论文摘要
胆管癌临床上起病隐匿，出现症状较晚，早期诊断困难，手术切除率较低，加之缺乏有效和敏感的化疗药物，预后较差。肿瘤的发生发展不仅是细胞增殖失控和细胞分化异常的结果，同时也与肿瘤细胞凋亡失衡有关，针对肿瘤细胞凋亡失衡对肿瘤细胞凋亡进行干预性调节就不失为一种肿瘤治疗策略。紫杉醇以其独特的药理作用成为热点抗癌新药，得到广泛应用。但紫杉醇诱导细胞凋亡的确切作用机制还有待进一步研究。 随着双向聚丙烯酰胺凝胶电泳和质谱技术的进步，使蛋白质组分析及其在临床疾病中的应用成为重要的研究方法。本研究从细胞凋亡为切入点，采用体外细胞培养、体外药物诱导胆管癌细胞凋亡、观察细胞形态学、细胞流式仪分析细胞周期、蛋白质组学技术分析蛋白表达谱的差异技术路线，研究化疗药物紫杉醇对胆管癌细胞凋亡相关机制，旨在为研究胆管癌的发病机制、阐明抗癌药物对胆管癌新的作用靶点，为指导临床用药提供基础理论平台。 第一章 紫杉醇对胆管癌细胞株QBC939作用敏感性的体外测定 目的：探讨紫杉醇对胆管癌细胞作用的敏感性，为胆管癌的临床治疗寻找新的治疗药物。方法：体外培养胆管癌细胞QBC939，采用不同浓度紫杉醇予以干预，通过细胞形态观察和MTT实验，初步研究人紫杉醇对人胆管癌细胞QBC939的敏感性。结果：各浓度紫杉醇对抑制人胆管癌细胞QBC939生长均有明显的抑制，具有时间—浓度依赖性。各浓度紫杉醇对QBC939细胞药物干预组和未干预组(阴性对照组)的抑制作用差异具有统计学意义(p＜0.05)。MTT法测得结果发现，紫杉醇对QBC939最大抑制率为67.02％，中效浓度为0.46μmol／L。结论：紫杉醇能抑制人胆管癌细胞QBC939的增殖，且抑制作用呈剂量和时间依赖效应。 第二章 紫杉醇诱导的胆管癌细胞凋亡及细胞动力学检测 目的：研究紫杉醇对胆管癌细胞周期及细胞凋亡率的影响，探讨紫杉醇诱导胆管癌细胞发生调亡的机制。方法：应用流式细胞仪(FCM)检测紫杉醇诱导胆管癌细胞凋亡，同时对细胞周期的变化和动力学予以检测。结果：流式细胞仪分析发现实验组：G0／G1期占
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