大鼠髂骨肌淋巴结法和小鼠脾脏法制备抗恩诺沙星单克隆抗体的比较研究

论文摘要

本实验将恩诺沙星与牛血清白蛋白用EDC法进行偶联，成功地制备了免疫抗原，分别免疫Wister大鼠和BALB／C小鼠；利用恩诺沙星与鸡卵清蛋白偶联制备的包被抗原采用间接ELISA的方法筛选阳性鼠和阳性杂交瘤细胞；采用杂交瘤细胞建株技术，共获得四株分泌抗恩诺沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞株。利用常规的小鼠脾细胞法建立了M1B3和M4E6两个杂交瘤细胞株，利用大鼠髂骨肌淋巴结法建立了R2B1、R4D3两个杂交瘤细胞株。利用M1B3和R2B1及制备的单克隆抗体进行了杂交瘤细胞株的染色体众数、遗传稳定性；单克隆抗体的效价、分子量、亚类、有效浓度、纯度、蛋白质含量、亲和力、特异性十个方面的对比研究。通过两种不同的制备抗恩诺沙星单克隆抗体的方法的比较，验证了利用大鼠髂骨肌淋巴结法制备快速单克隆抗体的可行性。

论文目录

• 内容提要
• 前言
• 第一篇 文献综述
• 第一章 动物性食品中恩诺沙星残留及其检测研究进展
• 第二章 单克隆抗体制备的研究进展
• 第二篇 研究内容
• 实验一 小鼠脾脏法制备抗恩诺沙星单克隆抗体
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 实验二 大鼠髂骨肌淋巴结法制备抗恩诺沙星单克隆抗体
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 实验三 小鼠-小鼠、大鼠-小鼠杂交瘤细胞及其制备的单克隆抗体的对比研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 中文摘要
• 英文摘要
• 致谢
• 导师及作者简介