细菌Ⅱ型分泌途径控制产碱假单胞菌（Pseudomonas alcaligenes）S2中卵磷脂酶的分泌

论文题目: 细菌Ⅱ型分泌途径控制产碱假单胞菌（Pseudomonas alcaligenes）S2中卵磷脂酶的分泌

论文类型: 博士论文

论文专业: 微生物学

作者: 吕静

导师: 陈三凤

关键词: 有机磷降解,转座子

文献来源: 中国农业大学

发表年度: 2005

论文摘要: 从水稻根际分离筛选出1株降解卵磷脂的有机磷降解产碱假单胞菌(Pseudomonas alcaligenes)S2。采用双亲接合的方法将带有Tn5转座子的质粒导入产碱假单胞菌S2菌株中进行转座子插入诱变,从5000个卡那霉素抗性的Tn5插入突变株中,筛选得到3株丧失解磷能力的突变株(M808、M1329和M1400)和1株解磷能力增强的突变株(M20)。对Tn5插入位点的基因进行DNA测序表明,丧失解磷能力突变株中被突变的基因分别是xcpS,xcpX和xcpW,它们分别编码XcpS,XcpX和XcpW蛋白,这些蛋白是细菌Ⅱ型分泌途径中的主要蛋白成分。将xcpS、xcpX和xcpW基因分别构建在pLAFR3载体上,通过双亲接合的方式分别导入上述M808、M1329和M1400三个丧失解磷能力突变株中进行功能互补试验,结果表明这3个基因都能使各自相对应的突变株恢复解磷能力。以上结果表明,在产碱假单胞菌中卵磷脂酶的分泌是通过Ⅱ型分泌途径来完成的。解磷能力的丧失是由于Tn5插入xcp基因簇中的某一基因破坏了卵磷脂酶向胞外的分泌,造成突变株不能降解有机磷。在解磷能力增强突变株M20中,被突变的基因与铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)PAO1中的chpA基因(参与细菌的颤动)同源性达88%。

论文目录:

第一章 绪论

1.1 本研究的目的及意义

1.2 溶磷菌及其在植物生长中的作用

1.3 革兰氏阴性菌可溶性蛋白的分泌

1.4 铜绿假单胞菌的Ⅱ分泌途径—Xcp系统

1.5 转座子和转座子标签法

1.6 本论文研究路线与目标

第二章 产碱假单胞菌S2解磷突变株的获得及生理特性研究

2.1 前言

2.2 材料和方法

2.3 结果

2.4 讨论

第三章 丧失解磷能力突变株中Tn5插入位点侧翼DNA序列的克隆和分析

3.1 前言

3.2 材料和方法

3.3 结果

第四章 丧失解磷能力突变株中突变基因的互补分析与功能研究

4.1 前言

4.2 材料与方法

4.3 结果

4.4 讨论

结论

参考文献

附录

发布时间: 2005-07-18

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