论文摘要
辐照杀菌技术在中药、食品加工领域已产业化应用,但在技术应用过程中,遇到产品中含有耐辐射的微生物,会出现辐照杀菌效果不好,影响产品质量的问题。针对某公司的产品(金锁丸)在批量辐照杀菌过程中,有一批表现异常,累计辐照剂量达9kGy,但杂菌总数下降很少。本论文以该批产品(金锁丸)为供试样品,采用微生物分离、纯化和鉴定以及理化性状分析等技术,对该中药(金锁丸)中耐辐射微生物进行研究,获得如下结果:样品经过5kGy辐照预处理后,初步分离出6类微生物,将这6类微生物分离纯化后,采用8kGy剂量辐照,只有1种存活较多,初步确定该微生物为耐辐射的微生物。菌落呈规则的乳白色的同心圆状,不透明,湿润光亮,时间长就会出现表面粗糙,生长后期一般菌落出现黄色,长时间培养生长物可变成褐色,平皿内不产生色素沉淀。显微观察该微生物为杆状或椭圆形、生长到一定时期大部分有点弯曲、长1.556~2.148μm、宽0.944~1.021μm、有些以成对或短链排列、无鞭毛、无荚膜、不具有抗酸性、有芽孢、革兰氏染色为阳性、好氧,培养2d-3d的菌体比培养1d的要长而大。生理生化指标检测苷露糖、精氨酸双水解、纤维二糖、V.P.试验、M.R.试验、阿拉伯糖、肌醇、赖氨酸、鸟氨酸、七叶苷、乳糖、糖原、卫矛醇、尿素、棉子糖、苯丙氨酸、脱氨酶、木糖等反应为阴性,淀粉酶、明胶液化、核糖、氧化酶、果糖、海藻糖、蔗糖、半乳糖、麦芽糖、苷露醇、葡萄糖等反应为阳性,于7%NaCl溶液中能较好的生长。温度在34℃—37℃之间,pH值在5至9之间耐辐射菌生长良好。经过形态观察、生理生化特征分析及16S rDNA碱基序列测定和同源性分析,鉴定该菌株为弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus),该菌株的16S rDNA序列已在GenBank中注册,登录号为AB021185.1。分离的耐辐射微生物测得60Co—γ射线杀灭的D10值在生理盐水中为6.75kGy,在滤纸上为7.18kGy经过100℃高温处理40分钟后还能有一些存活,放在40W紫外灯光下进行照射,距离0.8m,照射30min,还有约15%存活。同时对其耐辐射机理进行了初步研究。