汉黄芩素抑制胆囊癌细胞GBC-SD迁移和侵袭机制的实验研究

论文摘要

以往的许多研究证实,从中药黄芩根中提取的汉黄芩素,能有效地抑制癌细胞生长,诱导肿瘤细胞的凋亡,该作用在多种肿瘤细胞株中得到印证。然而,对汉黄芩素在亚于诱导肿瘤细胞凋亡剂量的生物学效应却没有相关的研究。本实验中,我们发现,汉黄芩素在1-10μM的剂量时,不能诱导人胆囊癌GBC-SD细胞的细胞凋亡,却能显著地抑制胆囊癌细胞迁移和侵袭；基质金属蛋白酶（MMP）-2, MMP-9和磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）的表达受到汉黄芩素的显著抑制并呈浓度正相关性,而非通过磷酸化Akt途径。此外,与肿瘤转移抑制相关的Maspin基因被确认为汉黄芩素下游的靶点,在汉黄芩素的作用下Maspin mRNA和Maspin蛋白出现明显的上调；Maspin基因敲除后几乎导致汉黄芩素诱导的基质金属蛋白酶（MMP）-2,MMP-9和磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）表达被完全抑制,同时汉黄芩素对人胆囊癌GBC-SD细胞迁移力和侵袭力的抑制作用也几乎完全消失。这些结果表明,汉黄芩素通过上调与抑制肿瘤转移相关的maspin基因的表达来抑制人胆囊癌细胞迁移和侵袭。总之,本实验为汉黄芩素在胆囊癌的化疗和联合中医药的综合治疗提供相关的实验数据。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• Abstract
• 1.Introduction
• 2. Materials and methods
• 2.1. Cell culture
• 2.2.Drugs and reagents
• 2.3. Cell migration sssav and invasion assav
• 2.4. Western blot
• 2.5. Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction （RT-PCR） and Real-Time PCR Analysis
• 2.6. Small interference RNA
• 2.7 Statistical Analysis
• 3. Results
• 3.1.Wogonin inhibited the mobility and invasive potency of human gallbladder carcinoma GBC-SD cells
• 3.2. Wogonin down-regulated the expressions of MMP-2, MMP-9 and phosphorylated ERK1/2 in GBC-SD cells
• 3.3. Verification of maspin expression by quantitative PCR and Western blot assay in response to wogonin
• 3.4. RNA interference of maspin reversed wogonin-induced inhibition of migration and
• 3.5. Knockdown of maspin resulted in blocking of wogonin-induced inhibition of MMP-2, MMP-9 and phosphorylated ERK1/2 in GBC-SD cells
• 4.Discussion
• Acknowledgement
• References
• Legends to figures
• 攻读学位期间的研究成果
• 综述1
• References
• 综述2
• 参考文献
• 综述3
• 参考文献
• 综述4
• 参考文献
• 个人简历