+和组氨酸的高亲和性,建立了定量分析组氨酸含量的新方法。当磷酸盐缓冲溶液的pH为7.5,LaPO4:Ce,Tb纳米粒子的浓度为4.6×10-4mol·L-1, Cu2+的浓度为1.67×10-5mol·L-1,30℃下反应10min,体系的荧光强度与组氨酸的浓度呈良好的线性关系,线性相关系数R为0.9945,线性范围为3.33～40.0μg·mL-1,方法的检出限为1.4μg·mL-1。对组氨酸复合片进行加标回收实验,回收率为96～103%,表明方法的准确度较高。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 第1章 绪论
• 1.1 稀土荧光纳米材料
• 1.1.1 稀土荧光纳米材料的发光机理
• 1.1.2 稀土荧光纳米材料的光学性能
• 1.1.3 稀土荧光纳米材料的制备
• 1.1.4 稀土荧光纳米材料的表面修饰
• 1.1.5 稀土荧光纳米材料在生物分析中的应用
• 1.2 细胞色素C的测定方法
• 1.2.1 光学分析法法
• 1.2.2 电化学法
• 1.2.3 共振瑞利散射法
• 1.3 氨基酸的测定方法
• 1.3.1 氨基酸分析仪法
• 1.3.2 气相色谱法
• 1.3.3 高效液相色谱法
• 1.3.4 分光光度法
• 1.3.5 电化学分析法
• 1.4 本课题的意义和主要内容
• 4：Ce,Tb-Au荧光共振能量转移体系测定细胞色素C'>第2章 基于LaPO₄：Ce,Tb-Au荧光共振能量转移体系测定细胞色素C
• 2.1 实验仪器和试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 主要试剂的配制
• 4：Ce,Tb纳米粒子的合成、纯化及表征'>2.2.2 LaPO₄：Ce,Tb纳米粒子的合成、纯化及表征
• 2.2.3 纳米金的合成
• 2.2.4 细胞色素C标准曲线的绘制
• 2.2.5 细胞色素C注射液的测定
• 2.2.6 荧光测定方法
• 2.3 结果与讨论
• 4：Ce,Tb纳米粒子的表征'>2.3.1 LaPO₄：Ce,Tb纳米粒子的表征
• 4：Ce,Tb纳米粒子的荧光光谱和纳米金的吸收光谱'>2.3.2 LaPO₄：Ce,Tb纳米粒子的荧光光谱和纳米金的吸收光谱
• 4：Ce,Tb粒子-纳米金的荧光共振能量转移'>2.3.3 LaPO₄：Ce,Tb粒子-纳米金的荧光共振能量转移
• 2.3.4 测定条件的选择
• 2.3.5 干扰试验
• 2.3.6 反应机理的探讨
• 2.3.7 标准曲线的线性范围和检出限的测定
• 2.3.8 样品的测定及回收率实验
• 2.4 小结
• 2+修饰POCA包被LaPO₄：Ce,Tb荧光纳米粒子测定组氨酸'>第3章 Cu²⁺修饰POCA包被LaPO₄：Ce,Tb荧光纳米粒子测定组氨酸
• 3.1 实验仪器和试剂
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 主要试剂的配制
• 4：Ce,Tb纳米粒子的制备'>3.2.2 LaPO₄：Ce,Tb纳米粒子的制备
• 3.2.3 标准曲线的绘制
• 3.2.4 样品中组氨酸含量的测定
• 3.2.5 荧光测定方法
• 3.3 结果与讨论
• 4：Ce,Tb纳米粒子荧光光谱的影响'>3.3.1 His对LaPO₄：Ce,Tb纳米粒子荧光光谱的影响
• 2+对LaPO₄：Ce,Tb纳米粒子荧光光谱的影响'>3.3.2 Cu²⁺对LaPO₄：Ce,Tb纳米粒子荧光光谱的影响
• 4：Ce,Tb-Cu²⁺体系荧光强度的影响'>3.3.3 His对LaPO₄：Ce,Tb-Cu²⁺体系荧光强度的影响
• 3.3.4 测定条件的选择
• 3.3.5 干扰试验
• 3.3.6 反应机理的探讨
• 3.3.7 标准曲线的线性范围和检出限的测定
• 3.3.8 样品的测定及回收率实验
• 3.4 小结
• 第4章 结论
• 参考文献
• 致谢