巴豆提取物对小菜蛾的生物活性研究

论文摘要

本试验以巴豆（Croton tiglium）提取物对小菜蛾（Plutella xylostella L.）的生物活性进行了研究,得到了拒食活性较高的组分,并以巴豆粗提物对小菜蛾进行了胃毒、生长发育抑制和产卵忌避等作用方式的研究,获得了如下研究成果。1、以工业酒精为溶剂,用超声波细胞粉碎机进行振荡提取,得到巴豆粗提物。其提取率为19.59%。浓度为10mg/ml的巴豆粗提物乙醇溶液对小菜蛾的选择性拒食率为73.84%。2、巴豆粗提物对小菜蛾3龄幼虫的拒食活性随浓度的增加而增强,回归方程为y=1.6787+4.0459（r=0.9725）,拒食中浓度AFC50为3.70±0.33mg/ml。3、巴豆粗提物对小菜蛾幼虫有明显的生长发育抑制作用。抑制效果随溶液浓度的增大而增大,回归方程为y=1.6473x+3.9876（r=0.9354）,抑制中浓度AGC50为4.12±0.36mg/ml。4、巴豆粗提物对小菜蛾成虫有较强的产卵忌避作用,产卵忌避效果随溶液浓度的增大而增大,回归方程为y=1.6905x+3.9172（r=0.9850）,产卵忌避中浓度AOC50为4.37±0.37mg/ml。5、巴豆粗提物对小菜蛾幼虫的触杀和胃毒作用不明显。6、取巴豆粗提物稠膏,加10倍量的蒸馏水200ml,装入分液漏斗中,采用液—液分配,依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯和水萃取,最后分别将这些萃取液减压浓缩至稠膏。浓度为10mg/ml的石油醚、乙醚、乙酸乙酯和水的萃取物乙醇溶液对3龄小菜蛾幼虫的选择性拒食率分别为84.99%、29.56%、17.98%和6.78%。其中石油醚萃取物浓度为10 mg/ml的乙醇溶液对小菜蛾3龄幼虫选择性拒食率相对巴豆粗提物相同浓度乙醇溶液提高了11.15%。7、将巴豆石油醚萃取物进行柱层析分离,以硅胶为固定相,以石油醚、乙酸乙酯和甲醇为流动相进行梯度洗脱。其中石油醚:乙酸乙酯（50:50）,乙酸乙酯:甲醇（90:10）的洗脱合并物（流分I）浓度为10 mg/ml的乙醇溶液对小菜蛾3龄幼虫选择性拒食率最高,为97.39%,较前一过程提高了12.4%。8、将柱层析中拒食活性最高的流分进行薄层层析分离,以硅胶为载体,以石油醚:乙酸乙酯:乙醇=10:3:1（V/V/V）为展开剂进行分离。共得到3条带,其中中间的条带（I-2）浓度为10 mg/ml的乙醇溶液对小菜蛾3龄幼虫选择性拒食率最高,为99.65%,较前一过程提高了2.26%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 1 文献综述
• 1.1 植物性杀虫剂的研究概况
• 1.1.1 植物性杀虫资源
• 1.1.2 植物性杀虫物质有效成分
• 1.1.3 植物性杀虫物质有效成分分析方法
• 1.1.4 植物性杀虫剂的局限性
• 1.1.5 农药的研究趋势
• 1.2 大戟科植物杀虫研究进展
• 2 研究路线
• 3 材料与方法
• 3.1 中草药活性成分的粗提及生物活性检测
• 3.1.1 试验材料
• 3.1.2 中草药活性成分的初步提取
• 3.1.3 14种中草药粗提物选择性拒食作用生物测定
• 3.1.4 巴豆粗提物对小菜蛾幼虫的选择性拒食中浓度测定
• 3.1.5 巴豆粗提物乙醇溶液对小菜蛾幼虫的触杀作用测定
• 3.1.6 巴豆粗提物乙醇溶液对小菜蛾幼虫的胃毒作用
• 3.1.7 巴豆粗提物乙醇溶液对小菜蛾幼虫的生长发育抑制作用
• 3.1.8 巴豆粗提物乙醇溶液对小菜蛾成虫的产卵忌避作用
• 3.2 巴豆粗提物的液─液萃取及萃取物拒食活性测定
• 3.2.1 供试材料
• 3.2.2 供试虫源
• 3.2.3 主要试剂
• 3.2.4 主要仪器
• 3.2.5 巴豆粗提物的液─液萃取法
• 3.2.6 选择性拒食作用的生物测定法
• 3.3 巴豆石油醚萃取物的柱层析分离及拒食活性测定
• 3.3.1 供试材料
• 3.3.2 供试虫源
• 3.3.3 主要试剂
• 3.3.4 主要仪器
• 3.3.5 巴豆石油醚萃取物的柱层析分离方法
• 3.3.6 选择性拒食作用的生物测定方法
• 3.4 巴豆柱层析高效流分的薄层层析及拒食活性测定
• 3.4.1 供试材料
• 3.4.2 供试虫源
• 3.4.3 主要试剂
• 3.4.4 主要仪器
• 3.4.5 巴豆柱层析流分的薄层层析分离
• 3.4.6 选择性拒食作用的生物测定方法
• 4 结果与分析
• 4.1 14种中草药粗提物对小菜蛾幼虫的生物活性
• 4.1.1 14种中药材的提取率
• 4.1.2 14种中草药粗提物对小菜蛾幼虫的选择性拒食作用
• 4.1.3 巴豆粗提物对小菜蛾幼虫的选择性拒食中浓度
• 4.1.4 巴豆粗提物乙醇溶液对小菜蛾幼虫的触杀作用
• 4.1.5 巴豆粗提物乙醇溶液对小菜蛾幼虫的胃毒作用
• 4.1.6 巴豆粗提物乙醇溶液对小菜蛾幼虫的生长发育抑制作用
• 4.1.7 巴豆粗提物乙醇溶液对小菜蛾成虫的产卵忌避作用
• 4.2 巴豆粗提物液─液萃取物对小菜蛾幼虫的选择性拒食作用
• 4.3 巴豆柱层析流分对小菜蛾幼虫的选择性拒食作用
• 4.4 巴豆薄层层析流分对小菜蛾幼虫的选择性拒食作用
• 5 总结与讨论
• 5.1 溶剂的选择
• 5.2 植物活性成分的提取方法
• 5.3 植物活性成分的分离方法
• 5.3.1 液─液萃取法
• 5.3.2 柱层析
• 5.3.3 薄层层析
• 5.4 巴豆提取物对小菜蛾的生物活性
• 5.4.1 巴豆粗提物对小菜蛾幼虫具有较强选择性拒食作用和生长发育抑制作用
• 5.4.2 巴豆粗提物对小菜蛾成虫具有较强的产卵忌避作用
• 5.4.3 巴豆提取物对小菜蛾幼虫的拒食活性及增强趋势
• 5.5 需进一步研究的问题
• 参考文献
• 致谢