喹胺醇蛋白结合率及其标示残留物研究

论文摘要

喹胺醇是中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所研制的一种新型药物饲料添加剂,属于喹喔啉类不同侧链结构的衍生化合物,前期研究结果表明毒性和残留均低于同类药品。本实验利用平衡透析法对喹胺醇在鸡体内蛋白结合率研究,利用反相高效液相色谱法分析喹胺醇在鸡体内的主要排泄途径和标示残留代谢物,旨在对喹胺醇的用药及残留检测提供实验数据,进而为喹胺醇临床安全性全面评价提供科学依据。结果:（1）浓度为22.0、5.5、1.1μg/mL喹胺醇溶液,平衡透析时间为30±2 h,蛋白结合率分别为66.96±1.59%、75.30±1.92%、84.41±0.87%。（2）浓度为20.0、5.0、1.0μg/mL喹烯酮溶液,平衡透析时间为32±1 h,蛋白结合率分别为46.96±1.59%,55.30±1.92%,54.41±0.87%。（3）鸡口服喹胺醇200 mg/kg.B.W后,72 h内从粪中排泄原药的总量占总给药量的61%。（4）喹喔啉-2-羧酸可定为喹胺醇在鸡体内的一种标示残留物,其检测条件为:Agilent系列ZORBAX Eclipse XDB C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为1%的甲酸水溶液:甲醇=（40:60）,流速为1.0 mL/min,QCA的检测波长为320 nm。结论:（1）喹胺醇、喹烯酮的透析平衡时间均为30±3h,这与二者结构、分子质量相近有关;（2）喹胺醇与血浆蛋白结合有一定的饱和度,饱和后血浆蛋白的结合率与浓度间呈反比;（3）喹胺醇的血浆蛋白结合率比喹烯酮高;（4）喹胺醇在鸡体内的排泄主要由胃肠道直接排出体外;（5）喹喔啉-2-羧酸可以确定为喹胺醇在鸡体内的残留检测标示物。

论文目录

• 摘要
• Summary
• 第一章 文献综述
• 1.1 抗菌类药物饲料添加剂的发展概况
• 1.1.1 兽用抗菌类药物
• 1.1.2 兽用喹喔啉类药物
• 1.2 游离型药物浓度的测定
• 1.2.1 平衡透析法
• 1.2.2 超滤法
• 1.2.3 超速离心法
• 1.3 生物转化
• 1.4 兽药残留研究的意义及现状
• 1.4.1 兽药残留分析技术
• 1.4.2 喹喔啉类药物的残留毒性及残留检测进展
• 1.5 目的与意义
• 第二章 喹胺醇与鸡血浆蛋白结合率实验
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.2 结果
• 2.2.1 分析方法的确证
• 2.2.2 平衡透析时间的确定
• 2.2.3 喹胺醇在鸡血浆中蛋白结合率的测定
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 第三章 喹烯酮与鸡血浆蛋白结合率实验
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 方法
• 3.2 结果
• 3.2.1 分析方法的确证
• 3.2.2 平衡透析时间的确定
• 3.2.3 喹烯酮在鸡血浆中蛋白结合率
• 3.3 讨论
• 3.4 小结
• 第四章 喹胺醇鸡体内的排泄研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 药品与试剂
• 4.1.2 实验动物
• 4.1.3 给药途径
• 4.1.4 样品采样
• 4.1.5 色谱条件
• 4.1.6 样品处理
• 4.2 结果
• 4.2.1 线性范围与检测灵敏度
• 4.2.2 精密度试验
• 4.2.3 回收率测定
• 4.2.4 方法稳定性
• 4.2.5 粪样浓度随时间变化曲线
• 4.3 讨论
• 4.3.1 RP-HPLC 保留时间和吸收峰
• 4.3.2 喹胺醇的排泄
• 4.4 小结
• 第五章 喹胺醇标示代谢物的残留检测
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 实验药物
• 5.1.2 实验动物
• 5.1.3 给药途径
• 5.1.4 主要试剂
• 5.1.5 主要仪器
• 5.1.6 标准品配制
• 5.1.7 试剂配制
• 5.1.8 样品提取
• 5.1.9 样品净化
• 5.1.10 HPLC 色谱条件
• 5.1.11 固相萃取小柱的选择
• 5.1.12 标准曲线方程、线性范围和最低检测限的确定
• 5.1.13 回收率及精密度测定
• 5.2 结果
• 5.2.1 柱效实验结果
• 5.2.2 线性范围及最低检测限
• 5.2.3 药物的色谱行为
• 5.2.4 回收率的测定结果
• 5.2.5 实际测定
• 5.3 讨论
• 5.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 个人简介
• 导师简介
• 致谢