论文摘要
结核病是一种古老的疾病,早在十七世纪就已经存在。目前,由于全世界感染人口基数大,耐药结核病例大大增加和HIV/TB共感染情况严重,结核病正对人类构成巨大的威胁。为了预防结核病,全球已经半个多世纪前广泛接种了卡介苗BCG,但是BCG的免疫保护效果并不理想。随着生物技术的发展,很多新型疫苗正在陆续开发,例如重组卡介苗,减毒疫苗,蛋白疫苗和DNA疫苗等。他们各自都有不同的优势,但是否可以超越BCG的免疫保护效果还有待临床证明。在人群中给予结核杆菌疫苗免疫是防治结核感染、控制局部爆发流行最有效的措施。结核疫苗主要有两大类：活的结核杆菌疫苗和亚单位疫苗。结核亚单位疫苗虽然免疫原性没有活的结核杆菌疫苗强,但其免疫效力不受预先接触环境分枝杆菌和结核分枝杆菌的影响,而且背景清楚,安全性好,制备简单,可以用于成人强化免疫,是控制结核病爆发的理想疫苗。亚单位疫苗有三种形式：蛋白质疫苗、DNA疫苗和以病毒为载体的疫苗[1,2],其中蛋白质疫苗相对最为安全,易于被人们接受。目前,已经有超过20种的不同抗原用于诱导抗结核的免疫应答[3,4].分泌性抗原Ag85a属于Ag85蛋白家族,被认为具有较好的免疫原性。结核杆菌是一种巨噬细胞内寄生菌。结核病的发生与免疫系统密切相关。故人体对结核杆菌感染的免疫,以细胞免疫为主。在抗结核感染中,CD4+和CD8+T细胞起主要作用。结核杆菌活化的T细胞所释放出的淋巴因子,包括白介素-2（IL-2）,γ-干扰素（IFN-γ）,它们直接或间接杀伤结核杆菌。本研究采用来源于结核杆菌的重要抗原Ag85a和结核免疫相关的细胞因子IFN-y与IL-2,以结核分枝杆菌标准株H37R v基因组DNA为模板,扩增Ag85a基因,分别与鼠源IFN-y和IL-2的基因融合与表达质粒pET28a构建成重组质粒pet28a-Ag85a-IFN-γ和pet28a-Ag85a-IL-2。在大肠杆菌BL21（DE3）中表达去除信号肽的融合蛋白,纯化得到Ag85a—IFN-γ和Ag85a—IL-2的融合蛋白。用该蛋白皮下免疫C57BL/6小鼠,并进行免疫效果评价,以期筛选高效的加强免疫的蛋白亚单位疫苗。通过ELISA方法检测血清中IgG,IgG1和IgG2c水平,我们发现融合蛋白Ag85a-IFN-γ和Ag85a-IL-2实验组的免疫球蛋白水平均高于单独抗原,并且融合蛋白组IgG2c/IgG1的比值大于单独抗原,并且Ag85a—IL-2的免疫保护效果优于Ag85a-IFN-γ;流式细胞术检测胞内特异性CD4+和CD8T+细胞,Ag85a-IFN-γ和Ag85a-IL-2实验组CD8+/CD4+比例高于单独抗原。本实验成功构建并表达了Ag85a-IFN-γ和Ag85a-IL-2的融合蛋白,融合蛋白的免疫效果优于单独Ag85a抗原,并且Ag85a—IL-2的免疫效果优于Ag85a—IFN-y。
论文目录
相关论文文献
- [1].独山瓜馥木提取物促休眠型结核杆菌复苏的活性研究（英文）[J]. 天然产物研究与开发 2015(07)
- [2].结核杆菌如何成为“全球杀手”[J]. 大科技(百科新说) 2015(04)
- [3].独山瓜馥木促进休眠型结核杆菌复苏的成分和作用机制初探[J]. 天然产物研究与开发 2017(05)
- [4].小芝麻告诉你——呵护我们的身体 6.肺之大敌——结核杆菌[J]. 农村青少年科学探究 2014(Z2)
- [5].不同取痰方法在结核杆菌检测方法中的比较分析[J]. 齐齐哈尔医学院学报 2020(13)
- [6].不同方法检测痰和肺泡灌洗液中结核杆菌的分析[J]. 临床肺科杂志 2014(12)
- [7].科学家发现结核杆菌抗癌新方法[J]. 中学生物教学 2011(04)
- [8].结核杆菌蛋白芯片检测对活动性肺结核的诊断价值[J]. 中国实验诊断学 2010(09)
- [9].高海拔地区结核杆菌抗酸染色的方法改进[J]. 当代医学 2015(15)
- [10].乙酰化修饰调控结核杆菌异柠檬酸裂合酶的研究[J]. 中国生物工程杂志 2015(06)
- [11].120例肺结核患者的痰涂片检测及结核杆菌耐药性分析[J]. 检验医学与临床 2012(17)
- [12].浅谈教学中结核杆菌的几点认识[J]. 群文天地 2012(19)
- [13].《免疫》:一种人体蛋白质有助清除结核杆菌[J]. 现代生物医学进展 2015(01)
- [14].一种人体蛋白质有助清除结核杆菌[J]. 中国食品学报 2014(09)
- [15].依赖利福平结核杆菌肺结核临床80例分析[J]. 中国医药指南 2014(28)
- [16].利福平依赖结核杆菌筛选及分子生物学特征初步鉴定[J]. 河南预防医学杂志 2013(04)
- [17].进化的威力 人类的尴尬[J]. 生物进化 2010(02)
- [18].5种结核杆菌检测方法的临床应用价值[J]. 临床医药文献电子杂志 2019(08)
- [19].社区人群结核杆菌潜伏性感染诊断方法的成本效益研究[J]. 江苏预防医学 2018(03)
- [20].从一口痰诊断肺结核[J]. 恋爱婚姻家庭(养生) 2012(12)
- [21].复苏因子促进休眠结核杆菌复苏作用的研究[J]. 中国现代医学杂志 2009(17)
- [22].复苏因子促进休眠结核杆菌复苏作用的研究[J]. 中国医学工程 2008(02)
- [23].结核患者痰结核杆菌检验的方法探讨[J]. 世界最新医学信息文摘 2019(25)
- [24].泉州市1068例结核杆菌利福平耐药状况分析[J]. 海峡预防医学杂志 2017(02)
- [25].耐异烟肼结核杆菌耐药机制和临床诊疗的研究进展[J]. 大众科技 2019(11)
- [26].抗结核杆菌有效中药筛选及蛇床子对结核杆菌分子表达影响的研究[J]. 中国医药指南 2013(30)
- [27].我国利福平敏感结核杆菌rpoB基因利福平耐药决定区序列循证分析[J]. 实用医学杂志 2013(21)
- [28].2014-2016年广西结核杆菌/艾滋病病毒双重感染监测结果分析[J]. 现代预防医学 2017(14)
- [29].毛细管电泳法检测结核杆菌蛋白多肽类抗原活性成分研究[J]. 化学研究与应用 2014(10)
- [30].基于Faster-RCNN的结核杆菌自动检测方法研究与应用[J]. 图学学报 2019(03)