许旺细胞的诱导激活和神经桥接体构建的实验研究

许旺细胞的诱导激活和神经桥接体构建的实验研究

论文摘要

外周神经损伤后自体神经移植是首选的神经重建方法,但存在着供体来源受限、供区感觉、运动功能障碍、手术时间延长的缺点,难以满足长段神经缺损的要求。因此,寻找理想的种子细胞和支架材料复合培养而构建出功能性的人工神经是解决神经缺损疾患的主要手段之一。如何在体外获得大量分裂增殖和分化成熟的许旺细胞(Schwann cells,SCs)并选择合适的支架材料对完成组织工程化神经桥接体的构建至关重要。本实验选择细胞培养级生物制剂IL-1β作为SC的诱导激活剂,摸索出诱导激活SC分裂增殖和分化成熟的最佳作用条件,获取理想化的种子细胞。与此同时,应用新型生物可降解支架材料—人发角蛋白(Human Hair Keratins,HHK)作为构建人工神经桥接体的支架材料来弥补目前医学上应用较多的合成的可降解聚合物—聚羟基乙酸(PGA)、聚乳酸(PLA)等所带来的降解快、易崩解、支架整体易塌陷、局部酸性产物浓度过高的不足。将构建后的组织工程化外周神经桥接体移植到动物外周神经缺损部位,摸索出激活后的SC与HHK复合培养构建外周神经桥接体的最佳实验条件。 【目的】 1.检测IL-1β在体外培养的自体神经匀浆激活的巨噬细胞上的表达。 2.摸索细胞培养级生物制剂IL-1β对SC的诱导激活及其最佳作用浓度。 3.IL-1β诱导激活前后的SC与ECM凝胶修饰的HHK复合培养构建组织工程化外周神经桥接体的对比研究。 【方法】 1.将1月龄SD幼鼠坐骨神经远端切断,预溃变2d后,制成神经匀浆液,回注自体腹腔3d后,抽取腹腔液体培养巨噬细胞即得自体神经匀浆激活的巨噬细胞的条件培养基。应用ELISA法检测该条件培养基中的IL-1β的含量。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 第一部分 IL—1β在自体神经匀浆激活的巨噬细胞上的表达
  • (一) 目的和意义
  • (二) 材料和方法
  • (三) 结果
  • (四) 讨论
  • (五) 小结
  • 参考文献
  • 第二部分 细胞培养级生物制剂IL—1β诱导激活许旺细胞的实验研究
  • (一) 研究目的
  • (二) 材料和方法
  • (三) 结果
  • (四) 讨论
  • (五) 小结
  • 参考文献
  • 第三部分 IL—1β激活前后的许旺细胞与人发角蛋白复合培养构建神经桥接体的对比性研究
  • 一.IL—1β激活前的许旺细胞与人发角蛋白复合培养的实验研究
  • (一) 目的
  • (二) 材料和方法
  • (三) 结果
  • (四) 讨论
  • (五) 小结
  • 二. IL—1β激活后的许旺细胞与人发角蛋白复合培养的实验研究
  • (一) 目的和意义
  • (二) 材料和方法
  • (三) 结果
  • (四) 讨论
  • (五) 小结
  • 三. IL—1β激活前的许旺细胞与人发角蛋白复合培养构建组织工程化神经桥接体体内移植的实验研究
  • (一) 目的
  • (二) 材料和方法
  • (三) 结果
  • (四) 讨论
  • (五) 小结
  • 四. IL—1β激活后的许旺细胞与人发角蛋白复合培养构建组织工程化神经桥接体体内移植的实验研究
  • (一) 目的和意义
  • (二) 材料和方法
  • (三) 结果
  • (四) 讨论
  • (五) 小结
  • 参考文献
  • 文献综述一 雪旺细胞增殖的进展
  • 文献综述二 雪旺细胞在不同支架材料中复合培养的研究进展
  • 中英文对照缩略词表
  • 附录 攻读硕士学位期间发表论文及参加的学术会议
  • 致谢
  • 第一军医大学学位论文原创性声明
  • 学位论文版权使用授权书
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