实验大鼠脑出血后神经细胞再生的研究

论文摘要

脑出血是严重威胁人类健康的疾病，具有较高的致残率，如何能使患者受损的神经功能得到恢复，一直是神经科学的重要课题。神经细胞再生是神经功能重塑的重要内容，各种脑损伤后神经细胞再生是近年来神经科学研究的热点，然而脑出血后神经细胞再生的研究却相对滞后。较之其它类型脑损伤，脑出血可能具有更为复杂的损伤机制，涉及更多的细胞类型和更为复杂的脑的微环境的变化。脑出血后神经细胞再生的发生和发展可能具有有别于其它损伤类型的机制和特点。目的：探讨成年大鼠脑出血模型中发生的神经细胞再生现象及其特点；明确年龄因素对大鼠脑出血后神经细胞再生的影响；研究脑出血后血肿内的某些成份对脑出血后神经细胞再生的可能影响；探讨外源性的促红细胞生成素（EPO）对脑出血后神经细胞再生及神经功能恢复的作用。方法：本研究主要分为4个部分。（1）制作成年大鼠脑出血模型，采用蛋白印迹分析、免疫组织化学染色等方法对5-溴-2′-脱氧尿苷（BrdU）、GFAP及未成熟神经元标记Doublecortin（DCX）等进行分析。（2）应用老年大鼠制作脑出血模型，蛋白印迹分析、免疫组织化学染色等方法对BrdU、GFAP及DCX和多唾液酸神经细胞粘附分子（PSA-NCAM）等进行分析，并与成年大鼠进行比较。（3）成年大鼠制作脑出血模型后，应用去铁敏治疗，蛋白印迹分析及免疫组织化学方法检测DCX的表达。；成年大鼠制作脑出血加水蛭素模型，应用蛋白印迹分析及免疫组织化学方法检测DCX的表达；1U凝血酶注入右侧基底节制作凝血酶模型，应用蛋白印迹分析及免疫组织化学方法检测DCX的表达。（4）成年大鼠制作脑出血模型后，采用EPO治疗，应用蛋白印迹分析及免疫组织化学方法检测DCX的表达，应用动物行为学分析研究大鼠运动功能的恢复。结果：成年大鼠脑出血后DCX的表达于脑出血后7天即开始增加，2周后达到高峰，然后于1月及2月逐渐减少。免疫组织化学检测可见脑出血2周后出血侧脑室下带及基底节大量的DCX阳性细胞，多数DCX阳性的细胞也共同表达BrdU。GFAP染色可见脑出血14天后血肿周围大量的反应性星形胶质细胞，反应性星形胶质细胞的变化与脑出血后DCX的表达时间相吻合。老年大鼠DCX的表达较成年大鼠弱，DCX阳性细胞较成年大鼠稀疏，脑出血14天血肿周围GFAP阳性的反应性星形胶质细胞较成年大鼠少，但老年大鼠在脑出血后也出现大量的DCX阳性细胞，且反应时间与成年大鼠相似。成年大鼠脑出血模型应用去铁敏治疗后，DCX的表达无明显变化。脑出血后加入5U的水蛭素，可明显抑制脑出血后DCX的表达。应用1U凝血酶注入大鼠基底节，可使DCX的表达增加，且7天时达到高峰。脑出血后应用外源性EPO治疗，大鼠运动功能14-30天后较对照组明显改善，但出血侧基底节DCX的表达无明显变化。结论：成年大鼠基底节脑出血后脑室下带的神经元前体细胞大量增殖，并向受损的纹状体区移行。尽管脑出血后老年大鼠神经细胞再生较成年大鼠减弱，但在脑室下带及受损纹状体仍可见较多的神经元前体细胞。凝血酶可能在脑出血后神经细胞再生中起重要作用。外源性EPO能明显改善脑出血大鼠的运动功能，但本研究未能明确其对脑出血后神经细胞再生的影响。

论文目录

• 致谢
• 序言
• 摘要
• Abstract
• 缩略语及中英文对照
• 目次
• 1 引言
• 2 正文
• 2.1 材料与方法
• 2.2 结果
• 2.3 讨论
• 3 结论
• 论文参考文献
• 综述
• 综述参考文献
• 作者简历