白木香内生真菌抗菌活性成分研究

论文摘要

本次研究从沉香中分离得到10株内生真菌,分别通过显微形态特征鉴定,初步确定均归属于半知菌亚门的1目1科4个属,分别是青霉属、曲霉属、丛梗孢属和拟青霉属。其中拟青霉属有6株菌,为沉香中的优势属。通过多种柱色谱技术分离纯化,从白木香内生真菌R7的发酵液中共分离得到10个单体化合物,根据化合物的理化性质和波谱数据（UV,IR,MS,1D和2DNMR）分别鉴定为：对羟基苯甲醛（1）、对羟基苯乙酸（2）、对羟基苯乙醇（3）、3,4-二羟基苯甲酸（4）、对甲基苯酚（5）、氮-（6-羟已基）-乙酰胺（6）、5-羟甲基糠醛（7）、（3β,5α,6β,22E）-麦角甾-7,22-二烯-3,5,6-三醇（8）、胸腺嘧啶脱氧核苷（9）和（一）一（11 R）-Eudesm-4-11-12-triol（10）.采用滤纸片琼脂扩散法测定化合物的抗菌活性,结果表明化合物2-7和10对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有抑制作用。化合物4,5,7和10具有抗金黄色葡萄球菌活性。化合物8和10有抗烟草青枯病菌和抗线虫活性,另外化合物8还具有抗香蕉枯萎病菌活性。采用MTT法测定化合物的细胞毒活性,结果显示化合物对人肝癌细胞SMMC-7721.人胃癌细胞SGC-7901和人慢性髓原白血病细胞K562三种指示瘤株的均无细胞毒活性。通过白木香内生真菌R7,对化合物4-（3’-（hydroxymethyl）oxiran-2’-y1）-2,6-dimethoxyphenol进行生物转化,经高效液相色谱（HPLC）法和薄层层析（TLC）法进行分析,结果显示此菌株具有对特定化合物生物转化的作用。本次实验中表现出一定稳定性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1. 序言
• 1.1 内生真菌抗菌活性化学成分的研究
• 1.1.1 内生真菌的定义
• 1.1.2 内生真菌提取物的抗菌活性
• 1.1.3 内生真菌产生的抗菌活性物质
• 1.2 白木香及其内生真菌的研究概况
• 1.2.1 白木香及沉香简介
• 1.2.2 白木香的产香机制的研究
• 1.2.3 白木香内生真菌及化学成分的研究
• 1.3 本课题研究的目的和意义
• 2. 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 沉香
• 2.1.2 内生真菌
• 2.1.3 肿瘤细胞株
• 2.1.4 人体病原菌
• 2.1.5 植物病原菌
• 2.1.6 腐生线虫
• 2.1.7 培养基
• 2.1.8 试剂
• 2.1.9 常用耗材
• 2.1.10 仪器设备
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 白木香内生真菌R7培养方法
• 2.2.2 白木香内生真菌R7化学成分的提取与分离方法
• 2.2.3 活性测定方法
• 2.2.4 转化菌株的发酵
• 2.2.5 转化产物分离
• 2.2.6 转化检测方法
• 2.2.7 沉香内生真菌分离纯化与鉴定
• 2.2.8 沉香内生真菌次生代谢产物粗提物分离
• 2.2.9 沉香内生真菌次生代谢产物粗提物的检测方法
• 3. 结果与分析
• 3.1 白木香内生真菌R7菌种鉴定
• 3.1.1 形态观察
• 3.1.2 分子鉴定
• 3.2 化合物结构鉴定
• 3.3 活性测定结果与分析
• 3.4 转化检测结果与分析
• 3.5 沉香内生真菌鉴定结果分析
• 4. 总结与讨论
• 参考文献
• 附录
• 个人简历
• 致谢