灰毡毛忍冬绿原酸提取分离技术研究

灰毡毛忍冬绿原酸提取分离技术研究

论文摘要

忍冬科忍冬属灰毡毛忍冬Lonicera macran thoides Hand.-Mazz.是湖南省金银花药材的主流品种,其干燥花蕾或带初开的花作为中药山银花已列入2005年版《中国药典》。灰毡毛忍冬作为中药材可用于痈肿疔疮,喉痹,丹毒,热毒血痢,风热感冒,温热发病等疾病的治疗。灰毡毛忍冬的主要有效活性成分绿原酸类物质,是我国作为绿原酸产品的主要来源之一,其绿原酸类物质的含量也比传统金银花高。国内对灰毡毛忍冬的报道很少,特别是绿原酸类物质的分离纯化工艺及其药理药效功能,均未见详细报道,严重阻碍了以灰毡毛忍冬为原料的天然药物和功能性食品的研究开发,随着国际交流的不断发展深入,灰毡毛忍冬可以作为主要资源推进国际市场。本文对灰毡毛忍冬中绿原酸类物质的提取、分离、纯化工艺进行了研究,以期为合理开发利用灰毡毛忍冬资源利用提供可靠的理论依据和技术支持。1绿原酸类物质检测方法的确定(1)紫外分光光度法以绿原酸标准品为参考,进行全波长扫描,确定绿原酸标准品和样品在波长为327nm处有最大吸收峰;制定标准曲线,回归方程为:y=0.0198x+0.0005,r=0.9993,在0.002~0.01mg/mL范围内检测溶液的浓度与吸光度有良好的线性关系。(2)高效液相色谱法绿原酸类物质的浓度和含量检测采用高效液相色谱法,检测条件为:色谱仪:LC-10ATVP高效液相色谱仪(日本岛津)色谱柱:色谱柱(大连化物所Kromasil 200 mm×4.6 mm 5μ)流动相:乙腈-0.1%冰醋酸溶液(13:87)检测波长:327 nm进样量:10μl流速:1 ml/min柱温:35℃2灰毡毛忍冬中绿原酸类物质的提取技术研究优化了灰毡毛忍冬中绿原酸类物质的提取技术参数,得到其最佳提取条件,浸提参数为:70%乙醇溶液,时间60min,料液比为1:12,浸提温度:70℃,pH值为5,浸提次数2次,绿原酸类物质含量为:6.55%。3灰毡毛忍冬中绿原酸类物质的分离纯化技术研究绿原酸类物质的分离纯化主要是采用大孔树脂法,通过筛选各种类型的大孔树脂,静态吸附试验和动态吸附试验的结果显示:大孔树脂NKA-9对绿原酸类成化合物的吸附量27.78 mg/ml,解析率可到达85.3%,其动态吸附量为:27.55 mg/ml。经大孔树脂分离纯化后得到的产品纯度为:75.68%,其回收率为82.38%。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 前言
  • 1 药用金银花的资源分布情况
  • 2 金银花的药用历史
  • 3 金银花的国内外研究动态
  • 3.1 金银花的主要有效成分
  • 3.2 药理作用
  • 4 绿原酸的研究状况
  • 4.1 绿原酸在植物中的分布
  • 4.2 绿原酸的生物合成
  • 4.3 绿原酸的理化性质
  • 5 研究目的与意义
  • 6 主要研究内容
  • 第二章 绿原酸检测方法的研究
  • 1 试验材料、设备及试剂
  • 1.1 材料与试剂
  • 1.2 试验仪器
  • 2 试验方法
  • 2.1 紫外分光光度法
  • 2.2 高效液相色谱法
  • 3 结果与分析
  • 3.1 最佳波长的确定
  • 3.2 标准曲线的建立
  • 3.3 重现性试验
  • 3.4 稳定性试验
  • 3.5 精密性试验
  • 3.6 高效液相色谱法的建立
  • 4 小结
  • 第三章 灰毡毛忍冬绿原酸提取技术研究
  • 1 试验材料、设备及试剂
  • 1.1 材料于试剂
  • 1.2 仪器设备
  • 2 方法
  • 2.1 浸提方法
  • 2.2 单因素试验
  • 2.3 多因素试验
  • 3 结果与分析
  • 3.1 单因素试验结果
  • 3.2 正交试验方差分析及结果
  • 4 小结
  • 5 讨论
  • 5.1 绿原酸理化性质对提取效果的影响
  • 5.2 提取溶剂的安全性与有效性的探讨
  • 第四章 灰毡毛忍冬中绿原酸纯化技术研究
  • 1 材料与仪器、试剂
  • 1.1 材料与试剂
  • 1.2 试验仪器
  • 2 方法
  • 2.1 灰毡毛忍冬中绿原酸的纯化技术的比较研究
  • 2.2 大孔树脂分离纯化绿原酸技术研究
  • 2.3 中样验证试验
  • 3 结果与分析
  • 3.1 纯化工艺比较试验
  • 3.2 树脂筛选
  • 3.3 大孔树脂吸附条件的优化
  • 3.4 绿原酸初步分离的洗脱条件
  • 3.5 纯化技术参数的确定
  • 3.6 大孔树脂NKA-9纯化技术放大试验
  • 4 大孔树脂NKA-9和HP-20的纯化比较试验研究
  • 4.1 大孔树脂NKA-9的试验
  • 4.2 大孔树脂HP-20纯化试验
  • 5 绿原酸纯化产品的谱学特征
  • 5.1 高效液相色谱指纹分析
  • 5.2 高效薄层层析分离方法的建立
  • 6 小结
  • 7 讨论
  • 7.1 大孔树脂分离纯化绿原酸的优越性
  • 7.2 影响大孔吸附树脂分离纯化绿原酸的因素
  • 7.3 大孔树脂HP-20与NKA-9纯化试验结果比较
  • 7.4 大孔树脂应用中存在的问题及解决的方法
  • 总结
  • 1 绿原酸检测方法的确定
  • 2 灰毡毛忍冬中绿原酸的提取技术参数
  • 3 灰毡毛忍冬中绿原酸的纯化技术参数
  • 参考文献
  • 致谢
  • 作者简历
  • 相关论文文献

    标签:;  ;  ;  ;  ;  

    灰毡毛忍冬绿原酸提取分离技术研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢